人脂肪细胞增殖分化激动剂的基因克隆及序列分析

摘要

目的:克隆人脂肪细胞增殖分化激动剂(hAAPD)基因,并鉴定该克隆基因序列的正确性。方法:根据Genebank中收录的人脂肪细胞增殖分化激动剂(hAAPD)基因序列,设计该基因上下游序列,经过PCR反应合成入脂肪细胞增殖分化激动剂(hAAPD)的cDNA,然后与pET28a+载体重组,筛选阳性克隆和DNA序列分析鉴定,经测序后与GenBank中人脂肪细胞增殖分化激动剂(hAAPD)基因进行同源性比较和序列分析。结果:PCR扩增出一个100bp左右的DNA片段,与载体重组后和DNA序列分析鉴定,DNA序列分析显示出克隆的DNA片段就是人脂肪细胞增殖分化激动剂(hAAPD)基因,且所克隆的基因共编码36个氨基酸,分子量为4.2KD,与GenBank中人脂肪细胞增殖分化激动剂(hAAPD)基因序列同源性达100％.结论:我们成功克隆的人脂肪细胞增殖分化激动剂(hAAPD)基因与Genebank中人脂肪细胞增殖分化激动剂(hAAPD)的基因序列完全一致,通过对其相关生物学信息的明确分析,为进一步应用分子生物学技术研究人脂肪细胞增殖分化激动剂与人体肥胖发生发展及自体脂肪组织的重新分布和脂肪移植存活等相关作用机制及应用该基因进行其基因蛋白表达奠定了基础.