人IFN-γ体外释放检测法的建立及其在结核病诊断中的应用

摘要

本研究旨在建立人IFN-γ体外释放检测法，用于人结核病的特异性诊断。克隆表达了人IFN-γ基因，利用纯化的重组IFN-γ免疫小鼠，获得两株高效价的单克隆抗体。rn 用所获得的单克隆抗体及兔抗IFN-γ多克隆抗体建立了检测人IFN-γ的夹心EIASA，检测灵敏度达到31.25pg/mL。采集111位结核病阳性病人与292位临床健康对照者肝素抗凝全血，利用结核菌特异性抗原ESAT-6/CFP-10融合蛋白体外刺激外周血淋巴细胞释放IFN-γ，用所建立的夹心ELISA及商品化试剂盒平行检测所有样本，结果两种方法的检测结果相符。rn 结核患者的检测灵敏度为95.5％，健康对照的阳性检出率为16.7％，患者与健康对照的阳性检出率差异极显著(P<0.01)，证实所建立的方法灵敏度与特异性均很高，具有良好的应用前景。