缺失蛋白ChiB的基因克隆、表达及酶的特性分析

摘要

本文为了研究64kD蛋白是否仍有几丁质酶活性，设计了两对chill基因缺失引物，以pUCm-chill为模板，扩增得到ORF分别为1842bp的chiB-4和1887by的chill-66，将两个chill基因片段连接pUCm-T克隆载体，分别转化大肠杆菌XL-Blue，克隆的基因同样都可以利用本身的启动子异源表达并分泌各自的蛋白。经SDS-PAGE分析，在转化子的培养物上清中分别检测到分子量为64kD和66kD的蛋白。