减毒沙门菌承载的质粒DNA在小鼠体内的组织代谢与免疫应答

摘要

研究外源质粒pcDNA3s被减毒伤寒沙门菌承载后在小鼠体内的组织分布与代谢,研究重组减毒鼠伤寒沙门菌的细胞免疫与体液免疫反应。将质粒pcDNA3s电转化到减毒鼠伤寒沙门菌SL8786,构建重组减毒鼠伤寒沙门菌疫苗,分别灌胃饲服昆明种小鼠。通过PCR方法检测质粒pcDNA3s经口服进入小鼠体内后在各组织中的分布及随时间变化的情况;利用时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)检测小鼠的血清抗体含量,检测重组菌引起的T细胞增殖和细胞毒性T淋巴细胞反应。口服后2周所有的组织均能检测到质粒,外源质粒在小鼠细胞内逐渐被清除;用流式细胞术检测贴壁培养的脾细胞中EGFP阳性率分别为19.20%和17.36%,口服免疫SL8786/pcDNA3s诱导产生了较强的特异性CTL应答。首次免疫后第2、5、8、11周分别测定血清中抗-HBs,口服免疫小鼠第11周的抗HBs含量最高。重组减毒鼠伤寒沙门菌是质粒的良好载体,是研究质粒代谢机制的有效途径,口服免疫途径均能在小鼠体内诱导细胞和体液免疫应答,可能是极具前景的乙型肝炎的治疗方法。