结核杆菌H37Rv株重组PstS1蛋白的表达纯化研究

摘要

目的:表达纯化结核杆菌H37Rv株重组PstS1(简称rPstS1)蛋白，为结核病血清学诊断价值研究及亚单位疫苗研制提供物质基础。方法：重组质粒pET15b—PstS1转化大肠埃希菌表达菌株BL21(DE3)plysE，IPTG诱导rPstS1蛋白表达。经SDS—PAGE电泳和Western blot鉴定后，优化表达条件，刚镍离子鳌合亲和层析柱纯化rPstS1蛋白，并用斑点金免疫渗滤法初步评价纯化蛋白的免疫反应性。结果：成功构建了重组质粒pET15b—PstS1，rPstS1蛋白约有30%以可溶性蛋白形式表达，经亲和层析后的rPsts1蛋白纯度为94.8%，有较好的免疫反应性。结论:构建的pET15b—PstS1重组质粒能高效表达有免疫反应性的rPstS1蛋白，经亲和层析后可得到高纯度的纯化蛋白。