rol C基因克隆及其植物表达载体构建

摘要

本文用Hind Ⅲ和EcoR I从植物表达载体pBI121中将“35S-GUS-NOSt”片段切下并克隆到植物表达载体pCAMBIA1301上,构建成植物表达载体pCB121。在此基础上,根据GeneBank公布的rolC序列设计引物,采用PCR方法从Ri质粒中克隆获得rolC基因并将其插入到植物表达载体pCB121的XbaⅠ和SacⅠ位点。利用根癌农杆菌介导,将rolC基因转化野生蕉(Musa itinerans Cheesm.)胚性细胞悬浮系。通过GUS组织染色检测、PCR和RT-PCR方法对再生苗鉴定,结果表明外源基因已经成功转入到野生蕉中并获得表达。本研究为下一阶段将rolC基因转化香蕉栽培品种,筛选矮化、根系发达的香蕉新种质奠定一定的基础。