hrpZPsg12基因植物表达重组体构建及转化烟草的研究

摘要

利用PCR技术扩增大豆细菌性斑点病菌hrZPsg12基因,将hrpZPsg12基因同质粒pBI121进行连接,构建pBI121-hrpZPsg12植物表达载体.采用热激法将重组质粒pBI121-hrpZPsg12转入到大肠杆菌DH5α中,经酶切测序验证后,通过冻融法转入土壤农杆菌LBA4404中.由根癌农杆菌介导,采用叶盘转化法,以烟草叶片为外植体经过预培养、侵染、共培养及选择培养,获得了103株转基因抗卡那霉素烟草植株;提取转基因烟草叶片的DNA用于PCR检测,PCR检测结果显示103株转hrpZPsg12基因烟草中86株呈阳性.本研究为进一步研究hrpZPsg12基因功能及培育抗病烟草品种奠定了基础.