猪传染性胃肠炎病毒重组N蛋白的纯化与活性鉴定

摘要

本研究将猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)N基因重组表达质粒pET一32a—N转化大肠杆菌，IPTG诱导表达获得融合N蛋白，SDS—PAGE检测大小约67KD。经镍离子亲和层析纯化后，获得高纯度的N蛋白．浓度为1500μg／ml。以该纯化蛋白免疫小鼠，产生的特异性血清抗体效价高达1：104，初步证实该重组N蛋白具有较好的免疫原性;同时Western—blotting 果证实重组N蛋白具有与猪传染性胃肠炎阳性血清抗体的反应原性。本研究为后续大量获取高纯度的TGEV的重组N蛋白，并开展相关应用研究奠定了基础。