毛细管电泳分析在多组分检测中的应用

摘要

将毛细管电泳-电化学检测技术引入免疫分析中，将辣根过氧化物酶(HRP)催化过氧化氢(H2O2)氧化邻氨基酚的酶促反应与其氧化产物的电极还原相偶合，利用毛细管电泳电化学检测技术间接检测邻氨基酚-H2O2-辣根过氧化物酶(HRP)体系中的HRP 含量。用此方法检测人血清甲胎蛋白（AFP）、癌胚抗原(CEA)、前列腺特异性抗原(PSA)、人绒毛膜促性腺激素(HCG)、血清总甲状腺素(T4)，并同时检测了血样中的PSA、HCG、CEA。根据不同链长DNA的电泳迁移率不同，利用毛细管分离技术实现了多种靶DNA的同时检测。利用生物素-亲合素相互作用，在探针DNA上标记辣根过氧化物酶，不同碱基长度的ssDNA 探针与其互补的靶DNA 杂交，形成dsDNA。通过毛细管电泳分离所生成的dsDNA 及未反应的ssDNA，HRP催化H2O2氧化邻氨基酚（OAP）生成3-氨基吩噁嗪（AP），通过电化学检测标记HRP的活性，可同时检测21-、39-、80-碱基序列的三种DNA 片段。