核因子κB的小干扰RNA防治自体移植静脉再狭窄的实验研究

摘要

目的：探讨核因子κB (NF-κB)的小干扰RNA (small interfering RNA,siRNA)对大鼠自体静脉移植术后血管内膜增殖及相应炎性细胞因子表达的影响。方法：雄性Wistar大鼠80只,随机分为空白组(A组,n=10)；自体静脉移植组(B组,n=18)；空载体组(阴性质粒脂质体医用蛋白胶复合物转染移植静脉,C组,n=26)和基因转染组(NF-κB siRNA阳离子脂质体医用蛋白胶复合物转染自体移植静脉,D组,n=26)。B组、C及D组需制作大鼠自体颈外静脉-腹主动脉移植模型,每组4个时点(3d,7d,14d,21d),相应时间点取移植静脉观察病理形态学变化,免疫组化检测增殖细胞核抗原( PCNA),PCR测定单核细胞趋化因子(MCP-1)和肿瘤坏死因子-α (TNF-α)的mRNA含量,Western blot测定NF-κ B p65蛋白的表达。结果：自体静脉移植术后,B、C和D组移植静脉血管桥均出现内膜增生变厚,新生内膜有大量PCNA阳性细胞,中膜平滑肌细胞增生活跃。术后3d,B组和C组MCP-1mRNA及TNF-α mRNA表达水平明显高于A组(P＜0.05),但D组水平明显低于C组(P＜0.05)。术后7d,B、C组NF-κ B p65蛋白表达水平明显高于A组(P＜0.05),与C组相比,D组NF-κB p65蛋白水平有一个明显降低(P＜0.05)。结论：NF-κ B的基因表达产物和MCP-1mRNA、TNF-αmRNA的表达有一定相关性,自体静脉移植术后新生内膜增生及炎性细胞因子表达在不同时相点呈动态变化。转染NF-κB siRNA阳离子脂质体复合物可抑制NF-κB的表达,减少MCP-1及TNF-αmRNA的表达,从而抑制移植静脉内膜增生和VSMC增殖,减轻再狭窄。