丹仙康骨胶囊提取液对体外培养兔成骨细胞增殖的观察

摘要

目的：观察丹仙康骨胶囊提取液对体外培养兔成骨细胞增殖的影响.方法：采用组织块细胞培养法进行兔成骨细胞的分离培养,通过碱性磷酸酶(ALP)细胞化学染色和Ⅰ型胶原免疫细胞化学染色鉴定成骨细胞.第二代纯化成骨细胞分为5组,实验组分别加入15mg/L、150 mg/L、1500mg/L、2000 mg/L的丹仙康骨胶囊提取液进行培养.培养24、72、168小时后测上清液中ALP含量判定不同浓度的丹仙康骨胶囊提取液对细胞生长的影响；168小时后通过图像分析系统对染色的Ⅰ型胶原检测,同时进行细胞计数.结果：(1)采用组织块培养法获得的成骨细胞经碱性磷酸酶(ALP)细胞化学染色和Ⅰ型胶原免疫细胞化学染色鉴定,阳性率分别达95％;(2)丹仙康骨胶囊提取液与成骨细胞培养24、72、168小时后,经AMP法检测上清液中ALP含量,不同浓度组的丹仙康骨胶囊提取液与对照组比较有显著性差异(P＜0.01),不同浓度的药物组组间比较也有差异(P＜0.05).结论：(1)采用组织块培养法可以获得纯化的成骨细胞.(2)丹仙康骨胶囊提取液能促进体外培养兔成骨细胞的增殖分化,且作用与药物浓度呈依赖性.