双生病毒

摘要： 近期,中国科学院微生物所叶健课题组在《PLoS Pathogens)在线发表了研究论文。该研究发现植物双生病毒卫星DNA编码的PC1蛋白可以通过靶向光信号途径的PIF转录因子家族调控的虫媒病毒抗性,促进虫媒病毒的快速传播,揭示了光调节双生病毒-烟粉虱-植物三者互惠共生的新机制。

摘要： (接上期)“母婴”传播?出生即成杀手长期以来,通过带毒烟粉虱取食植物,把病毒传播到健康植株,是科学家.们公认的双生病毒传播途径。过去50年间,曾有多位科学家提出,病毒是否会在烟粉虱“母婴”间垂直传播呢?但是,大部分研究并不支持带毒烟粉虱可以通过卵把双生病毒传给自己的后代成虫。几年前,浙大农学院昆虫科学研究所王晓伟教授团队的博士生卫静动了好奇心,她设计了一项实验,培育不同虫龄的烟粉虱成虫,观察其后代的带毒情况。实验结果令人吃惊:不同的阶段,病毒“卵传”情况存在很人差异。

摘要： 近日,中国农业科学院植物保护研究所作物有害生物功能基因组研究创新团队与中国科学院上海植物逆境生物学研究中心合作在国际知名期刊《自然通讯(Nature Communications)》上发表了研究论文。该论文发现双生病毒编码多个具备特殊定位的小蛋白,其中定位于高尔基体的V3能够抑制转录水平和转录后水平诱导的基因沉默,并对病毒致病性是必需的。

摘要： 烟粉虱是一种世界性重大害虫,传播植物病毒病,严重危害农林业生产.烟粉虱可以传播400多种植物病毒,主要包括双生病毒科Geminiviridae的菜豆金色花叶病毒属Begomovirus、长线病毒科Closteroviridae的毛病毒属Crinivirus、乙型线状病毒科Betaflexiviridae的香石竹潜隐病毒属Carlavirus和马铃薯Y病毒科Potyviridae的甘薯病毒属Ipomovirus.其中,菜豆金色花叶病毒Begomovirus是烟粉虱传播的主要病毒,在所传播的病毒中约占90％.治虫防病是控制此类病毒病的主要方法,双酰胺类及新烟碱类等杀虫剂是目前防治烟粉虱的主要药剂.目前生产中虽然还缺乏对病毒病高效的化学药剂,但抗病毒药剂的研发受到人们的广泛关注.通过对烟粉虱传播的病毒病类型,以及治虫防病的化学药剂进行综述,期望为烟粉虱及其传播的病毒病防控提供思路.

摘要： 双生病毒是一类在全球范围内危害严重的单链环状DNA病毒.本研究从2017年采自云南的胜红蓟样品中(YN2017)获得了一条菜豆金色花叶病毒属病毒和一条β卫星的全基因组序列.该双生病毒的全长序列与烟草曲茎病毒的相似性最高,为99.60％,确定为烟草曲茎病毒的分离物.YN2017 β卫星与中国胜红蓟黄脉β卫星的同源性最高,为90.8％.进一步分析发现,该β卫星的卫星保守区域(SCR)至富含腺嘌呤区(A-rich区)之间约1 kb的序列与中国胜红蓟黄脉β卫星相应序列的相似性高达97.2％;其包含的A-rich区上游与SCR之间约300 bp的序列与中国胜红蓟黄脉β卫星相应序列的相似性仅为70.2％,而与烟草曲茎β卫星相应序列的相似性最高,为97.3％.重组分析发现,所分离的β卫星是由中国胜红蓟黄脉β卫星和烟草曲茎β卫星重组产生.这是首次在中国发现由不同的β卫星重组产生的β卫星分子.

摘要： 近期,中国科学院微生物研究所郭惠珊研究组在《The Plant Cell》杂志上在线发表了研究论文。该研究发现虫媒DNA双生病毒诱导植物异常表达一个编码E3 ligase的印迹基因,通过泛素化降解DNA甲基转移酶,从而逃逸宿主甲基化抑制,促使病毒早期基因转录和病毒积累。

摘要： 近日,中国农业科学院植物保护研究所作物有害生物功能基因组研究创新团队揭示双生病毒C4蛋白抑制植物转录水平基因沉默的新机制,阐明双生病毒逃逸寄主防卫反应的分子机理,为双生病毒的防控及抗双生病毒品种的选育提供理论基础。相关研究成果在线发表在《公共科学图书馆·病原体(PLoS Pathogens)》上。

摘要： 双生病毒主要的传播介体是烟粉虱,双生病毒以持久性可循环的方式通过烟粉虱传播,在传播过程中病毒必须穿过烟粉虱的中肠、血淋巴和唾液腺等屏障.测定了携带双生病毒后烟粉虱的基因表达谱变化，发现中国番茄黄曲叶病毒可以显著影响烟粉虱体内细胞周期和代谢相关基因的表达，对烟粉虱造成不利影响;病毒侵染烟粉虱组织后可以显著激活烟粉虱的细胞和体液免疫反应，导致病毒数量的不断减少。进一步研究发现，YTLCV侵染烟粉虱激活其自噬反应，而自噬反应的激活却又抑制了病毒基因组的积累、病毒蛋白的合成和基因的转录。该研究揭示了自噬反应在媒介昆虫防御病毒侵染过程中的重要作用，为深入研究烟粉虱-双生病毒及类似媒介昆虫-植物病毒系统中相互作用的机制提供了蓝图。

摘要： 双生病毒是一类在多种作物上造成毁灭性危害的植物DNA病毒.双生病毒分布广、种类多、危害重、传播快,病害控制困难.了解双生病毒的种类分布、流行规律、变异进化及致病机理是制定安全、高效的双生病毒防控策略的关键.为此对我国双生病毒开展了系统研究.明确了我国双生病毒的种类分布、生物学特性及病害侵染循环特征。解析了双生病毒的种群遗传结构和变异进化规律。阐明了双生病毒及其伴随的卫星DNA的致病机理。

摘要： 本文通过采集云南不同气候类型下具有双生病毒典型症状的烟草样品,通过双生病毒简并引物PA和PB进行PCR检测,扩增出约500bp的目的条带.经克隆测序、序列分析表明云南烟草上双生病毒危害严重,具有丰富的种类多样性,它们分属于不同种病毒,而烟草曲径病毒则是云南烟草上双生病毒的优势种.

摘要： 世界上超过75％的植物病毒是由昆虫传播的,其中双生病毒和其传播介体烟粉虱是世界多个国家和地区的重大病虫害,严重威胁农业生产安全.烟粉虱是双生病毒传播的主要媒介,在双生病毒的传播过程中起着决定性的作用.同时，烟粉虱和双生病毒之间存在着复杂的相互作用机制。因此，要制定双生病毒的安全高效防治策略，关键在于明确这类病毒传播机理，做到有的放矢。

摘要： 双生病毒是世界范围内广泛发生的一类单链环状DNA病毒，已在多个国家和地区的作物上造成毁灭性灾害。为了更好地了解双生病毒的致病机理，本文围绕双生病毒抵御植物防御病毒的机制开展了研究。利用Solexa高通量测序技术测定了中国番茄黄曲叶病毒(TYLCCNV)及其伴随的卫星betasatellite(TYLCCNB)来源的小RNA(V-sRNA和S-sRNA)的产生情况。rn 对TYLCCNV抑制甲基化和转录水平基因沉默(Transcriptional gene silencing，TGS)开展了研究，亚硫酸氢盐测序表明TYLCCNV基因组DNA在TYLCCNV单独侵染的本氏烟中能够发生甲基化，且甲基化主要集中于病毒启动子区，包括基因间隔区（含有病毒复制起点和双向转录启动子）、AV2区（含有AVl/CP启动子）以及AC2/AC3的启动子区。TYLCCNB与TYLCCNV共同侵染能够降低TYLCCNV全基因组的甲基化水平，使其从5.4%降到1.25%。农杆菌接种实验表明TYLCCNB能够互补甜菜曲顶病毒(BCTV)L2-突变体，阻止次级侵染组织发生回复，使其胞嘧啶甲基化水平降低15%左右。胞嘧啶延伸实验表明TYLCCNB与TYLCCNV共同侵染本氏烟能够使寄主基因组的甲基化水平降低2.5倍左右。与甜菜曲顶病毒(BCTV)不同的是，虽然TYLCCNV也编码了AC2/AL2蛋白，但是TYLCCNV整个病毒并不能有效地抑制TGS，而TYLCCNB与TYLCCNV或者BCTV L2-突变体共同接种却够回复16-TGS本氏烟中转录水平沉默的GFP转基因的表达。pci还能回复16-TGS本氏烟中转录水平沉默的GFP转基因的表达，并且能够激活拟南芥中F-box等内源表观沉默位点的表达，显著降低拟南芥基因组的甲基化水平。酵母双杂交和双分子荧光互补实验表明pci能够在体内与甲基循环中的关键酶S．腺苷高半胍氨酸水解酶(SAHH)互作，体外SAHH活性测定试验表明pci与SAHH互作后能够使SAHH的活性降低80%左右。上述研究及已有的报道表明双生病毒及其伴随的betasatellite编码的蛋白能够通过不同的方式抑制甲基循环的腺苷甲硫氨酸，从而达到抑制甲基化和TGS的效果。

摘要： 番茄黄化曲叶病毒病是为害番茄生产的一种毁灭性病毒病害,自传入我国后,近年来该病在我国由南向北快速扩展.北京市于2009年在番茄主产区大兴区首先发现表现典型黄化曲叶症状的番茄植株,经分子检测为番茄黄化曲叶病毒侵染.随后经调查和实验室检测,在北京市13个郊区县中已经有10个区县发现该病发生,其中部分大棚温室绝收.为了解番茄苗期带毒率以便进行综合防控，首先在前期工作的基础上，通过优化番茄叶片DNA提取方法和烟粉虱传双生病毒PCR检测体系，建立了简洁、快速、高效稳定的番茄苗期带毒检测技术体系。随后在北京市4个区县的番茄育苗温室以及定植1 ^}2d后的温室内采用定点和随机取样方法采集番茄幼苗植株，进行黄化曲叶病毒分子检测，获得了番茄幼苗带毒数据。后续跟踪调查正在进行中。

摘要： 从四川攀枝花市采集表现植株矮化，叶片黄化及曲叶症状的样品SC64、SC65、SC66和SC67用双生病毒通用引物PA和PB进行PCR检测，从4个样品中均扩增出约500bp的特异条带。随后根据此片段测序结果设计引物Y65-F/Y65-R扩增SC65的DNA-A近全长，经克隆及测序拼接后得到SC65的全基因组序列，其大小为2732 nts，将SC65全长基因组DNA与GenBank中的序列进行比对发现，SC65与一个分离自云南元谋的TYLCCNV的菜豆分离物(TYLCCNV-Bean-YM)相似性最高，为96.0%，表明SC65是TYLCCNV的一个分离物。利用TYLCCNV的特异性引物YSF1/Y6R2对病毒分离物SC64、SC66和SC67进行PCR扩增，结果从这3个样本中均扩增到TYLCCNV约1.3kb的特异性条带，表明这些番茄样品均受到TYLCCNV的侵染。利用双生病毒卫星DNA通用引物beta0l/beta02进行PCR扩增，4个样品均得到预期大小为1.3kb的特异性条带。全序列测定表明SC65 DNA的全基因组序列为1338nts。未能从样品中检测到DNA1分子的存在。

摘要： 双生病毒是一类重要的植物病毒,在我国广东、广西、云南和海南等华南地区,已有多种植物受其为害,正在呈现逐年加重趋势。本文概述了近年来在广东发现的广东番茄曲叶病毒、广东番茄黄化曲叶病毒、鳢肠黄脉病毒、广东番木瓜曲叶病毒、朱槿曲叶病毒和软枝黄蝉曲叶病毒等双生病毒的分子特征及其分类归属。

摘要： 为了确定症状差异的遗传决定因子，对TbCSV/DNA-β和TYLCCNV/DNA-β进行了假重组试验，结果表明，脉突和耳突的表型是由TYLCCNV DNA书决定的。为了进一步定位DNA-β上决定症状的遗传决定因子，利用OverlapExtension PCR的方法对两个卫星的βCIORF及其上游约430nt的片段(包含A-rich区和夕βCR基因转录起始位点上游173 nt或200nt的片段，简称为片段AP)分别进行了互换。构建嵌合体卫星的侵染性克隆，分别与辅助病毒TbCSV和TYLCCNV共同接种烟草和番茄。进而通过组织化学法和荧光光度法测定启动子的活性。结果表明，DNA-β编码的βCI蛋白对病害复合体TbCSV/DNA-β和TYLCCNV/DNA-β产生的症状差异起主导作用，但βCI的启动子也能影响症状诱导。

摘要： 双生病毒是世界范围内广泛发生的一类具有孪生颗粒形态的植物单链DNA病毒。自二十世纪90年代以来，双生病毒已在多个国家和地区的作物上造成毁灭性危害。我国于1982年首次证实烟草上存在双生病毒，自上世纪90年代起，已先后在我国烟草、番茄、南瓜、番木瓜、一品红、千里光及多种杂草上发现了30多种双生病毒新种。双生病毒引起的作物病毒病已蔓延成灾，严重危害我国种植业的持续发展。

摘要： 本发明公开了一种抑制烟粉虱携带传播双生病毒的药物、应用及控制双生病毒传播的方法。所述药物包括早期内体运输抑制剂、细胞骨架抑制剂中的一种或组合。本发明经研究发现烟粉虱早期内体运输蛋白、细胞骨架蛋白及他们的编码基因可以作为抑制烟粉虱携带传播双生病毒的靶点，通过抑制剂BrefA或者将早期内体运输蛋白、细胞骨架蛋白的基因进行RNA干扰沉默表达后，能够有效抑制烟粉虱对双生病毒的携带和传播能力，从而可以有效控制双生病毒的田间传播。

摘要： 本发明公开了粉虱CUBN‑AMN复合体中CUBN蛋白、AMN蛋白或他们的编码基因作为靶点在抑制烟粉虱获取、传播双生病毒中的应用。还公开了抑制烟粉虱获取、传播双生病毒的药物，以及一种控制双生病毒传播的方法。本发明通过靶向烟粉虱中肠上皮细胞顶端膜受体复合体CUBN‑AMN，以多种双生病毒‑烟粉虱组合为例，干扰双生病毒进入烟粉虱中肠上皮细胞，一方面降低了烟粉虱获取、传播双生病毒的能力，与现有的方法技术相比，从传播源头上阻碍双生病毒在田间的传播扩散；另一方面，可以结合传统的化学防治方法，多种策略并存，最终保障农业生产的良性发展。

摘要： 本发明公开了一种甘薯块根中甘薯褪绿矮化病毒和甘薯双生病毒的多重PCR检测及预警方法。本发明了针对SPCSV和Sweepoviruses两类病毒，设计特异性引物对CP‑F和CP‑R、引物对VF和VR，检测引物具有很好的特异性，仅能从目标病毒样品中扩增到特异大小的条带。本发明利用多重PCR引物建立的甘薯SPCSV和Sweepoviruses病毒的检测方法，能够通过一次PCR反应，同时检测甘薯块根中是否存在SPCSV和Sweepoviruses两类甘薯病毒，建立了一种根据甘薯种薯是否带毒，进一步判断种薯质量的预警方法。本发明明确了甘薯块根带毒与甘薯苗期、大田期病毒症状及产量损失的关系，为通过检测种薯是否携带病毒，进而判断种薯质量是否合格提供了依据，对于脱毒甘薯种薯质量和病害流行预警具有重要意义。

摘要： 本发明公开了粉虱CUBN‑AMN复合体中CUBN蛋白、AMN蛋白或他们的编码基因作为靶点在抑制烟粉虱获取、传播双生病毒中的应用。还公开了抑制烟粉虱获取、传播双生病毒的药物，以及一种控制双生病毒传播的方法。本发明通过靶向烟粉虱中肠上皮细胞顶端膜受体复合体CUBN‑AMN，以多种双生病毒‑烟粉虱组合为例，干扰双生病毒进入烟粉虱中肠上皮细胞，一方面降低了烟粉虱获取、传播双生病毒的能力，与现有的方法技术相比，从传播源头上阻碍双生病毒在田间的传播扩散；另一方面，可以结合传统的化学防治方法，多种策略并存，最终保障农业生产的良性发展。

摘要： 本发明公开了一种抑制烟粉虱携带传播双生病毒的药物、应用及控制双生病毒传播的方法。所述药物包括早期内体运输抑制剂、细胞骨架抑制剂中的一种或组合。本发明经研究发现烟粉虱早期内体运输蛋白、细胞骨架蛋白及他们的编码基因可以作为抑制烟粉虱携带传播双生病毒的靶点，通过抑制剂BrefA或者将早期内体运输蛋白、细胞骨架蛋白的基因进行RNA干扰沉默表达后，能够有效抑制烟粉虱对双生病毒的携带和传播能力，从而可以有效控制双生病毒的田间传播。

摘要： 本发明提供了一种适用于矮缩病毒科和双生病毒科病毒基因组拼接的转录组测序方法。该方法包括感染DNA病毒样品的转录组测序，病毒序列的比对和拼接，病毒基因组序列空白区域填补等三个步骤。本发明的方法不仅可以获得香蕉束顶病毒的全基因组序列，还可以通过该方法拼接其他矮缩病毒或双生病毒全基因组，从而获得病毒全基因组序列。本发明在国内外首次报道了利用转录组高通量测序拼接DNA病毒基因组的方法，填补了国内外该领域的空白。本发明还可以应用于DNA病毒鉴定和检测。

摘要： 本发明公开了一种甘薯块根中甘薯褪绿矮化病毒和甘薯双生病毒的多重PCR检测及预警方法。本发明了针对SPCSV和Sweepoviruses两类病毒，设计特异性引物对CP‑F和CP‑R、引物对VF和VR，检测引物具有很好的特异性，仅能从目标病毒样品中扩增到特异大小的条带。本发明利用多重PCR引物建立的甘薯SPCSV和Sweepoviruses病毒的检测方法，能够通过一次PCR反应，同时检测甘薯块根中是否存在SPCSV和Sweepoviruses两类甘薯病毒，建立了一种根据甘薯种薯是否带毒，进一步判断种薯质量的预警方法。本发明明确了甘薯块根带毒与甘薯苗期、大田期病毒症状及产量损失的关系，为通过检测种薯是否携带病毒，进而判断种薯质量是否合格提供了依据，对于脱毒甘薯种薯质量和病害流行预警具有重要意义。

摘要： 本发明涉及双生病毒DNA1分子诱导可遗传的烟粉虱基因沉默方法，包括以下步骤：（1）2mDNA1沉默表达载体构建，包括获取烟粉虱基因靶标片段BtbioB的PCR纯化产物，所述纯化产物、载体分别进行双酶切，获得连接产物，获得重组沉默表达载体；提取烟草曲茎病毒TbCSV质粒；（2）获得携带2mDNA1‑bioB沉默表达载体的F0代烟粉虱，采用显微注射法或人工饲喂法任一种接种烟粉虱，获得携带2mDNA1‑bioB沉默表达载体的F0代烟粉虱；（3）田间释放F0代烟粉虱，将2mDNA1介导的烟粉虱基因沉默效果可以遗传给下一代，为烟粉虱基因功能研究和烟粉虱防治提供有效途径。

摘要： 本发明公开了一种利用拟南芥ABI5蛋白过量表达抑制双生病毒侵染的方法，通过过量表达植物转录因子ABI5蛋白，所述ABI5蛋白通过特异性与双生病毒的启动子结合，抑制了双生病毒编码基因的转录，实现提高植物对病毒的抗性。

摘要： 本发明公布了一种桑花叶型矮缩相关双生病毒的LAMP检测引物组及其可视化检测方法，用于桑花叶型矮缩相关双生病毒的特异性检测。该检测引物组是根据桑花叶型矮缩相关双生病毒编码的V2基因序列设计，V2基因序列如Seq ID NO：1所示，包括以下三组引物：FIP、BIP、F3、B3、LF、LB，序列分别为SEQ ID NO：2～7所示。通过DNA提取、LAMP恒温扩增后显色反应或琼脂糖凝胶电泳后可产生阶梯状条带。本发明针对桑花叶型矮缩相关双生病毒建立的可视化检测方法具有扩增快速高效、特异性好、操作简便、不需要特殊仪器等优点，为桑花叶型矮缩相关双生病毒防治提供技术依据。