NLRP3

摘要： Sirtuin 2(SIRT2)inhibition or Sirt2 knocko ut in animal models protects against the development of neurodegenerative diseases and cerebral ischemia.However,the role of SIRT2 in traumatic brain injury(TBI)remains unclear.In this study,we found that knockout of Sirt2 in a mouse model of TBI reduced brain edema,attenuated dis ruption of the blood-brain barrie r,decreased expression of the nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3(NLRP3)inflammasome,reduced the activity of the effector caspase-1,reduced neuroinflammation and neuronal pyroptosis,and improved neurological function.Knoc kout of Sirt2 in a mechanical stretch injury cell model in vitro also decreased expression of the NLRP3 inflammasome and pyroptosis.Our findings suggest that knockout of Sirt2 is neuro protective against TBI;therefore.Sirt2 could be a novel to rget for TBI treatment.

摘要： 背景:1,25(OH)2D3缺乏会加剧骨关节炎.前期研究显示,1,25(OH)2D3调控关节炎滑膜成纤维细胞增殖和凋亡,但是其对滑膜成纤维细胞中炎症小体信号通路的调控作用尚不明确.目的:明确含NOD样受体家族Pyrin域蛋白3(pyrin domain containing protein 3,NLRP3)通路分子在滑膜成纤维细胞中的表达水平,探讨1,25(OH)2D3调控NLRP3信号通路的作用及具体机制.方法:通过对临床收集的关节炎和非关节炎患者滑膜组织进行原代细胞培养,检测NLRP3、Caspase招募域和半胱天冬氨酸蛋白酶1等分子的蛋白及mRNA表达水平,体外1,25(OH)2D3刺激原代细胞24 h后,检测上述指标的蛋白表达水平,并通过染色质免疫共沉淀技术检测NLRP3启动子区域的H3K4me3、H2AK119Ub、H3K27me3等组蛋白修饰水平.利用小干扰技术敲低细胞内维生素D受体的表达水平,体外1,25(OH)2D3刺激原代细胞24 h后,检测NLRP3、半胱天冬氨酸蛋白酶招募域和半胱天冬氨酸蛋白酶1等分子的蛋白表达水平.结果 与结论:①NLRP3信号通路相关分子(NLRP3、半胱天冬氨酸蛋白酶招募域和半胱天冬氨酸蛋白酶1)在关节炎滑膜细胞中过表达,NLRP3在骨关节炎患者滑膜成纤维细胞内转录水平明显较健康人组增高,差异有显著性意义(P<0.05);②与对照组相比,体外1,25(OH)2D3可以明显抑制关节炎患者滑膜细胞中NLRP3转录表达及NLRP3信号通路活化,差异有显著性意义(P<0.05);③敲低维生素D受体可减弱1,25(OH)2D3对NLRP3转录的抑制作用,并减弱其抑制NLRP3信号通路活化的作用,提示1,25(OH)2D3对NLRP3的作用主要依赖于维生素D受体;④1,25(OH)2D3抑制NLRP3转录表达主要是通过提高NLRP3启动子区域H3K27me3和H2AK119Ub水平,抑制H3K4me3水平.

摘要： 背景:核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)炎性因子被证实与多种炎症性疾病相关,调控其表达将成为治疗相关疾病的关键.目的:验证CD1d参与了调控NLRP3炎性因子表达,并且进一步证明CD1d是通过信号调节蛋白α(signal regulatory protein-α,SIRPα)来达到调控目的.方法:①使用Flag-CD1d、HA-SIRPα慢病毒过表达载体转染293T细胞进行免疫共沉淀实验,验证CD1d与SIRPα的相互作用;②使用Flag-CD1d慢病毒过表达载体转染RAW264.7细胞,RT-qPCR检测NLRP3等基因表达;③使用HA-SIRPα慢病毒过表达载体转染RAW264.7细胞,在脂多糖刺激后RT-qPCR、Western blot检测NLRP3等基因和蛋白表达;④使用SIRPα慢病毒RNAi载体转染RAW264.7细胞,在脂多糖刺激后RT-qPCR、Western blot检测NLRP3等基因和蛋白表达.结果 与结论:①免疫共沉淀实验证实CD1d与SIRPα存在相互作用;②过表达CD1d基因后,NLRP3、pro-IL-1β、pro-IL-18基因表达明显低于正常组(P0.05);过表达SIRPα组p38、p-p38、NLRP3、pro-IL-1β、pro-IL-18蛋白表达明显低于SIRPα干扰组(P<0.01);④脂多糖刺激后干扰SIRPα组NLRP3、pro-IL-1β、pro-IL-18基因表达明显高于正常组(P<0.05);干扰SIRPα组p38、p-p38、NLRP3、pro-IL-1β、pro-IL-18蛋白表达明显高于过表达SIRPα组(P<0.01);⑤结果表明,CD1d与细胞膜上SIRPα形成复合物,通过SIRPα抑制下游p38MAPK/NF-κB通路,最终达到抑制NLRP3等炎性因子表达的目的.

摘要： Nod样受体蛋白3(Nod-1 ike receptor protein 3,NLRP3)是肾脏中最具代表性的炎症小体,在肾缺血/再灌注损伤(renal-ischemic reperfusion injury,RIRI)的进程中,NLRP3可通过炎症小体依赖途径和非炎症小体依赖途径介导疾病发生,并且在被多种途径激活后可导致损伤进一步加重;多项研究表明,多种药物或化合物可通过抑制NLRP3激活来减轻RIRI.因此,研究RIRI中NLRP3的致病机制、激活途径以及抑制药物或化合物至关重要,该文将对以上研究的最新进展进行综述.

摘要： 本研究旨在明确NLRP3炎症小体及下游炎症因子在犬乳腺肿瘤中的表达及临床意义。采用RT-qPCR方法检测45例犬乳腺肿瘤组织(15例良性肿瘤和30例恶性肿瘤)以及16例肿瘤旁正常乳腺组织中的NLRP3、Caspase-1、IL^(-1)β和IL^(-1)8 mRNA的表达水平,并分析NLRP3与肿瘤临床病理学特征的关系(肿瘤大小、肿瘤类型、组织恶性分级和预后)。结果显示,与肿瘤旁正常乳腺组相比,NLRP3炎症小体及下游炎症因子mRNA在肿瘤组织中均存在不同程度的表达上调,且恶性肿瘤的NLRP3(P=0.006)和Caspase-1(P=0.048)相对表达量均显著高于良性肿瘤。在恶性肿瘤中,NLRP3炎症小体的转录表达在肿瘤类型(P=0.029)和恶性等级(P=0.049)中存在显著差异。本研究提示,NLRP3炎症小体的表达上调可能导致犬乳腺组织发生肿瘤化和肿瘤恶变,是疾病诊断和恶性特征评估的重要指标之一。

摘要： 目的:探究薯蓣皂苷对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌纤维化的抑制作用及可能的机制。方法:24只健康雄性SD大鼠,随机分为对照组、模型组、薯蓣皂苷低剂量(薯蓣皂苷溶液30 mg/kg·d^(-1))、高剂量组(薯蓣皂苷溶液60 mg/kg·d^(-1)),除对照组外,其余各组采用皮下注射异丙肾上腺素(ISO,5 mg/kg·d^(-1)),对照组予以等剂量生理盐水,连续给药10 d,苏木精—伊红染色(HE)及masson染色检测心肌炎症反应和纤维化水平,免疫印迹法(Western blotting)检测核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1前体(pro-caspase-1)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1 p20(caspase-1 p20)蛋白表达水平,免疫组化法检测心肌组织胶原蛋白Ⅰ(CollagenⅠ)、胶原蛋白Ⅲ(CollagenⅢ)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-18(IL-18)表达水平。结果:与对照组比较,模型组心肌纤维化明显较重,心肌炎症细胞浸润增加,心肌间质CollagenⅠ、CollagenⅢ表达增加,IL-1β、IL-18分泌增加,NLRP3和caspase-1 p20表达升高(P0.05)。结论:薯蓣皂苷可通过抑制NLRP3炎症小体表达而改善异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌纤维化。

摘要： 目的探讨降钙素基因相关肽(Calcitonin gene related peptide,CGRP)和白藜芦醇对脓毒性肾损伤大鼠治疗作用的影响。方法SPF级雄性SD大鼠随机分为四组:对照组(正常饲养未作处理)、LPS组(大鼠腹腔内注射LPS 10 mg/kg)、CGRP+LPS治疗组(注射LPS前1周及后1 d腹腔注射CGRP 1 nmol/kg)、白藜芦醇+LPS治疗组(注射LPS后6 h、12 h分别腹腔注射白藜芦醇15 mg/kg);计算四组大鼠肾脏系数(脏器重量与体重之比);超声检查四组大鼠肾脏形态及肾阻力指数测量;HE染色观察肾组织形态;ELISA方法,检测四组大鼠肾组织及血清中IL-1β表达水平,血肌酐、尿素氮水平;Western blot检测四组大鼠肾脏SIRT1、NLRP3、Caspase-1表达水平;使用Graphpad prism 5.0和SPSS统计软件进行分析处理,重复实验3次。结果与正常对照组相比,LPS组肾脏系数及肾动脉阻力指数增高,肌酐和尿素氮明显升高(P<0.05);与LPS组相比,CGRP+LPS治疗组、白藜芦醇+LPS治疗组肾脏系数及肾动脉阻力指数减低,肌酐和尿素氮明显降低(均P<0.05)。与正常对照组相比,LPS组肾小球上皮细胞肿胀、间质水肿,肾小管水肿;与LPS组相比,CGRP+LPS治疗组、白藜芦醇+LPS治疗组显著减轻肾小球和肾小管损伤。与正常对照组相比,LPS组SIRT1表达明显降低、NLRP3表达明显升高(P<0.05);与LPS组相比,CGRP+LPS治疗组、白藜芦醇+LPS治疗组SIRT1表达明显升高,NLRP3表达明显降低(均P<0.05)。与正常对照组相比,LPS组Caspase-1表达明显升高(P<0.05);与LPS组相比,CGRP+LPS治疗组、白藜芦醇+LPS治疗组Caspase-1表达明显降低(均P<0.05)。结论通过LPS构建的脓毒性肾损伤大鼠模型能够较好的模拟人肾损伤的体内环境;CGRP和白藜芦醇可能治疗脓毒性肾损伤;CGRP和白藜芦醇对脓毒性肾损伤的治疗作用可能通过SIRT1/NLRP3途径,即增加SIRT1、降低NLRP3的表达从而抑制炎性因子,达到减轻炎性损伤的作用。

摘要： 为探究金针菇多糖(FVP)和发酵金针菇多糖(FFVP)对小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7)炎症反应的影响与机制,以脂多糖(LPS)构建RAW264.7炎症模型,设置CON组(正常培养基)、LPS组(正常培养基+1μg/mL LPS)、FVP组(正常培养基+1μg/mL LPS+25、50或100μg/mL FVP)和FFVP组(正常培养基+1μg/mL LPS+25、50或100μg/mL FFVP),通过测定RAW264.7的细胞活力、吞噬能力、活性氧(ROS)和一氧化氮(NO)含量以及炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-18(IL-18)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量与mRNA相对表达量,比较FVP和FFVP抑制巨噬细胞炎症反应的作用;以核转录因子-κB(NF-κB)抑制剂BAY11-7082处理RAW264.7,通过Western blot检测磷酸化核转录因子-κB抑制蛋白α(p-IκBα)、NOD样受体家族含pyrin结构域蛋白3(NLRP3)、半胱天冬蛋白酶-1(Caspase-1)和IL-1β的蛋白相对表达量,探究FVP和FFVP对LPS诱导的巨噬细胞炎症反应可能的作用机制。结果表明:FVP和FFVP均能抑制LPS引起的RAW264.7 ROS和NO含量升高,浓度为100μg/mL时,两者差异显著(P<0.05);相比LPS组,FVP和FFVP分别使RAW264.7的吞噬能力提升37.65%和47.06%;FVP和FFVP降低炎症因子IL-1β、IL-6、IL-18和TNF-α的含量及mRNA相对表达量,并呈剂量依赖性。Western blot结果表明以BAY11-7082与FVP或FFVP同时处理,RAW264.7的p-IκBα、NLRP3、Caspase-1和IL-1β的蛋白相对表达量显著降低(P<0.05),说明FVP/FFVP可通过降低IκBα的磷酸化抑制NLRP3信号通路的激活。综上可知,FVP和FFVP均能增强RAW264.7的细胞活力和吞噬能力,降低ROS和NO含量,通过抑制NF-κB-NLRP3信号通路的激活抑制巨噬细胞炎症反应;相同浓度下,FFVP的抗炎效果优于FVP。

摘要： 目的:探讨LRRK2在乳腺癌组织中的表达及其对乳腺癌细胞增殖、凋亡及耐药的作用和分子机制。方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测了48例乳腺癌组织及其配对正常组织中LRRK2表达;并检测人正常乳腺上皮细胞MCF-10A、乳腺癌细胞株MCF-7、MDA-MB-231、BT-483及阿霉素耐药细胞株MCF-7/ADR中LRRK2 mRNA与蛋白表达水平。通过转染si-LRRK2序列干扰LRRK2表达,采用CCK-8实验和流式细胞仪分别检测敲降LRRK2对MCF-7、MCF-7/ADR细胞增殖活力、耐药IC_(50)值及细胞凋亡的影响;采用Wstern blot检测细胞凋亡相关蛋白、耐药蛋白及TLR4/NF-κB信号通路相关蛋白表达。结果:乳腺癌组织和细胞中LRRK2表达显著高于癌旁正常组织和正常乳腺上皮细胞(P<0.01)。与空白对照control组和阴性对照siRNA组相比,si-LRRK2组MCF-7、MCF-7/ADR细胞增殖活力显著抑制,细胞凋亡率及凋亡相关蛋白caspase-3、Bax表达显著升高、Bcl-2表达显著降低(P<0.01);si-LRRK2组MCF-7/ADR细胞IC_(50)值及耐药蛋白P-gp表达明显降低(P<0.01),MCF-7/ADR细胞化疗敏感性显著提高。si-LRRK2组TLR4/NF-κB通路相关蛋白TLR4、NF-κB p65及p-IKKβ、p-IκB磷酸化水平明显降低(P<0.01),炎症小体NLRP3表达也显著降低(P<0.01)。si-LRRK2组细胞共转染pcDNA3.1-TLR4或pcDNA3.1-NLRP3后,敲降LRRK2对MCF-7/ADR细胞增殖、耐药的抑制作用及促凋亡作用被显著逆转(P<0.05)。结论:LRRK2在乳腺癌组织及细胞中显著高表达,敲降LRRK2能够抑制乳腺癌细胞增殖,诱导细胞凋亡,提高耐药细胞化疗敏感性;LRRK2可能通过调控TLR4/NF-κB信号通路、调节NLRP3炎症小体,进而调控P-gp表达,激活NLRP3介导的炎症途径,参与乳腺癌细胞的生物学行为,延缓细胞耐药。

摘要： 背景大量实验证明丹酚酸B(salvianolic acid B,Sal B)对非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)有治疗作用,细胞焦亡在NAFLD发病及其向非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)进展的过程中起了重要作用,通过研究Sal B对NASH细胞焦亡主要相关蛋白的调节,发觉Sal B在NAFLD中多途径、多靶点的治疗作用及优势.目的建立NASH体外细胞模型,并用Sal B及焦亡抑制剂(VX-765)干预,探讨Sal B对细胞焦亡的影响及对焦亡通路GSDMD/NLRP3/Caspase-1的调节机制.方法取对数生长期HepG2细胞,MTT法检测筛选棕榈酸(palmitic acid,PA)最佳的药物干预浓度及干预时间;将细胞随机分为对照组、模型组(PA),治疗组(Sal B+PA)及抑制剂组(VX-765+PA).取各组细胞分别经油红O染色在光学显微镜观察细胞内脂质蓄积情况,收集细胞上清液酶标仪下测定光密度(optical density,OD)值;免疫荧光H2DCFH探针测定细胞内活性氧含量;酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assays,ELISA)检测各组细胞上清液白细胞介素-18(interleukin 18,IL-18)、白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)表达量;Western Blot检测炎性小体核苷酸寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)及焦亡相关蛋白半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、消皮素(gasdermin D,GSDMD)、GSDMD的N端结构域(GSDMD-N)的表达,并检测各种蛋白的相对表达量变化.结果模型组细胞内脂质小体及活性氧(reactive oxygen species,ROS)蓄积明显,IL-1β、IL-18等促炎因子分泌增多(P值<0.05),炎症小体NLRP3、焦亡相关蛋白Caspase-1、GSDMD、GSDMD-N表达均升高(P值均<0.05).使用Sal B干预治疗或VX-765抑制剂处理后可逆转PA造成的脂质及ROS蓄积,IL-1β及IL-18炎症因子的分泌,同时可下调NLRP3、Caspase-1、GSDMD、GSDMD-N等焦亡相关蛋白表达(P值均<0.05).结论PA可诱导肝脏细胞焦亡发生,丹酚酸B通过对焦亡通路NLRP3/Caspase-1/GSDMD的抑制作用减轻炎症反应,缓解NASH进展.

摘要： 提供了使用双醋瑞因或其类似物来抑制ASC的表达、NLRP3的表达和/或NLRP3炎性复合体的形成的方法。还提供了使用双醋瑞因或其类似物来治疗和/或预防由ASC和/或NLRP3、和/或由NLRP3炎性复合体的形成介导的病症的方法和组合物。

摘要： 本发明公开了NLRP3相关自身炎症性疾病相关基因NLRP3的突变形式的应用。本发明提供了一种突变蛋白，是将人NLRP3蛋白的第829位氨基酸残基由赖氨酸突变为苏氨酸得到的蛋白质。本发明还提供了一种突变基因，是将NLRP3基因进行突变得到的基因；所述NLRP3基因为人基因组中编码NLRP3蛋白的基因；所述突变为将编码NLRP3蛋白的第829位氨基酸残基的密码子由编码赖氨酸的密码子突变为编码苏氨酸的密码子。所述突变蛋白或所述突变基因可以作为靶标物开发用于诊断NLRP3相关自身炎症性疾病的试剂或试剂盒，也可以作为靶标物开发用于治疗NLRP3相关自身炎症性疾病的试剂或试剂盒。本发明为自身炎症性疾病临床诊断和治疗提供了新的方向。

摘要： 提供了使用双醋瑞因或其类似物来抑制ASC的表达、NLRP3的表达和/或NLRP3炎性复合体的形成的方法。还提供了使用双醋瑞因或其类似物来治疗和/或预防由ASC和/或NLRP3、和/或由NLRP3炎性复合体的形成介导的病症的方法和组合物。

摘要： 本发明涉及用作NLRP3炎症小体产生抑制剂的新型化合物，其中这样的化合物如通过具有式(I)的化合物所定义，并且其中完整体R1、R2和R3在本说明书中被定义，并且其中这些化合物可以用作药剂，例如用于治疗与NLRP3炎症小体活性相关的疾病或障碍。

摘要： 本发明涉及用作NLRP3炎症小体产生抑制剂的新型化合物，其中这样的化合物如通过具有式(I)的化合物所定义，并且其中完整体R1、R2和R3在本说明书中被定义，并且其中这些化合物可以用作药剂，例如用于治疗与NLRP3炎症小体活性相关的疾病或障碍。

摘要： 本发明涉及用作NLRP3炎症小体产生抑制剂的新型化合物，其中这样的化合物如通过具有式(I)的化合物所定义，并且其中完整体R1、R2和R3在本说明书中被定义，并且其中这些化合物可以用作药剂，例如用于治疗与NLRP3炎症小体活性相关的疾病或障碍。

摘要： 本发明属于医药领域，涉及羧胺三唑类化合物或其盐在制备治疗NLRP3炎症小体活化相关疾病的药物中的应用，并且涉及羧胺三唑类化合物或其盐在制备NLRP3炎症小体抑制剂中的应用。

摘要： 本发明提供一种基于NLRP3基因敲除的非酒精性脂肪肝动物模型的构建方法及应用。本发明的动物模型构建方法，以NLRP3基因敲除动物(NLRP3‑/‑)为模型动物，通过高脂高果糖饮食构建非酒精性脂肪肝模型，检测NLRP3及相关因子的表达水平，对各指标与非酒精性脂肪肝的相关性进行分析，阐述NLRP3在非酒精性脂肪肝的发病机制中的作用。此模型为进一步开展脂肪肝的药效观察和相关分子机制研究奠定了研究基础。

摘要： 本发明涉及取代的5元含氮杂芳基化合物，诸如三唑酯，其中所述杂芳基环通过诸如‑NH‑的连接基团被环状基团进一步取代，所述环状基团继而为α位取代的。本发明进一步涉及相关盐、溶剂化物、前药和药物组合物，并且涉及此类化合物在治疗和预防医学病症和疾病中的用途，最尤其是在通过NLRP3抑制来治疗和预防医学病症和疾病中的用途。

摘要： 本发明属于生物医药技术领域，具体涉及没食子酸甲酯（MG）在制备高尿酸血症肾病和/或痛风性关节炎的NLRP3通路抑制剂中的应用。没食子酸甲酯能特异性抑制BMDMs、PBMCs中NLRP3炎症小体的激活，而对NLRC4或AIM2炎症小体的激活没有影响；并且没食子酸甲酯是NLRP3炎症小体激活的广泛的抑制剂：能抑制LPS/MSU、明矾、ATP和尼日利亚菌素等激动剂刺激的NLRP3炎症小体的激活。此外，没食子酸甲酯广泛分布于各食用植物中，来源广泛。因此，以没食子酸甲酯作为有效成分有望开发为治疗高尿酸血症肾病和/或痛风性关节炎疾病的NLRP3通路抑制剂。