肌细胞,心脏

摘要： 目的探究TAX1结合蛋白1(TAX1BP1)对苯肾上腺素(PE)诱导的原代新生大鼠心肌细胞(NRCM)凋亡的影响。方法将培养的NRCM分为正常组、模型组(PE 50μmol/L)、阴性组、转染组(转染TAX1BP1过表达腺病毒)、对照组、刺激组(转染TAX1BP1过表达腺病毒后,用PE 50μmol/L)。采用α肌动蛋白免疫荧光染色观察NRCM面积,TUNEL染色检测NRCM凋亡程度,免疫印迹法检测TAX1BP1及促凋亡因子Bax和抗凋亡因子Bcl-2蛋白表达。结果模型组NRCM中TAX1BP1表达较正常组明显升高(0.97±0.16 vs 0.69±0.06,P<0.05)。与阴性组相比,转染组NRCM中的TAX1BP1表达上调(0.98±0.08 vs 0.65±0.07,P<0.05);与转染组相比,刺激组NRCM中的TAX1BP1表达上调(1.24±0.06 vs 0.98±0.08,P<0.05)。与阴性组比较,对照组NRCM面积增大、NRCM凋亡数量增加、Bax蛋白表达增加,Bcl-2蛋白表达减少(P<0.05);与对照组比较,刺激组NRCM面积增大、NRCM凋亡数量增加,Bax蛋白表达上调,Bcl-2蛋白表达下调(P<0.05)。结论TAX1BP1可促进PE诱导的心肌细胞肥大,通过增加Bax表达以及抑制Bcl-2来加重PE诱导的心肌细胞凋亡。

摘要： 目的探究高敏C反应蛋白(hs-CRP)和N末端B型钠尿肽前体(NT-proBNP)在老年原发性高血压进展慢性心力衰竭(心衰)不同阶段中的作用。方法选取老年原发性高血压患者206例,按照心衰发展过程分为前心衰阶段(A阶段)组44例,前临床心衰阶段(B阶段)组58例、临床心衰阶段(C阶段)组68例、难治性心衰阶段(D阶段)组36例,检测各组hs-CRP和NT-proBNP水平。结果各组年龄、高血压病程、LVEF、NT-proBNP和hs-CRP水平比较,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。治疗1周后,C阶段组NT-proBNP降幅明显高于D阶段组[(1207.5±684.9)ng/L vs(576.3±346.7)ng/L,P=0.000],而hs-CRP水平、NT-proBNP下降<30%和hs-CRP下降<30%比例明显低于D阶段组,有统计学差异[(3.5±2.2)mg/L vs(7.0±4.9)mg/L,P=0.000;25.0%vs 44.4%,P=0.043;20.6%vs 47.2%,P=0.005]。随访2年,心衰患者死亡19例,心衰死亡患者hs-CRP下降<30%以及NT-proBNP下降<30%比例明显高于生存患者(P<0.05,P<0.01)。结论治疗后NT-proBNP以及hs-CRP降幅少于30%是老年原发性高血压心衰患者预后不良的表现。

摘要： 目的研究蟾毒灵对低氧/复氧(H/R)心肌细胞损伤的影响,并初步探究其作用机制。方法体外建立H/R心肌细胞模型,并采用不同浓度(0.1、1.0、10.0μmol/L)的蟾毒灵处理。采用CCK-8法测定细胞活力,酶标法检测超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量,流式细胞术检测心肌细胞凋亡率和活性氧(ROS)水平,Western blot检测剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3和9(Cleaved Caspase-3,Cleaved Caspase-9)蛋白水平。结果与空白对照组比较,H/R组心肌细胞活力、SOD含量明显降低,ROS水平、MDA含量、细胞凋亡率、Cleaved Caspase-3和Cleaved Caspase-9蛋白表达升高(F=129.978~330.050,P<0.05)。蟾毒灵可明显改善H/R引起的上述指标变化。结论蟾毒灵能够改善H/R引起的心肌细胞损伤,其作用机制可能与抑制氧化应激和细胞凋亡有关。

摘要： 目的 利用缺氧缺糖(OGD)诱导心肌细胞损伤的模型,探讨miRNA-124-3p抑制剂对Wnt/β-catenin信号通路及心肌细胞凋亡的影响.方法 利用低氧培养箱与低糖DMEM培养基建立OGD细胞模型,细胞分为正常对照组、OGD组、NC-siRNA组、miRNA-124-3p抑制剂组和Wnt1 siRNA组,利用Western blot检测miRNA-124-3p抑制剂与Wnt1 siRNA对模型细胞中Wnt1及β-catenin表达的影响;利用CCK-8实验检测miRNA-124-3p抑制剂与Wnt1 siRNA对心肌细胞活性的影响;利用Western blot检测miRNA-124-3p抑制剂与Wnt1 siRNA对凋亡相关的蛋白p53、Bcl-2、Bax及裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3)的影响.利用ELISA检测各组细胞悬液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6与IL-1β的水平.结果 miRNA-124-3p抑制剂组和Wnt1 siRNA组心肌细胞Wnt1及β-catenin表达水平降低.CCK-8检测结果显示,与OGD组比较,miRNA-124-3p抑制剂组和Wnt1 siRNA组心肌细胞活性增高,而二者比较,差异无统计学意义(P>0.05).Western blot结果显示,与OGD组比较,miRNA-124-3p抑制剂组和Wnt1 siRNA组p53、Bcl-2表达水平升高,Bax及cleaved-caspase-3蛋白表达水平降低,而二者比较,差异无统计学意义(P>0.05).ELISA结果显示,miRNA-124-3p抑制剂组和Wnt1 siRNA组TNF-α、IL-6与IL-1β水平降低,而二者比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 miRNA-124-3p抑制剂通过调节Wnt1及β-catenin表达来调控Wnt/β-catenin信号通路,进而调控OGD条件下诱导的心肌细胞的凋亡,减轻细胞损伤,降低炎性因子的释放,发挥心肌保护作用.

摘要： 目的 研究丙戊酸钠(VPA)对致死性烫伤大鼠心肌细胞凋亡的影响.方法 48只雄性SD大鼠分为3组,假烫组:采用37°C水浴,浸泡后腹腔内注射0.25 mL生理盐水,烫伤组:100°C水浴中背部浸泡15 s、腹部浸泡8 s,烫伤后腹腔内注射0.25 mL生理盐水;VPA组:烫伤后腹腔注射VPA治疗(300 mg/kg,溶于0.25 mL生理盐水).分别于伤后3、6 h两个时间点取腹主动脉血,测定血浆肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平;然后处死动物取心肌组织,TUNEL方法 检测心肌细胞凋亡率,Western blot测定心肌组织内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达,NO检测试剂盒测定心肌内NO水平、caspase-3活性试剂盒测定心肌内caspase-3活性.结果 与假烫组比较,烫伤组伤后3 h和伤后6 h组CK-MB水平、心肌细胞凋亡率明显上升,caspase-3活性明显增加,iNOS表达水平、NO水平明显增高(均P<0.05);VPA组CK-MB水平、心肌细胞凋亡率与烫伤组比较明显下降,caspase-3活性明显降低,iNOS表达水平、NO水平明显减少,差异有统计学意义(均P<0.05).结论 在致死性烫伤大鼠治疗中,VPA能降低CK-MB水平,减少心肌细胞凋亡,保护心脏功能,可能与降低心肌组织内caspase-3活性、iNOS表达水平、NO水平有关.

摘要： 近十年来的研究表明,细胞内Ca2+流通改变可能在房颤的发生与维持过程中发挥着重要作用.本文在综述心房电生理和Ca2+处理的基础上,讨论Ca2+依赖性后去极化和心房复极的交替发生在触发房颤中的作用,以期对未来房颤相关研究有一定启示.

摘要： 心肌细胞自噬对维持正常心脏结构和功能起重要作用.近年来的研究结果 表明老年人心肌细胞自噬功能降低,老年人心肌自噬基因Atg5、Atg7和Beclinl表达降低;心肌细胞自噬下调与磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸-苏氨酸激酶/雷帕霉素靶蛋白和单磷酸腺苷激活的蛋白激酶及SIRT1信号通路失调有关;此外,活性氧及一些神经内分泌因子也可介导老年人心肌细胞自噬下调.调控心肌细胞自噬将为老年人心肌病的预防和治疗提供新的途径.

摘要： 目的 观察猪大网膜来源的细胞外基质(ECM)水凝胶与人源诱导多能干细胞分化的心肌细胞(hiPSC-CM)的生物相容性及其作为细胞移植递送载体的可行性.方法 通过化学、物理和酶解的系列方法对猪大网膜组织进行脱细胞处理,然后将提取的ECM制备成可注射性温敏水凝胶,通过组织学染色鉴定其生化成分,用扫描电镜观察其显微表观结构,并向小鼠心肌内注射水凝胶观察其原位凝胶形成能力.采用小分子诱导法将人源诱导性多能干细胞定向分化成心肌细胞,随后将获得的hiPSC-CM分组培养,接种在水凝胶上共培养的为凝胶组,常规培养的为对照组,通过活/死细胞染色、CCK-8和鬼笔环肽染色检测心肌细胞存活状况和生长形态,采用心肌细胞标志物免疫荧光染色及Western blot法分析心肌细胞生存数量和表型维持情况.结果 苏木素-伊红染色、油红O染色和DAPI荧光染色结果显示制备的大网膜ECM水凝胶中无明显的细胞碎片、细胞核和脂质残留,天狼猩红和阿利新蓝染色显示该水凝胶保留了ECM的主要成分胶原蛋白和糖胺聚糖.所制备的水凝胶在4°C条件下表现为黏性液体,在37°C条件下呈凝胶态.扫描电镜结果显示该水凝胶的微观结构由不规则的纤维和大小不一的孔隙组成.在超声引导下可顺利将制备的ECM水凝胶注射到小鼠心肌内,注射后即刻超声下可见高回声信号,提示水凝胶在心肌内滞留,并通过后续的心肌组织苏木素-伊红染色发现注射区有团状凝胶的存在.活/死细胞染色结果显示凝胶组和对照组的hiPSC-CM均大多数存活,很少有死细胞,CCK-8实验结果显示两组吸光度值差异无统计学意义(P＞0.05).鬼笔环肽染色结果显示hiPSC-CM可以在与ECM水凝胶共培养时正常伸展,凝胶组与对照组细胞形态相似,且两组的每细胞F-肌动蛋白覆盖面积差异无统计学意义(P＞0.05).心肌细胞标志物免疫荧光染色结果显示,凝胶组与对照组每视野α-心肌肌动蛋白(α-actinin)和连接蛋白-43(Cx-43)的覆盖面积差异均无统计学意义(P均＞0.05),DAPI染色的定量结果显示,两组细胞数量差异无统计学意义(P＞0.05),同时Western blot结果显示凝胶组细胞的α-actinin和Cx-43蛋白表达水平与对照组比较差异均无统计学意义(P均＞0.05).结论 该研究成功制备了猪大网膜来源的ECM水凝胶,其与hiPSC-CM的生物相容性良好,无明显细胞毒性,能够支持hiPSC-CM的体外生存并维持其表型,是一种具有潜在应用前景的可注射性心脏组织工程材料.

摘要： 目的 探究高敏C反应蛋白(hs-CRP)和N末端B型钠尿肽前体(NT-proBNP)在老年原发性高血压进展慢性心力衰竭(心衰)不同阶段中的作用.方法 选取老年原发性高血压患者206例,按照心衰发展过程分为前心衰阶段(A阶段)组44例,前临床心衰阶段(B阶段)组58例、临床心衰阶段(C阶段)组68例、难治性心衰阶段(D阶段)组36例,检测各组hs-CRP和NT-proBNP水平.结果 各组年龄、高血压病程、LVEF、NT-proBNP和hs-CRP水平比较,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).治疗1周后,C阶段组NT-proBNP降幅明显高于D阶段组[(1207.5±684.9)ng/L vs(576.3±346.7)ng/L,P = 0.000],而hs-CRP 水平、NT-proBNP 下降＜30％和hs-CRP下降＜30％比例明显低于D阶段组,有统计学差异[(3.5±2.2)mg/Lvs(7.0±4.9)mg/L,P=0.000;25.0％vs 44.4％,P = 0.043;20.6％vs 47.2％,P = 0.005].随访2年,心衰患者死亡19例,心衰死亡患者hs-CRP下降＜30％以及NT-proBNP下降＜30％比例明显高于生存患者(P＜0.05,P＜0.01).结论 治疗后NT-proBNP以及hs-CRP降幅少于30％是老年原发性高血压心衰患者预后不良的表现.

摘要： 目的 评价二甲双胍对心肌细胞缺氧复氧(H/R)损伤的作用,及Nod样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体在其中的作用机制.方法 选取原代心肌细胞随机分为对照组、H/R组、二甲双胍组、激动剂组(n=6).对照组不作H/R处理,其他3组建立心肌细胞H/R模型.二甲双胍组和激动剂组在细胞H/R模型构建后分别加入二甲双胍(终浓度为100 μmol/L)、二甲双胍联合NLRP3激动剂培养.检测各组心肌细胞活性、细胞凋亡率及乳酸脱氢酶(LDH)水平,用Western blot测定腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、磷酸化AMPK(p-AMPK)、NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸酶1(Caspase-1)、白细胞介素(1L)-1β和IL-18表达水平.结果 与对照组比较,其他3组心肌细胞存活率明显降低,LDH水平、细胞凋亡率明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).与H/R组比较,二甲双胍组细胞存活率、心肌细胞内p-AMPK/AMPK表达明显升高,LDH水平、细胞凋亡率、NLRP3、Caspase-1和IL-1β表达明显降低(P＜0.05).激动剂组心肌细胞内NLRP3、Caspase-1和IL-1β表达明显高于二甲双胍组(3.5±1.1vs1.5±0.5,2.5±0.5 vs 1.5±0.2,2.5±0.5 vs 1.5±0.2,P＜0.05).结论 AMPK激活剂能通过抑制心肌细胞内NLRP3炎性小体活化.减轻大鼠心肌细胞的H/R损伤.

摘要： 本发明公开了一种属于从棕色脂肪分离心脏干细胞及其成心肌分化的方法。该方法包括：(1)消化液的制备：将胶原酶、dispaseII与胰酶以质量比1∶1∶0.5-1的比例溶于无血清的培养基中；(2)使用加有玻璃珠和转子的消化瓶消化棕色脂肪组织，然后离心收集细胞；(3)原代心脏干细胞的培养与成心肌细胞分化。本发明采用组合的消化酶液及其特殊的消化方法进行细胞分离，与现有的分离方法相比，该分离方法显著的提高了细胞的产率，同时心脏干细胞的含量也明显提高，可通过CD133的表达率与成心肌的能力得以验证，因此心脏干细胞的产率也显著提高。本方法获得的心脏干细胞产率高、操作简单、可实施性强，减少了人为操作。

摘要： 提供了诱导心肌细胞增殖用于治疗心脏病的聚集蛋白肽。

摘要： 本发明提供由成纤维细胞诱导心脏祖细胞或心肌细胞的方法。本发明提供：包括向成纤维细胞中导入1个心肌重编程因子的、心脏祖细胞的制作方法：或、包括向成纤维细胞中导入3个心肌重编程因子的、心肌细胞的制作方法。

摘要： 本发明提供由多能干细胞诱导心脏祖细胞或心肌细胞的方法。本发明提供由多能干细胞制造心脏祖细胞的方法，其包括使多能干细胞表达Tbx6。进而，本发明提供由多能干细胞制造心肌细胞的方法，其包括如下工序：包括使多能干细胞表达Tbx6的、由多能干细胞诱导心脏祖细胞的工序；及、包括抑制Tbx6基因表达的、由在前述工序中诱导的心脏祖细胞诱导心肌细胞的工序。

摘要： 本发明提供了一种克隆心肌细胞的方法，包括步骤：(a)在体外提供胚胎干细胞(ES细胞)；(b)用携带遗传标记基因载体转染ES细胞，其中所述的载体包含心肌特异性启动子和抗性标记基因，从而筛选出带有抗性选择基因的ES细胞，获得带有遗传标记的ES细胞；(c)将步骤(b)中选出的ES细胞经体外定向诱导分化成心肌细胞。本发明还提供了有关的转基因载体。本发明方法可高效专一地获得定向分化的心肌细胞。

摘要： 本发明公开了一种诱导心脏干细胞定向分化为心肌细胞的方法，在心脏干细胞诱导培养液中添加定向分化诱导因子，使定向分化诱导因子作用于培养的心脏干细胞，诱导其定向分化为心肌细胞；所述定向分化诱导因子为一种序列如SEQ ID NO.1所示的外源性多肽。本发明提供的方法通过在心脏干细胞诱导培养液中添加如SEQIDNO.1所示的定向分化诱导因子，使定向分化诱导因子作用于培养的心脏干细胞，可以有效诱导其定向分化为心肌细胞。实验结果显示分化的细胞表达肌钙蛋白T/肌钙蛋白I、β‑肌球蛋白重链(β‑MHC)等心肌细胞特异性蛋白。序列如SEQ ID NO.2‑4的辅助因子A、B、C对定向分化诱导因子的诱导能力具有明显的强化作用。

摘要： 本发明提供一种改善心脏心肌细胞功能及增强其供血供氧的组方及制备工艺，涉及医药保健技术领域。该一种改善心脏心肌细胞功能及增强其供血供氧的组方，包括维生素E、环磷酸腺、单硝酸异山梨酯、硝酸甘油、D‑核糖、心肌肽粉、牦牛骨髓肽粉、复合氨基酸、牛磺酸、柠檬酸。通过本发明制备的组方可以扩张血管，增强心肌收缩力，加快新陈代谢，改善心肌营养，对于保养心脏非常的有帮助，同时可以改善心室舒张功能以及增强其供血供氧能力，提高了该组方的实用性，本发明在对组方进行制备的过程中，将残留的药渣进行收集处理，达到药液与药片同时使用的效果，可以减少资源的浪费，同时该制备工艺较为简单，经济效益较高。

摘要： 提供了具有心肌细胞增殖活性的新型杂环衍生物用于治疗心脏病的用途。具体地，公开了式(I)化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、立体异构体或前药；以及它们的应用。式中各基团的定义可在说明书中找到详细说明。

摘要： 本发明涉及生命科学和生物医药领域，公开了一种可促进受损心脏的心肌细胞增殖的小分子RNA序列，含有如SEQ ID No.1所示序列。这种小分子RNA具有能够促进受损心脏心肌细胞的增殖，可用于制备促进心肌细胞增殖的药物、治疗或辅助治疗心脏病的药物，尤其是用于治疗或辅助治疗心肌梗死的药物，具有较好的应用前景。

摘要： 提供了用于治疗心脏病的具有心肌细胞增殖活性的新型杂环衍生物。具体地，提供了式(I)化合物或药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂合物或前药、其制备方法、其应用和用于治疗心脏疾病的药物组合物。