氧化还原酶

摘要： [目的]研究鸡血藤总黄酮对环磷酰胺所致小鼠肝损伤的保护作用。[方法]将60只昆明系小鼠随机分为6组,每组10只,试验周期为7 d。对照组小鼠试验全程给予生理盐水。环磷酰胺(CTX)组小鼠1~4 d灌胃给予生理盐水;5~7 d腹腔注射80 mg/(kg·BW)CTX,每天给药1次。鸡血藤总黄酮(TFSD)100组、CTX+TFSD25组、CTX+TFSD50组、CTX+TFSD100组小鼠1~7 d分别灌胃给予100、25、50、100 mg/(kg·BW)TFSD,每天给药1次;试验5~7 d除TFSD100组小鼠腹腔注射生理盐水外,其余试验组腹腔注射80 mg/(kg·BW)CTX,每天给药1次。试验结束后对各组小鼠进行眼球采血及剖检;检测肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、髓过氧化物酶(MPO)、黄嘌呤氧化酶(XOD)以及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力,测定血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)和碱性磷酸酶(ALP)活力,检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)和白介素-1β(IL-1β)含量。[结果]环磷酰胺可显著(P<0.05)降低小鼠肝脏中SOD、GSH-Px以及血清中ALT活力,显著(P<0.05)升高肝脏中XOD与MPO活力、血清中ALP活力以及炎症细胞因子IL-1β和IL-6释放水平。25、50、100 mg/(kg·BW)的TFSD处理均可显著(P<0.05)抑制由CTX引起的SOD活力降低,25 mg/(kg·BW)的TFSD处理可显著(P<0.05)提高CTX处理小鼠的GSH-Px活力;50 mg/(kg·BW)的TFSD处理可显著(P<0.05)抑制由CTX引起的XOD和MPO活力升高,且可显著(P<0.05)降低CTX处理小鼠血清中的AST活力;25、50、100 mg/(kg·BW)的TFSD处理可显著(P<0.05)抑制由CTX引起的血清中ALP活力升高,同时降低ALT活力。25、50、100 mg/(kg·BW)的TFSD处理均可显著(P<0.05)抑制由CTX引起的IL-1β水平升高。[结论]鸡血藤总黄酮可通过调节小鼠炎症因子释放以及肝组织中氧化还原酶水平对环磷酰胺所致肝损伤提供保护,推荐剂量为25 mg/(kg·BW)。

摘要： 酶促生物电催化是一种绿色高效的催化技术,充分结合了生物酶催化和电催化的优点,可实现化学能和电能的相互转换,目前已在生物发电、电能存储、CO_(2)固定、传感与监测等方面受到广泛关注。本综述分析了酶促生物电催化的发展现状与当前面临的挑战,从合成生物学的角度详细介绍了氧化还原酶的结构功能和酶促生物电催化系统的基本要素,探讨了酶的改造,包括定向进化、理性设计和引入非天然组件等,以及通过构建多酶复合体模块和强化生物-非生物界面电子传递等方法以提高系统性能。围绕电子传递和能量转化效率等问题,阐述了酶的定向固定方法、电子传递机制以及电极材料设计原则。此外,总结了酶促生物电催化技术在酶燃料电池、生物传感器、化学品酶电合成等合成生物学相关领域的前沿应用。最后,本文展望了未来前景,并提出了从设计改造电活性生物元件、拓宽反应电势、放大反应系统等方面进一步提升酶促生物电催化系统的性能和可应用性。

摘要： 为探究生物质炭对Cd污染土壤团聚体酶活性的影响,采用盆栽试验,向模拟Cd污染土壤中添加生物质炭并测定水稻根际土壤团聚体碳循环酶与氧化还原酶活性.结果表明:Cd污染土壤团聚体酶活性对添加量为2.5％的生物质炭响应明显,氧化还原酶活性指数值介于0.522～0.792之间.在2.5mg/kg的外源Cd条件下,2.5％的生物质炭比未添加生物质炭处理显著提高蛋白酶与过氧化氢酶活性至121％与653％.在Cd污染土壤中添加生物质炭,碳循环酶与氧化还原酶及综合酶活性均在0.5～1mm中等粒径土壤团聚体中产生富集效应,其酶活性随土壤团聚体粒径的增大呈先升后降最终趋于稳定的趋势.研究显示,在2.5mg/kg的外源Cd条件下,添加2.5％的生物质炭对水稻根际土壤团聚体酶活性影响显著,土壤酶活性受酶种类、生物质炭量与团聚体粒径的综合影响;在Cd污染土壤中添加生物质炭后,土壤酶活性随团聚体粒径的增大呈"∧"形变动规律.

摘要： 氧化还原酶可催化许多关键反应,在生物制造中具有重要应用价值.本文关注新型材料在氧化还原酶固定化中的应用和研究进展,总结碳材料、导电高分子、金属-有机框架材料等以及复合材料固定化酶的研究现状,分析各种材料的介观结构、理化性能,及其在酶固定中的优势和缺点.探讨以提高材料生物相容性从而提升氧化还原酶稳定性和催化效率为导向的界面修饰调控策略.着重介绍导电材料固定化氧化还原酶,及其在生物转化、生物传感器、生物燃料电池等领域的应用.展望氧化还原酶固定化的发展趋势和所面临的挑战.

摘要： cqvip:珠蛋白是一类结构保守的血红素蛋白家族,大部分生命中均有表达[1]。它们具有紧凑的螺旋构象和附着血红素的能力,允许气态双原子分子可逆结合,包括氧(oxygen,O2)、一氧化氮(nitric oxide,NO)和一氧化碳(carbonic oxide,CO)等[1],在机体中主要承担氧的储存和运输功能。已知的珠蛋白主要有红细胞特异性血红蛋白(hemoglobin,Hb)、肌肉中的肌红蛋白(myoglobin,Mb)、神经元和神经内分泌组织中的脑红蛋白(neuroglobin,Ngb),以及各种器官中普遍存在的胞红蛋白(cytoglobin,Cygb)。

摘要： 目的 ·通过整合不孕症遗传因素大数据,挖掘突变规律及相关致病基因.方法 ·根据全球蛋白资源数据库(Universal Protein Resource,Uniprot)蛋白类别对搜集的人类不孕症致病基因进行分类,统计分析临床病例中每类基因的突变频数.针对功能异常的氧化还原酶这一重要致病因素,进行功能和通路分析,观察通路的相关情况.于小鼠基因数据库(Mouse Genome Informatics,MGI)获取人类类固醇激素生成通路的小鼠同源基因及致病信息,寻找规律并结合基因互作分析评估其中的潜在基因.结果 ·不孕症致病基因里氧化还原酶类基因突变最常见,可能最易发生突变;其聚集于类固醇激素生成通路,发现潜在相关突变基因,并发现此通路醛酮还原酶家族1成员C3(aldo-keto reductase family 1 member C3,AKR1C3)是其中最可能的人类不孕症的潜在致病基因.结论 ·主要产生类固醇激素的氧化还原酶类致病基因在不孕症中突变最常见,可能包括AKR1C3.

摘要： 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)是生命体中必不可少的氧化还原辅因子.NAD具有β-NAD和α-NAD两种差向异构体,而大多数NAD依赖酶偏好β-NAD.近年来,已合成大量结构简化的NAD类似物,并探索其作为氧化还原辅因子应用于生物催化反应.通常认为酶天然具有立体选择性,而很多结构简化的NAD类似物不含手性中心,暗示有必要合成手性NAD类似物以评估其性能.本研究拟设计合成手性NAD类似物,并初步探讨部分氧化还原酶利用它们作为辅酶的催化性能.以商品化光学纯的氨基-3-苯基丙酸为手性原料,合成了两对NAD类似物对映体,并用来源于巨芽孢杆菌的突变型细胞色素P450单加氧酶(P450 BM3 R966D/W1046S)和来源于硫化叶菌的突变型葡萄糖脱氢酶(SsGDH I192T/V306I),测试这些NAD类似物作为辅酶的催化活性.结果发现,P450 BM3 R966D/W1046S利用还原型S构型NAD类似物的催化效率高于对应的R构型NAD类似物;而SsGDH I192T/V306I则对NAD类似物对映体均没有活性.研究初步表明,氨基酸可作为手性原料制备立体构型明确的NAD类似物,而氧化还原酶表现出偏好特定手性NAD类似物的现象,也提示需要合成更多的手性NAD类似物,并系统测试和匹配氧化还原酶及其突变体,以创建出基于辅酶依赖型氧化还原酶的新催化体系.

摘要： 碳氢键选择氧化是合成化学领域的重要课题,其中烷烃选择性羟化反应更是面临着化学选择性、区域选择性和立体选择性等多重挑战.细胞色素P450酶广泛分布于动植物和微生物体内,是公认的多功能生物氧化催化剂.P450酶对惰性C—H键的选择性氧化具有独特优势,在催化烷烃选择性羟化反应方面拥有巨大潜力.本综述简述了P450单加氧酶及其催化烷烃选择性羟化的反应机理,梳理了来自CYP 153家族、CYP52家族和其他家族的天然P450酶催化各类烷烃底物的氧化反应和选择性,讨论了理性设计和定向进化策略在开发烷烃羟化P450突变酶过程中的经典案例,介绍了底物工程、诱饵分子、双功能小分子协同催化等几种化学活化P450酶的策略及其在烷烃羟化上的应用,探讨了P450酶在烷烃选择性羟化方面所面临的挑战和解决途径,并展望了其应用前景.

摘要： 本发明提供了能够将乙酰辅酶A转化为克罗伊醇的微生物,以及单独或与丙酮和/或异丙醇组合生产克罗伊醇的发酵方法。微生物可以被遗传工程来表达和/或破坏下列酶中的一种或多种:乙醛脱氢酶、醇脱氢酶、双官能乙醛/醇脱氢酶、醛氧化还原酶、磷酸转乙酰酶、乙酸激酶、Co A转移酶A、Co A转移酶B、乙酰乙酸脱羧酶.

摘要： 开发系列氧化还原酶实现温和自由基聚合用于高分子凝胶的制备.常见的氧化还原酶包括辣根过氧化物酶、葡萄糖氧化酶、胺氧化酶、氨基酸氧化酶等,它们通过氧化拔氢、还原脱羟基和氧化脱羧等不同单电子转移途径形成引发自由基.酶促自由基聚合成胶相对于常用的热、射线及超声等自由基引发成胶手段具有具有聚合条件温和、成胶时间可控、生物相容性等优点.因此,酶催化聚合及氧化交联可用于高分子复合凝胶的温和制备和打印成型.在此基础上,进一步开发了含酶的宏观凝胶及纳米凝胶,实现ROS响应性生物酶诱导显像和治疗研究.

摘要： 通过表达多种重组立体选择性氧化还原酶,分析其催化不对称还原N,N-二甲基-3-酮-3-(2-噻吩)-1-丙胺(DKTP)的性质,从而构建酶促合成(S)-N,N-二甲基-3-羟基-3-(2-噻吩)-1-丙胺(DHTP)的反应体系.基于已有立体选择性氧化还原酶重组大肠杆菌,通过Ni离子亲和层析法纯化得到重组氧化还原酶,以DKTP为底物,考察不同重组氧化还原酶对DKTP的催化活性和选择性,进一步对高选择性酶促合成(S)-DHTP的重组酶CR2进行性质分析,并考察其在最适条件下不对称还原DKTP的过程.筛选获得产物构型为(S)-型的催化活性最高的酶为CR2,该酶米氏常数Km为0.135mmol/L,Kcat/Km为3.689L/(mmol·s),最适pH8.4(0.1mol/L三乙醇胺缓冲液),最适反应温度为35°C,在10-45°C条件下和pH7.5-8.5较为稳定,Zn2+离子对酶活有促进作用.CR2催化DKTP不对称还原反应6h后,DHTP的产率达92.1％、光学纯度达99.9％.基于活性和选择性分析,获得不对称还原DKTP的目标酶CR2,其催化特性有利于高立体选择性还原DKTP生成度洛西汀中间体(S)-DHTP,从而为进一步提高酶促不对称还原DKTP的转化效率提供研究基础.

摘要： 目的:观察P450氧化还原酶(P450 oxidoreductase,POR)*28单核苷酸基因多态性对他克莫司药动学参数的影响.方法:选择71例健康男性志愿者,在签署知情同意书后,单剂量口服他克莫司2mg.PCR-RFLP法测定CYP3A5*3基因型,PCR-direct sequencing法对POR*28进行基因分型.UPLC-MS/MS测定服药后不同时间点的他克莫司全血血药浓度,并运用非参数法估测其药动学参数.结果:CYP3A5*3基因中,*1/*1型频率为9.8％(n=7),*1/*3型为33.8％(n=24),*3/*3型为56.4％ (n=40).此外,POR*28CC型频率为45.1％(n=32),CT型为50.7％(n=36),TT型为4.2％(n=3).在71例受试者中,POR*28CC型与POR*28 T型的药动学参数之间并无统计学差异,但在CYP3A5表达者中(CYP3A5*1携带者),POR*28CC野生型携带者AUC0-∞为94.3±58.3hng/mL,显著高于POR*28 CT携带者57.3±33.9hng/mL(P=0.036);同样,POR*28 CC野生型携带者Cmax为17.6±9.8 ng/mL,也显著高于POR*28 CT携带者11.2±6.1ng/mL(P=0.034).结论:POR*28 C＞T基因突变使CYP3A5表达者的他克莫司暴露量(AUC,Cmax)减少.提示该基因突变成为CYP3A5*3外,可能影响他克莫司个体差异的基因遗传因素.

摘要： 利用Klebsiella pneumoniae微氧发酵甘油生产1,3-丙二醇时,一部分甘油通过氧化代谢途径大量合成副产物2,3-丁二醇,降低了1,3-丙二醇的得率。2,3-丁二醇的形成不仅消耗了大量甘油,还将还原型辅酶NADh 氧化为NAD+,降低了同为NADh 依赖型的1,3-丙二醇合成途径的效率。在下游的分离阶段,2,3-丁二醇与1,3-丙二醇性质接近,影响到1,3-丙二醇的分离过程和最终纯度。2,3-丁二醇氧化还原酶(AR)是2,3-丁二醇合成途径的关键酶之一,编码此酶的是budC 基因。本文以2,3-丁二醇氧化还原酶为改造目标,以Klebsiella pneumoniae为宿主,通过同源重组技术在Klebsiella pneumoniae的budC基因中地插入了带有启动子的四环素抗性基因(Tet),经抗性筛选和基因水平鉴定,得到budC基因敲除的重组菌。通过摇瓶发酵,并研究了这株重组菌的菌体干重,结果表明重组菌的菌体生长受到明显抑制,细胞干重降低34.8%。通过液相色谱测量发酵液成分,结果显示,2,3-丁二醇合成浓度比出发菌株大大降低。摇瓶中甘油初始浓度是20 g/L,重组菌合成的1,3-PD浓度达到10.87gL-1,甘油转化率达到0.6577mol/mol,与出发菌种的最好的发酵结果相比,产量提高20.78%。因此，敲除2,3-丁二醇氧化还原酶基因是一种提高1,3-丙二醇产量,降低分离成本的有效方法。

摘要： 释放到环境中的人工纳米材料会与环境介质如水、土壤、光照、微生物等发生作用,改变其物理化学性质、团聚状态、移动性,最终影响它的环境效应.富勒烯(C60)对真核生物细胞、水蚤、鱼类都表现出强烈毒性.因而研究人工纳米碳在环境介质中的物理、化学、生物转化对于正确评价其移动性、生物可利用性、环境归趋具有重要意义.其中生物转化是很多污染物被彻底降解进入碳循环的重要途径,但是关于人工纳米碳生物转化的研究还非常少.本研究中探讨了多种氧化还原酶对原始单壁碳纳米管(SWNT)、氧化单壁碳纳米管(O-SWNT)和C60的酶促转化可能。对SWNT，采用拉曼光谱、近红外光谱和透射电子显微镜表征了可能的结构改变。发现了锰过氧化物酶对SWNT具有一定转化作用，而对通常认为生物可利用性更高的O-SWNT无转化效应。这可能与O-SWNT表面官能团与酶的活性中间产物作用有关。通过动态光散射、透射电子显微镜、高效液相色谱和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱等分析方法表征了C60的酶促转化产物。研究结果表明，C60水溶液被转化成水溶性更强的类富勒醇样产物，C60的笼状结构上添加了多种含氧官能团，如羟基、醚和环氧化物/半缩酮等。

摘要： 为了解CcmG的工作机制,本文用异核多维NMR技术解析其还原态结构,这为从分子水平上了解CcmG如何发挥功能奠定基础.从初步结果己可看出，还原态CcmG具有与氧化态相似的结构，N端结构域由1个β折叠和1个310螺旋构成;C端具备典型TRX结构域特征，C80和C83没有形成二硫键表明蛋白处于还原态。

摘要： 属于厌氧型细菌的运动发酵单胞菌(Zymomonas mobilis)是自然界中迄今为止唯一己知的将丙酮酸脱梭酶及乙醇脱氢酶与独特的Enter-Doudoroff (ED)糖醉解途径相偶联高效产生乙醇的微生物。它具有酒精产率高、酒精耐受力强、副产物少等优点.与酿酒酵母相似，运动发酵单胞菌由于自身缺少必要的木糖代谢途径而无法利用木质纤维素水解产生的木搪等戊糖成分，从而限制了其在酒精发酵生产中的应用。

摘要： 利用酶促合成，以典型的氧化还原酶辣根过氧化物酶催化合成新型聚合物4-羟基苯乙烯基吡啶及3，3，5，5-四甲基联苯-4，4-二酚;探讨其反应机制，筛选了最佳的酶促反应条件。

摘要： 以克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)基因组为模板扩增出编码1,3-PDOR的基因dhaT,酶切后连接到载体 pET23a(+),以该重组载体为模板进行引物重叠延伸定点突变,获得含有突变基因的重组载体。以大肠杆菌DH5α为克隆宿主进行基因扩增,以大肠杆菌BL21(DE3)为表达宿主进行蛋白表达。表达产物经纯化后达到了电泳级纯度。酶活测定显示,突变酶分别以NADH和NADPH为辅酶时比酶活为629.38 Umg-1和277.35 Umg-1,而原始酶分别为706.90 Umg-1和20.95 Umg-1。

摘要： 本研究针对先前采用分子模拟技术找到的影响1,3-PDOR辅酶特异性的关键氨基酸残基，通过定点突变技术实现对其辅酶特异性改造。并对其进行测试，结果表明成功引入了突变位点，实现了对1,3-PDOR辅酶结合特异性的改造，为构建高产1,3-PD的新型基因工程菌奠定了基础。

摘要： 本发明涉及通式I的开环二酮(Secodion)衍生物的对映体选择性酶促还原方法

摘要： 本发明涉及通式I的开环二酮(Secodion)衍生物的对映体选择性酶促还原方法，其中环结构不包括杂原子、包括一个杂原子或包括数个杂原子，R

摘要： 本发明涉及新的根瘤菌GIN611KCTC11708BP或其细胞提取物，显示糖酵解活性的新氧化还原酶，编码所述氧化还原酶的基因，包括重组载体蛋白的重组菌株，或编码重组蛋白的表达载体，以及使用上述物质作为生物催化剂将天然产物糖酵解的方法。本发明还涉及一种使用上述物质从各种天然产物产生糖苷配基的方法。从本发明新的微生物分离的新氧化还原酶不属于葡糖苷酶类，但属于氧化还原酶类，并具有针对天然产物的糖酵解活性。新的氧化还原酶氧化天然产物糖苷配基中的糖，从而产生各种糖苷配基。

摘要： 本发明公开了一种氨基酸序列如序列表中SEQ ID No.2所示的氧化还原酶或其重组酶作为羰基还原酶催化剂在不对称还原前手性羰基化合物以制备光学活性手性醇中的应用。本发明还公开了由下述方法制得的重组氧化还原酶：培养包含碱基序列如序列表中SEQ ID No.1所示的氧化还原酶基因的重组表达转化体，即可。本发明涉及的氧化还原酶制备简便，作为羰基还原酶催化剂可适用的前手性羰基化合物范围广，具有优异的催化活性，可获得高转化率、高光学纯度的光学活性手性醇，并且可实现自身辅酶NADH的再生，无需另外加入其它辅酶再生系统，整个反应过程不需控制pH，反应条件温和，具有很好的工业应用开发前景。

摘要： 一种电化学基传感器，其包括：电极，其具有至少一个电极表面；薄膜，其设置在所述电极表面上；和渗析膜，其设置在所述薄膜上。所述薄膜包括氧化还原酶和亲水性氧化还原聚合物(即具有被连接的氧化还原介体的聚合物)。此外，所述渗析膜起把氧化还原聚合物和氧化还原酶截留在电极周围的作用。这样的截留通过使用分子量足够高以至于不能通过该渗析膜的氧化还原酶和亲水性氧化还原聚合物实现。

摘要： 本发明涉及新的根瘤菌GIN611KCTC11708BP或其细胞提取物，显示糖酵解活性的新氧化还原酶，编码所述氧化还原酶的基因，包括重组载体蛋白的重组菌株，或编码重组蛋白的表达载体，以及使用上述物质作为生物催化剂将天然产物糖酵解的方法。本发明还涉及一种使用上述物质从各种天然产物产生糖苷配基的方法。从本发明新的微生物分离的新氧化还原酶不属于葡糖苷酶类，但属于氧化还原酶类，并具有针对天然产物的糖酵解活性。新的氧化还原酶氧化天然产物糖苷配基中的糖，从而产生各种糖苷配基。

摘要： 本发明公开了一种氨基酸序列如序列表中SEQ ID No.2所示的氧化还原酶或其重组酶作为羰基还原酶催化剂在不对称还原前手性羰基化合物以制备光学活性手性醇中的应用。本发明还公开了由下述方法制得的重组氧化还原酶：培养包含碱基序列如序列表中SEQ ID No.1所示的氧化还原酶基因的重组表达转化体，即可。本发明涉及的氧化还原酶制备简便，作为羰基还原酶催化剂可适用的前手性羰基化合物范围广，具有优异的催化活性，可获得高转化率、高光学纯度的光学活性手性醇，并且可实现自身辅酶NADH的再生，无需另外加入其它辅酶再生系统，整个反应过程不需控制pH，反应条件温和，具有很好的工业应用开发前景。

摘要： 本发明涉及电化学领域，特别涉及提高电化学活性的氧化还原酶及含有该氧化还原酶的生物传感器。申请人发现经过化学交联的葡萄糖氧化酶仍然保持着它们的直接电化学活性，例如戊二醛化学交联的含有经过修饰的葡萄糖氧化酶的葡萄糖生物传感器在电极上呈现出良好的电化学性能，而且是一个典型的表面电化学现象。以上实验结果证明化学交联没有对电化学活化后的葡萄糖氧化酶产生显著的影响，这就为电化学活化后的葡萄糖氧化酶在植入式持续葡萄糖监测系统中的应用铺平了道路。

摘要： 一种电化学基传感器，其包括：电极，其具有至少一个电极表面；薄膜，其设置在所述电极表面上；和渗析膜，其设置在所述薄膜上。所述薄膜包括氧化还原酶和亲水性氧化还原聚合物(即具有被连接的氧化还原介体的聚合物)。此外，所述渗析膜起把氧化还原聚合物和氧化还原酶截留在电极周围的作用。这样的截留通过使用分子量足够高以至于不能通过该渗析膜的氧化还原酶和亲水性氧化还原聚合物实现。

摘要： 本发明涉及用于酶电催化还原的氧化还原酶电极及其制备方法和其酶电反应器。与酶电极检测检测限低、灵敏度高的要求相比，酶电催化要求能耐受高浓度底物、酶稳定性好，催化效率高。本发明的辅酶与酶共固定化在电极上，可实现辅酶原位再生，提高反应效率，可实现手性化合物的酶电催化高效制备，具有良好的应用前景。