根皮素

摘要： 根皮素(phloretin,Pht)属于二氢查耳酮类化合物,主要存在于苹果、梨、草莓等果蔬中,具有抗菌、抗病毒、抑制酪氨酸酶、降血糖、抗肿瘤等多种生理功能,在食品、医药品、化妆品等领域中有很大的应用发展前景。但是Pht的分子结构使其分子间存在强烈的氢键作用,从而导致其水溶性较差,生物利用度低,这些问题使得Pht的应用受到限制,因而为拓宽Pht的应用领域迫切需要提高其溶解度。本文总结了Pht一系列生理功能,概括了Pht主要的增溶方法,并对目前Pht开发研究中存在的问题进行探讨,旨为未来Pht的开发利用提供参考。

摘要： 目的探讨根皮素(phloretin,PHL)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)导致的BV2小胶质细胞的氧化应激损伤的抑制作用及可能的分子机制。方法利用LPS建立BV2小胶质细胞的氧化应激损伤模型,对该模型予以不同浓度的PHL预处理。利用MTS方法检测细胞活力。ELISA法检测氧化应激相关产物一氧化氮(nitric oxide,NO)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性。双荧光素酶活性检验方法检测抗氧化响应元件荧光素酶报告基因质粒(antioxidant reaction element luciferase reporter plasmid,ARE-LUC)报告基因转录活性。Western blotting法检测磷酸化核因子-E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)和血红蛋白加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)蛋白表达。结果与对照组相比,LPS处理后的BV2小胶质细胞活力显著降低,氧化应激产物NO和MDA水平明显升高,GSH含量和SOD活性明显下降,但Nrf2磷酸化水平、ARE-LUC报告基因转录活性和HO-1蛋白表达略有增高。与模型组比较,高剂量PHL(20μmol/L)预处理明显改善了LPS导致的BV2小胶质细胞活力下降,降低NO和MDA的含量,增高GSH的含量和SOD的活性,且进一步增加了Nrf2的磷酸化水平,上调ARE-LUC的转录活性和HO-1蛋白的表达。结论PHL可以显著抑制LPS导致的BV2小胶质细胞的氧化应激损伤,Nrf2/ARE通路可能是根皮素发挥抑制BV2小胶质细胞氧化应激损伤作用的途径之一。

摘要： 本研究旨在探究根皮素(PT)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的牛脂肪源性干细胞(ADSCs)氧化应激和凋亡的影响。试验选取牛脂肪组织,使用Ⅳ型胶原酶分离牛ADSCs,传代培养后利用免疫荧光对牛ADSCs表面标记蛋白CD29、CD44、CD73及Vimentin进行鉴定。用不同浓度(0、100、200、500、1000μmol/L)的过氧化氢(H_(2)O_(2))处理牛ADSCs 24 h,通过CCK-8法检测细胞存活率,筛选构建牛ADSCs氧化应激模型的适宜H_(2)O_(2)浓度。利用CCK-8法检测不同浓度(0、10、50、100μmol/L)PT作用4 h后牛ADSCs的存活率,确定PT对牛ADSCs进行预保护的适宜浓度。随后先用不同浓度(0、10、50μmol/L)PT预处理牛ADSCs 4 h,对牛ADSCs进行预保护;再利用500μmol/L H_(2)O_(2)处理牛ADSCs 24 h。采用试剂盒检测牛ADSCs内氧化应激相关指标,包括丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性;荧光探针2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)测定细胞内活性氧(ROS)含量;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞凋亡相关基因B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)及半胱天冬酶-3(Caspase-3)mRNA相对表达量。结果显示:500μmol/L的H_(2)O_(2)能引起牛ADSCs存活率极显著下降(P0.05),而100μmol/L的PT会引起牛ADSCs的存活率显著下降(P0.05),说明在本试验的条件下,PT不会缓解H_(2)O_(2)诱导的牛ADSCs凋亡。综上所述,适量的PT可以有效缓解H_(2)O_(2)诱导的牛ADSCs氧化应激。

摘要： 壳聚糖-PVA复合膜在食品包装领域具有可降解、抑菌、成膜性好的应用优势,但存在阻隔性能差、机械强度低、抑菌性低、热稳定性差等缺点.基于对壳聚糖-PVA复合膜性能上进行改进,将天然抗氧化成分根皮素加入其中,通过溶液复合法制备不同浓度(质量分数0%、1%、2%和3%)富含苹果皮提取物根皮素的壳聚糖-PVA复合膜,测定其机械性质与水蒸气透过率,并对其结构进行表征.根皮素的加入增加了壳聚糖-PVA复合膜的热稳定性、拉伸强度和水蒸气透过率,降低了其断裂伸长率.用扫描电子显微镜(SEM)进一步研究了薄膜的表面和截面.此外,红外光谱(FT-IR)测试显示,在薄膜基体中形成了氢键.X-射线衍射(XRD)分析表明,根皮素的添加对壳聚糖-PVA膜的无定形性没有影响.与对照相比,富含根皮素的壳聚糖-PVA膜的抗氧化活性(ABTS和DPPH自由基清除能力和还原能力)和抗菌能力均有所提高.上述结果表明,根皮素是一种优良的添加剂,有助于壳聚糖-PVA膜的性能提高,在食品包装薄膜开发方面具有潜在应有价值.

摘要： 目的:研究根皮素对秀丽隐杆线虫延长寿命作用及其作用机制.方法:给予秀丽隐杆线虫一定质量浓度的根皮素(25、50、75μg/mL),分析根皮素对线虫寿命、运动能力、吞咽能力、抵抗应激能力、活性氧和脂褐素水平的调控作用,通过测定正常及突变体线虫的抗氧化酶活力、相关基因表达水平,对根皮素延长寿命的潜在机理进行了初步探讨.结果:根皮素能够显著延长线虫的寿命并抑制衰老相关的运动能力下降,增强抵抗应激能力(双氧水、紫外和高温),提高抗氧化酶活力(超氧化物歧化酶和过氧化氢酶)和自由基清除能力,减少脂褐素堆积和丙二醛的生成.采用根皮素喂养线虫后,daf-2和age-1 mRNA表达水平显著下降(P＜0.05,P＜0.01),daf-16和sir-2.1mRNA表达水平显著升高(P＜0.05,P＜0.01).突变体线虫经根皮素处理后,daf-2(e1370)、daf-16(mu86)和sir-2.1(ok434)突变体线虫寿命无显著延长;eat-2(ad1116)突变体线虫寿命显著延长(P＜0.05);且促进了DAF-16的核定位,并激活了其下游靶基因sod-3、ctl-l和hsp-16.2mRNA的表达.结论:根皮素可以通过胰岛素信号通路和SIR-2.1信号通路,促进DAF-16的核定位,提高机体应激抵抗能力和抗氧化能力,延长线虫寿命.

摘要： 目的:研究根皮素对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7巨噬细胞体外抗炎的作用机制,以全方位认识根皮素的抗炎作用机制并为临床开发新药提供理论依据.方法:CCK-8法检测根皮素对巨噬细胞增殖的影响,ELISA、实时荧光定量PCR、Western blot、荧光抗体技术(ICC-IF)分别检测TNF-α、IL-6、IL-1β、iNOS和COX-2及Akt/NF-κB、MAPK信号通路、NF-κB P65核移位.结果:CCK-8法显示根皮素药物浓度在1μg/ml～100μg/ml时其细胞增殖差异无统计学意义(P>0.05);与正常组相比,模型组TNF-α、IL-6、IL-1β、iNOS和COX-2及Akt/NF-κB、ERK1/2和P38信号通路高表达(P<0.05、P<0.01、P<0.001);与模型组相比,不同剂量组含根皮素药物干预后,TNF-α、IL-6、IL-1β、iNOS、COX-2及Akt/NF-κB、ERK1/2和P38表达下调(P<0.05、P<0.01、P<0.001).结论:根皮素能明显抑制LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞的炎症因子释放及TNF-α、IL-6、IL-1β、iNOS和COX-2的mRNA及Akt/NF-κB、ERK1/2和P38蛋白表达从而抑制炎症反应.

摘要： 目的:研究俄色叶、俄色果不同提取部位及俄色叶主要成分根皮苷、根皮素对SD大鼠离体胸主动脉环的舒张作用。方法:采用离体血管灌流实验,通过累计给药法,观察俄色叶、俄色果不同提取部位及根皮苷、根皮素对基础状态、氯化钾(KCl,60 mmol·L^(-1))预收缩的SD大鼠离体胸主动脉环张力的影响。结果:俄色叶及俄色果不同提取部位和根皮苷对基础状态的胸主动脉血管环均无显著影响,对氯化钾预收缩的胸主动脉血管环具有浓度依赖性的舒张作用。根皮素对静息状态的血管有收缩作用,而对氯化钾预收缩的胸主动脉有舒张作用,表现为双向调节作用。结论:俄色叶降压效果强于俄色果,其中有效成分根皮素作用强于根皮苷。其降压机制之一可能为抑制血压依赖性钙通道的开放,减少细胞外钙内流,使细胞内Ca^(2+)浓度下降而舒张血管。

摘要： 目的:研究俄色叶、俄色果不同提取部位及俄色叶主要成分根皮苷、根皮素对SD大鼠离体胸主动脉环的舒张作用.方法:采用离体血管灌流实验,通过累计给药法,观察俄色叶、俄色果不同提取部位及根皮苷、根皮素对基础状态、氯化钾(KC1,60 mmol·L-1)预收缩的SD大鼠离体胸主动脉环张力的影响.结果:俄色叶及俄色果不同提取部位和根皮苷对基础状态的胸主动脉血管环均无显著影响,对氯化钾预收缩的胸主动脉血管环具有浓度依赖性的舒张作用.根皮素对静息状态的血管有收缩作用,而对氯化钾预收缩的胸主动脉有舒张作用,表现为双向调节作用.结论:俄色叶降压效果强于俄色果,其中有效成分根皮素作用强于根皮苷.其降压机制之一可能为抑制血压依赖性钙通道的开放,减少细胞外钙内流,使细胞内Ca2+浓度下降而舒张血管.

摘要： 本实验旨在研究根皮素对硫代乙酰胺诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用.采用硫代乙酰胺造模,诱导小鼠急性肝损伤,以槲皮素作为阳性对照药物,通过检测血清学指标(丙氨酸氨基转移酶ALT、天冬氨酸氨基转移酶AST、γ-谷氨酰转肽酶γ-GT、碱性磷酸酶ALP和血清总胆红素TB)和组织病理切片方法,研究根皮素对小鼠急性肝损伤的保护作用.实验结果显示,在预先灌胃高、低剂量根皮素组别中,小鼠血清ALT活性分别为(149.14±21.55) U/L和(189.43±16.64) U/L,AST活性分别为(123.58±35.90) U/L和(168.64±33.32) U/L.γ-GT活性分别为(103.19±20.93) U/L和(129.30±27.91) U/L,ALP活性分别为(19.67±3.32) King U/dL和(24.17±3.58) King U/dL,血清TB浓度分别为(198.14±29.64) μmol/L和(227.04±34.20) μmol/L.相比于造模组,根皮素组ALT、AST、γ-GT、ALP和TB明显降低(n=8,p＜0.05),而且降低幅度呈现剂量依赖性,根皮素处理组的小鼠肝组织病理学病变得到了显著改善.研究表明,根皮素对硫代乙酰胺诱导的小鼠急性肝损伤有显著的保护作用,是值得进一步研究的急性肝损伤保护的候选药物和食品添加剂.

摘要： 目的 制备根皮素纳米混悬剂,并考察其体内药动学.方法 单因素试验筛选稳定剂种类、比例、用量、超声功率、超声时间,测定粒径、Zeta电位、载药量、溶解度、体外释药.12只大鼠分别灌胃给予根皮素及其纳米混悬剂的0.5％CMC-Na溶液(100 mg/kg),于0.167、0.25、0.5、1、1.5、2、3、4、6、8、12 h采血,HPLC法测定根皮素血药浓度,计算主要药动学参数.结果 最佳条件为稳定剂(PVP K30-泊洛沙姆188)比例1:1,稳定剂用量40 mg,超声功率350 W,超声时间30 min,平均粒径为167.2 nm,PDI为0.138,Zeta电位为-36.4 mV,载药量为59.60％,溶解度为867.35μg/mL,45 min内累积溶出度接近100％.与原料药比较,纳米混悬剂tmax缩短(P<0.05),Cmax、AUC0～t、AUC0～∞升高(P<0.01),相对生物利用度增加至3.47倍.结论 纳米混悬剂可改善根皮素溶出度和口服生物利用度.

摘要： 目的：研究根皮素在大鼠体内的组织分布.方法：运用LC-MS法测定口服给药后,SD大鼠各器官组织中根皮素的量.结果：给药后药物迅速分布于胃肠道组织,60min后药物主要分布于肝、肺组织中,药物在其他组织中虽有分布但较于肝、肺相对甚少,药物在脑组织中几乎检测不到.结论：研究根皮素的组织分布特征可为该药的进一步研究开发和临床应用提供重要的参考依据.

摘要： 目的:研究亚抑菌浓度根皮素对SPI-1毒力基因和鼠伤寒沙门氏菌侵袭IEC-6细胞的作用,为藏药俄色叶应用于防治鼠伤寒沙门氏菌感染提供试验依据. 方法:通过吸光度法筛选根皮素的亚抑菌浓度,建立鼠伤寒沙门氏菌侵袭IEC-6模型,涂板法检测胞内细菌数目,荧光定量PCR法检测SPI-1毒力基因. 结果:根皮素在20μg/ml、40μg/ml和80μg/ml对鼠伤寒沙门氏菌的生长无显著影响.根皮素在亚抑菌浓度20μg/ml、40μg/ml和80μg/ml显著抑制SPI-1毒力因子sipA、sopB、sopE2和SPI-1调节子HilA、HilC、HilD、rtsA和InvF的基因表达水平;并显著抑制鼠伤寒沙门氏菌对IEC-6细胞的侵袭.结论:亚抑菌浓度的根皮素能够抑制SPI-1相关毒力基因的表达,抑制鼠伤寒沙门氏菌侵袭IEC-6细胞.

摘要： 本发明公开了一种提取苹果根皮中的根皮苷和根皮素的方法及其应用，该方法包括：将苹果根皮用乙醇解析后随即加入沸水提取，将得到的提取液冷却后加入絮凝剂，反应后固液分离，分别从滤液和滤渣中提取获得根皮苷和根皮素。本发明选用苹果根皮作为原材料，采用内部沸腾法，先通过少量解吸溶剂渗透到物料内部，再加入大量的热溶剂使解吸剂沸腾汽化，产生内部对流，强化有效成分的扩散；采用真空冷冻干燥的方法，形成类似海绵状疏松多孔架构，许多热敏性的物质不会发生变性或失活，微生物的生长和酶的作用无法进行，能保持原来的性状；将真空冷冻干燥与内部沸腾法结合，使有效成分充分扩散，显著提高了提取率。

摘要： 本发明提供了一种酶菌复合体系转化根皮苷制备根皮素的方法，利用β‑葡萄糖苷酶、微生物协同作用产生的多酶复合体结构，专一破坏β‑D‑葡萄糖苷键的原理，以根皮苷为原料，同时添加β‑葡萄糖苷酶和特定微生物，通过发酵一方面增大酶量，另一方面释放辅酶因子，从而增强酶促反应，再萃取、纯化后获得高纯度、高活性根皮素。其有益效果在于，所述方法成本低，产量高，操作简单，条件温和，适合大规模工业生产。

摘要： 本发明公开了一种紫变青霉QL‑9204及在转化根皮苷制备根皮素中的应用；本发明紫变青霉QL‑9204无毒无害，使用安全的菌种；紫变青霉QL‑9204生长快、抗杂菌能力强、容易培养，批次稳定；发酵培养基成分简单，市场价格低，从而生产成本较低；本发明将底物根皮苷直接投入到粗酶液中转化，免去了酶的分离纯化步骤，工艺简单，易于工业化应用；根皮素的转化得率高，最高可达92.5％，且具有副产物少，产物容易提取等优点。

摘要： 本发明公开了一种提取苹果根皮中的根皮苷和根皮素的方法及其应用，该方法包括：将苹果根皮用乙醇解析后随即加入沸水提取，将得到的提取液冷却后加入絮凝剂，反应后固液分离，分别从滤液和滤渣中提取获得根皮苷和根皮素。本发明选用苹果根皮作为原材料，采用内部沸腾法，先通过少量解吸溶剂渗透到物料内部，再加入大量的热溶剂使解吸剂沸腾汽化，产生内部对流，强化有效成分的扩散；采用真空冷冻干燥的方法，形成类似海绵状疏松多孔架构，许多热敏性的物质不会发生变性或失活，微生物的生长和酶的作用无法进行，能保持原来的性状；将真空冷冻干燥与内部沸腾法结合，使有效成分充分扩散，显著提高了提取率。

摘要： 本发明提供了一种含有根皮三酚基团的根皮素衍生物的制备方法，所述含有根皮三酚基团的根皮素衍生物为氨基三乙酰葡萄糖苷改性的根皮素，通过预先对合成根皮素的原料中的对羟基苯丙酸中的羟基进行改性接枝，然后再与根皮三酚，即间苯三酚进行合成反应，得到相应的含有根皮三酚基团的根皮素衍生物，氨基三乙酰葡萄糖苷改性的根皮素。该衍生物既保留了根皮素的抗氧化性、抗炎性，又具有良好的水溶性和皮肤吸收效率，使得所得到的根皮素衍生物可以广泛应用到各种形式的化妆品产品中，并具有优良的抗氧化性、抗炎性作用。

摘要： 本发明提供一种把根皮苷转化为根皮素的方法，包括如下步骤：将含根皮苷的原料溶解于乙醇或水溶液中，加入纤维素复合酶与果胶复合酶的混合酶，酶解温度为45～55°C，酶解时间10～96小时，酶解结束后灭活，固液分离，得到根皮素产品。本发明通过混合酶的使用，解决单一酶酶解不完全的问题，提高根皮苷转化率，实现了根皮苷转化率提高至95％以上；本发明得到的根皮素为白色，省略了传统的工艺如酸解工艺需脱色的步骤，进一步降低生产成本。

摘要： 本发明提供了一种酶菌复合体系转化根皮苷制备根皮素的方法，利用β‑葡萄糖苷酶、微生物协同作用产生的多酶复合体结构，专一破坏β‑D‑葡萄糖苷键的原理，以根皮苷为原料，同时添加β‑葡萄糖苷酶和特定微生物，通过发酵一方面增大酶量，另一方面释放辅酶因子，从而增强酶促反应，再萃取、纯化后获得高纯度、高活性根皮素。其有益效果在于，所述方法成本低，产量高，操作简单，条件温和，适合大规模工业生产。

摘要： 本发明提供一种湖北海棠叶原料的制备方法及其在提取根皮苷或根皮素上的应用，具体包括在每年的5～10月采收湖北海棠鲜叶；采摘以后，野外就近摊凉在阴凉的地方，避免阳光照射，鲜叶采集后野外存放1‑8h后采用仓栅式货车散装运输；运输进厂的鲜叶迅速卸货摊凉；将摊凉的鲜叶装入不锈钢蒸箱内，使湖北海棠鲜叶蒸制灭活；采用高温滚筒式烘干机或热风烘干机将灭火后的湖北海棠叶在100～250°C条件下烘干即可得到干燥的湖北海棠叶原料，冷却至室温即可打包入库。采用本发明的技术方案可使湖北海棠叶原料稳定保存1年以上。

摘要： 本发明提供一种用于将根皮苷转化为根皮素的真菌及其应用，该标准菌种的分类命名为长柄链格孢菌(Alternaria longipes)，购自中国中国科学院微生物研究所，保藏编号为AS3.2875。本发明还提供了基于该真菌转化制备根皮素的方法。本发明提供的真菌与传统的转化方法相比，产率高，无环境污染。

摘要： 本发明公开了一种根皮素的制备方法。以根皮苷为原料，通过两相酸水解，得到95%产率的根皮素纯品。本发明与现有的半制备根皮素生产方法相比，解决了根皮苷转化率低，副产物多，产品纯度低的难题。整个反应和分离纯化操作简单，条件温和，催化剂在水相里可循环利用，有机溶剂可回收使用，绿色环保，适合工业化生产。