宽体金线蛭

摘要： 目的:克隆宽体金线蛭(WpE)基因,并进行生物信息学分析,为进一步研究宽体金线蛭药用价值提供理论基础。方法:从宽体金线蛭唾液腺转录组数据库筛选到WpE基因转录本,通过PCR反应验证WpE基因cDNA全长序列,运用生物信息学分析WpE基因碱基序列性质及其对应氨基酸序列的特性。结果:宽体金线蛭WpE基因碱基序列全长258 bp,编码85个氨基酸,其中包含一个由16个氨基酸组成的信号肽,成熟蛋白理论相对分子质量为8.093 kDa,理论等电点(PI)为5.85,该蛋白为亲水性蛋白,属于马铃薯抑制剂Ⅰ家族。结论:成功克隆出宽体金线蛭WpE基因,分析其序列的结构特征,该基因编码的蛋白质含有马铃薯抑制剂Ⅰ家族保守活性位点Asp46,其结合环能与胰凝乳蛋白酶结合并使其失活,具有抗炎与抗凝活性。

摘要： 目的:对宽体金线蛭仿生酶解液进行物质基础分析。方法:采用化学定性和定量的方法,对固形物、无机盐、肽、氨基酸等物质进行含量测定,并进行核苷特征图谱及肽特征图谱研究。结果:通过对15批宽体金线蛭仿生酶解液中各物质含量测定及特征图谱研究,确定固形物、无机盐、肽、游离氨基酸、总氨基酸的质量浓度分别为75.5~79.7、10.7~12.7、42.6~49.4、1.9~3.1、49.4~51.6 mg·mL^(–1)。建立宽体金线蛭仿生酶解液核苷特征图谱,共标定和归属了4个特征峰;建立宽体金线蛭仿生酶解液肽特征图谱,共标定6个特征峰。结论:建立了宽体金线蛭仿生酶解液中各物质含量测定及特征图谱的研究方法,简便快捷、重复性好,可用于对其进行质量控制。

摘要： [目的]建立中药材宽体金线蛭的环介导等温扩增(LAMP)检测技术,实现对宽体金线蛭及其常见混伪品的快速检测。[方法]针对宽体金线蛭线粒体细胞色素氧化酶I(COI)的基因序列设计LAMP引物。在64°C恒温条件下,用设计的LAMP引物组对水蛭进行LAMP扩增。[结果]LAMP反应结束后,宽体金线蛭均扩增出梯状条带,对照组无条带产生。加入0.2μL荧光染料10000×SYBR GreenⅠ后,宽体金线蛭反应液在自然光下呈绿色(阳性),对照组呈橙色(阴性)。将加入了0.2μL 10000×SYBR GreenⅠ的扩增产物置于紫外灯下观察,结果宽体金线蛭在紫外光下呈绿色荧光(阳性),对照组无绿色荧光产生(阴性)。[结论]利用LAMP技术可实现宽体金线蛭及其常见混伪品的快速鉴别,为水蛭中药材的现场鉴别提供技术支撑。

摘要： 从1963年至今,宽体金线蛭作为《中华人民共和国药典》水蛭的基原之一,但随着动物分类学的发展以及动物学家对蛭类动物科属研究的深入,有学者对此提出质疑.通过查阅本草及博物学专著,吸血食性不是判断药用蛭类基原的唯一标准,宽体金线蛭满足了药用蛭类中"马蛭"的特点——生活在淡水环境,平均体长10 cm左右,体背面色黄褐,腹面黄色,背部有多条深色纵纹,体形呈纺锤形,背面稍高,腹面平坦.宽体金线蛭应为《本草经集注》中的"马蜞",从南北朝时期有记载以来就是药用水蛭的基原之一;结合现代药理、药化研究成果及临床应用,宽体金线蛭科应作为药用水蛭的基原,不应被剔除.

摘要： 宽体金线蛭是一味中药材,具有活血化瘀、抗血栓、抗肿瘤及抗早孕等重要作用,其唾液腺中存在着能减缓血液凝固、抑制血栓形成的水蛭素.目前,宽体金线蛭体内的活性成分是治疗心血管疾病重要药物之一,因此宽体金线蛭在药业市场的需求量大.近十几年来,宽体金线蛭养殖技术和水蛭素药用价值深受研究者关注.主要归纳和总结了宽体金线蛭的生物学特性、养殖技术,水蛭素的提取方法、药理作用等方面的研究进展,以期为宽体金线蛭的养殖和开发提供参考.

摘要： 目的:建立科学的宽体金线蛭种蛭筛选原则,并对产茧后药材进行质量评价.方法:从微山湖地区采集野生宽体金线蛭1193条,对体质量和生殖环带发育等群体特征进行考察.将种蛭分为10、15、20 g 3个试验组,建立卵茧成熟度观察方法以判断适宜的挖茧时机,通过产茧数、茧体积、出苗数等指标考察体质量对宽体金线蛭繁殖性能的影响.依照2015年版《中华人民共和国药典》对产茧后水蛭药材的性状和抗凝血酶活性进行质量评价.结果:微山湖地区宽体金线蛭野生种群的体质量普遍较小,15 g及以上的种蛭仅占样本群体的19.53％;宽体金线蛭的繁殖性能随种蛭体质量的增加而显著提高,20 g试验组的产茧数(5.9个)和出苗数(37.3条)分别是10 g试验组的1.59倍和1.45倍.产茧后种蛭的死亡率和体质量损失率可高达37％和59％,药材厚度仅为产茧前的49％ ～72％,腥味散失严重、脆度下降,但产茧前后抗凝血酶活性变化不大,均为3～5 U·g-1.结论:微山湖地区野生宽体金线蛭的种群有退化趋势,建议使用15 g及以上的种蛭进行繁殖生产.产茧后药材的商品规格和等级较低,不适宜作为饮片直接用于临床.

摘要： 在水温(25.0±1.5)°C、pH 7.2～7.8、溶解氧(6.0±0.5)mg/L条件下,将体质量(0.062±0.006)g的宽体金线蛭幼蛭置于10 cm×10 cm×5 cm的80目网袋中,网袋浸于40 cm×50 cm×30 cm的塑料水箱中并固定,采用半静水式试验方法研究硫酸铜、聚维酮碘、高锰酸钾和辛硫磷对宽体金线蛭的急性毒性.试验结果显示,硫酸铜、聚维酮碘、高锰酸钾和辛硫磷对宽体金线蛭幼苗的24 h半致死质量浓度分别为0.579、78.173、3.956、0.978 mg/L;48 h半致死质量浓度分别为0.389、67.898、3.327、0.836 mg/L;72 h半致死质量浓度分别为0.280、62.747、2.703、0.611 mg/L;96 h半致死质量浓度分别为0.241、56.058、2.313、0.493 mg/L;其安全质量浓度分别为0.053、15.367、0.706、0.183 mg/L.对照国家环保总局发布的毒性分类标准,硫酸铜和辛硫磷对宽体金线蛭幼苗属高毒物,高锰酸钾属中毒物,而聚维酮碘属低毒物.

摘要： 以宽体金线蛭组织为蛋白源,用木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶组成的复合酶对宽体金线蛭组织进行酶解,然后将酶解得到的多肽与硫酸锌在不同条件下进行反应,经过硫化钠法定性测定,制备出一种多肽锌螯合物.运用紫外、红外、荧光、X衍射分析技术对多肽和多肽锌螯合物的结构进行了初步研究分析.实验结果表明:宽体金线蛭多肽与七水合硫酸锌的螯合反应体系的pH、多肽与锌的质量比、多肽浓度对反应螯合率具有重要影响;对多肽和多肽-锌螯合物紫外、红外、荧光、X衍射图谱对比分析,发现两者的图谱明显的改变,说明多肽加锌螯合后结构产生了显著变化;最后根据多肽与多肽锌螯合物的红外光谱图和多肽金属螯合物的一些结构特性,推断出了宽体金线蛭多肽锌螯合物一种可能的结构.

摘要： 本发明所要解决的技术问题是提供一种既可以提高宽体金线蛭的产量和存活率又可以解决三角帆蚌整齐度低的问题，同时也能增收泽泻与珍珠，提高池塘的空间利用率和经济效益的泽泻‑宽体金线蛭‑三角帆蚌立体种养殖方法。本发明所述的泽泻‑宽体金线蛭‑三角帆蚌立体种养殖方法在每年当年9月，在收获宽体金线蛭的同时，还可收获泽泻、珍珠三种中药材，有效提高了池塘的空间利用率，相较于宽体金线蛭单一饲养模式，不但提高了宽体金线蛭的产量和存活率，同时也能增收泽泻与珍珠，又可以解决三角帆蚌整齐度低的问题，提高了池塘的空间利用率和经济效益。适合在水生中药材养殖领域推广应用。

摘要： 本发明涉及一种宽体金线蛭养殖藕田系统及宽体金线蛭藕田养殖方法。为克服现有技术缺陷，本宽体金线蛭养殖藕田系统包括藕田，藕田四周开挖有环沟，环沟内设有交通沟，环沟、交通沟的宽度控制在40～50cm之间，交通沟和环沟的沟底由多段交通沟和环沟的沟底由多段坡底构成，相邻的坡底之间形成波峰或波谷，波谷处挖有集螺坑，每个集螺坑底设有排水管，每个集螺坑上方设有一定滑轮和拉绳，拉绳一端系在一托盘，该托盘包括边框和连接在边框上的网底，拉绳另一端跨过定滑轮后，系在一杠杆的中段上，该杠杆前端铰接固定，所述托盘可沉入集螺坑内，并配有一个手抄网。本发明适用于宽体金线蛭的高密度养殖。

摘要： 本发明公开了一种宽体金线蛭用抗热应激复合饲料及其制备方法，属于饲料技术领域，该宽体金线蛭用抗热应激复合饲料由以下质量份的原料组成：螺蛳肉20‑30份、河蚌肉20‑30份、蝇蛆5‑15份、鱼粉5‑15份、琼脂0.1‑0.5份、对羟基苯甲酸甲脂0.1‑0.5份、复合维生素0.2‑1份、复合微量元素0.02‑0.05份、中草药添加剂0.5‑2份、诱食剂1‑5份和水5‑15份；其中，中草药添加剂是由质量比为3～7:1～2:1～2的黄芪、金银花和紫花制得。本发明可有效解决现有技术中存在的宽体金线蛭耐热性弱和高温季节成活率低等问题，同时该复合饲料具有适口性佳和促进宽体金线蛭生长等特点。

摘要： 本发明公开了一种宽体金线蛭养殖水全生态运行系统及养殖方法，涉及宽体金线蛭养殖技术领域，所述的系统包括养殖池单元、生化处理单元和净化池单元，依次通过PVC管道连接形成闭环自动循环系统；养殖池单元由多个框架PE膜养殖池组成，框架PE膜养殖池中铺设曝气盘和潜水泵，框架PE膜养殖池中还包括营养添加剂，营养添加剂包括维生素、有机钙、微量元素；生化处理单元包括相互连通的流化床和硝化仓，流化床与养殖池单元连通，硝化仓与净化池单元连通；硝化仓包括依次连接的毛刷仓、过滤棉仓、生化球仓、细菌屋仓；流化床包括填料、曝气盘支架、曝气盘、曝气管路；净化池单元中包括水生植物、水生动物、微生物制剂。

摘要： 本发明属于多肽领域，涉及宽体金线蛭抗凝血因子XIa多肽及其突变体的应用。本发明为宽体金线蛭（Whitmania Pigra）唾液腺转录组数据库中筛选得到Kunitz型多肽序列，对其进行构建表达、筛选、氨基酸替换，得到一系列多肽，所述的多肽作为前药，或用于脑损伤（如中风，脑中卒）等疾病预防与治疗。具有安全有效等特点，适合于抗血栓药物研究与开发。

摘要： 本发明公开了一种宽体金线蛭的双联免疫养殖法：包括以下步骤：步骤1：对繁育池内水体四项生化指标调控，水体以偏肥为好，10cm以下水深温度25～28摄氏度；步骤2：改底：在投过3次及以上螺蛳或在下螺前1～2天进行生物、物理改底或化学改底，减少池底“氧债”提高底部氧化还原电位；步骤3：开口苗到满月苗：对开口前幼蛭养殖从群居到分散，让幼苗顺利进食，对开口前幼苗水温控制在20°C～25°C为宜，水深宜保持在30～50cm，选择合适的开口料；步骤4：对养苗日常护理，做好巡塘工作；步骤5：对满月苗日常护理管理与疾病预防。本发明与现有技术相比的优点在于：提供一种“水体免疫”、“蛭体免疫”双双联合的一种宽体金线蛭的双联免疫养殖法。

摘要： 本发明公开了一种宽体金线蛭孵化的人工干孵法，包括以下步骤：人工孵化产床建设：采用普通温室大棚的方式，温度湿度均可控，选择向阳避风位置，选择种蛭：选择成品种蛭：产床投种：投种前对产床土壤进行处理；产床护理：在水蛭卵茧孵化时对产房温度湿度进行调配；挖茧：掌握挖茧时机，定时查看成熟度；孵化：准备孵化设备及孵化场地，将卵茧放入孵化设备孵化；出苗：温度适宜的情况下每茧产出后约16～25天孵化出幼蛭，将出苗后的幼体放入精养池。本发明与现有技术相比的优点在于：提供一种避免土壤存在的细菌、微生物、农药残留和重金属残留对种蛭的生存造成威胁，稳产、高产、蛭苗优良降低生产成本的一种宽体金线蛭孵化的人工干孵法。

摘要： 本发明属于养殖方法技术领域，具体公开了一种宽体金线蛭生态养殖方法，包括以下步骤：S1、搭建养殖池：避风向阳处设置养殖池，养殖池由水泥建造形成，池内铺设塑料膜隔水，池底铺设碎石；S2、种植水生植物：养殖池中投入水草、藻类、水浮莲以及水葫芦作为水生植物；S3、投放水蛭：要求投放单个大小为20‑30克左右，每公顷投种蛭500千克，水温保持在22‑25°C；S4、投放饵料：投放小米虾、田螺，投放量为水蛭重量的2‑3倍；S5、投放饲料：每周投放一次环保饲料作为补充，以促进水蛭生长；S6、光照控制：采用白光进行照射。本发明实现了水蛭的生态养殖。

摘要： 本实用新型涉及一种宽体金线蛭养殖藕田系统。为克服现有技术缺陷，本宽体金线蛭养殖藕田系统包括藕田，藕田四周开挖有环沟，环沟内设有交通沟，环沟、交通沟的宽度控制在40～50cm之间，交通沟和环沟的沟底由多段交通沟和环沟的沟底由多段坡底构成，相邻的坡底之间形成波峰或波谷，波谷处挖有集螺坑，每个集螺坑底设有排水管，每个集螺坑上方设有一定滑轮和拉绳，拉绳一端系在一托盘，该托盘包括边框和连接在边框上的网底，拉绳另一端跨过定滑轮后，系在一杠杆的中段上，该杠杆前端铰接固定，所述托盘可沉入集螺坑内，并配有一个手抄网。本实用新型适用于宽体金线蛭的高密度养殖。

摘要： 本实用新型公开了一种宽体金线蛭的养殖装置通过四块分散板配合箱体增大宽体金线蛭的吸附面积，使得宽体金线蛭可以分散吸附在分散板和箱体内壁上，未被及时采食的饵料会向下沉淀，通过三角斜板将沉淀的饵料向中间集中导向筛板，通过筛板将未被及时采食的饵料分筛到隔滤件555上，有效将饵料进行清理出，防止饵料直接堆积在箱体内部而腐烂，有效对箱体内的养殖环境进行保护。