摘要:猪圆环病毒病(porcine circovirus diseases,PCVD)是近几年影响世界养猪业的最重要的病毒性传染病之一,其主要病原为猪圆环病毒2型(porcinecircovirus type 2,PCV2)。rn PCV2靶向攻击淋巴组织细胞、损伤免疫系统并侵袭猪的多个器官,不仅造成断奶仔猪多系统衰竭综合征(Postweaning multisystemic wasting syndrome,PMWS),同时还是猪呼吸道疾病的重要组成部分,另外与猪的皮炎和肾病综合征、先天性震颤、繁殖障碍、胎儿心肌炎和扩张性坏死性肺炎等密切相关。流行病学调查研究表明,当前我国猪场的PCV2感染已相当普遍,由PCV2感染引起的圆环病毒病已经给我国养猪业造成了巨大的经济损失。本研究采用PCR方法对从山东、山西、北京、河北和天津收集的疑似PMWS病猪的病料进行PCV2检测,将检测结果为阳性的病料处理后,接种PCV阴性的PK-15A细胞进行病毒分离,共获得5株病毒,分别命名为DBN-SD02、DBN-SX07、DBN-BJ08、DBN-HB12、DBN-HB13。将各PCV2分离株连续传至第15代,并分别对各分离株的第5、8、12和15代进行纯净性、特异性检验和病毒含量测定。纯净性检测结果显示PCV2各分离毒株均纯净、特异,无细菌、霉菌、支原体和外源病毒污染。间接免疫荧光法(IFA)对分离到的病毒进行PCV2特异性检测,结果可见特异性绿色荧光。TCID50法测定各分离毒株的病毒含量,结果显示,DBN-SX07株经连续传代至第15代,毒价稳定,为10 5.6~10 5.8 TCID50/mL,可作为制苗用候选毒株。