巨细胞病毒感染对调节性T细胞和Ⅰ型、Ⅱ型辅助性T细胞分化增殖的影响

摘要

目的 定量检测巨细胞病毒(murine cytomegalovirus,MCMV)感染小鼠脾细胞调节性T细胞(Treg)、辅助性T细胞1型和2型(Thl/Th2)特异性转录因子Foxp3、T-bet和GATA_3mRNA水平的动态变化,探讨MCMV在急慢性感染期对Treg、Thl和Th2细胞分化增殖的影响及其意义.方法 建立MCMV全身播散型感染模型,根据主要脏器内病毒滴度,确定感染后28 d为本模型急、慢性期界定点.42只模型鼠分别于接种病毒后第1、3、7、14、28、45、60天各处死6只小鼠,分离脾细胞,以灭活MCMV抗原为刺激原,体外培养5d,另设42只正常小鼠作为模拟感染对照.用Real-time RT-PCR法检测小鼠脾细胞Foxp3、T-bet和GATA.3 mRNA表达强度.结果 MCMV感染组第7天T-bet mRNA表达显著增高达峰值,与模拟感染对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01),随后下降,到第28天降到对照组相当水平,至第60天显著低于对照组(P＜0.01);而GATA-3 mRNA在感染后第3天表达开始升高,第7天达峰值,第14天开始缓慢下降,但至第60天仍显著高于对照组(P＜O.05);Foxp3 mRNA表达在感染后14天明显低于对照组,第28天显著降低(P＜0.01),但至第45天开始明显上调,第60天升高更显著(P＜0.01).结论 在感染急性期,Treg未被诱导活化,宿主产生有效Thl/Th2应答反应,但随后逐渐下降,并向Th2偏移;在感染慢性期,Treg细胞增殖活化显著,进一步抑制,rIll和Th2反应,且对Thl抑制效应更强,提示CMV诱导Treg细胞增殖活化是其抑制宿主抗病毒免疫而呈持续慢性感染的重要原因.