小鼠巨细胞病毒感染鼠胚成纤维细胞对共培养调节性T细胞增殖和活化的影响

摘要

目的：研究小鼠巨细胞病毒(MCMV)感染对共培养体系中调节性T细胞(Treg)的诱导作用和Treg在抗病毒免疫中的调节作用。rn 方法：建立小鼠T淋巴细胞与感染CMV的同系小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)体外共培养的细胞模型。蚀斑法检测共培养上清液中感染性病毒量；细胞计数法分析体系中T细胞的扩增情况；流式细胞术检测共培养体系中CV4+CD25+Treg细胞比率，Western印迹法检测T细胞中Foxp3蛋白表达强度；RT-PCR法检测成纤维细胞中TGF-β mRNA表达水平；ELISA法检测细胞培养上清液中TGF-β蛋白表达水平。计量资料结果用x±s表示，组间差异采用单因素方差分析，以P<0.05为具有统计学意义。rn 结果：T细胞与MCMY感染的MEF共培养1d和3d后，培养上清液中病毒负荷量较对照组显著减少；但是共培养6d后，T细胞的免疫保护作用消失，病毒量[(5.58×105)PFU/mL]与感染对照组[(6.05×106)PFU/mL]比较差异无统计学意义。CMV感染3d后,T细胞数目由感染前的(2.02±0.05)×106/mL增至(2.25±0.05)×106/mL，P