肺炎支原体P30蛋白结构基因的克隆和表达研究

摘要

目的构建完整的肺炎支原体粘附分子P30蛋白结构基因原核表达质粒并进行表达.方法用引物修饰法将P30基因中唯一的"UGA"码突变为"UGG",PCR扩增出P30蛋白编码基因后定向克隆入PET32a(+)质粒,构建PET32a(+)/P30重组体,再转化到大肠杆菌BL21中,用IPTG诱导表达外源基因.结果成功扩增出不含"UGA"码的P30基因;经双向测序结果与GenBank注录的P30基因序列一致;SDS-PAGE显示P30基因在BL21中得到完整表达.结论获得含有完整P30基因的重组克隆株并在大肠杆菌中表达了完整的重组蛋白,为进一步探讨P30基因及其编码产物功能打下了基础.