传染性喉气管炎病毒

摘要： 本研究旨在了解我国鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)流行毒株的分子特性。对1株分离自国内养殖场的鸡传染性喉气管炎病毒毒株BT株进行了部分基因序列(TK、ICP4、gB、UL32)测定分析,并研究了其对2周龄SPF鸡的致病性。遗传进化分析表明,BT株核苷酸序列与国内其他流行毒株相似性在97%以上,属于同一进化分支,未出现较大变异。但其与美国强毒株1874C5和国内标准株WG株等毒株差异较大,主要集中于ICP4基因,在87—90位存在4个氨基酸的缺失(AAQD),该缺失在国内其他分离株中也存在。862—868位存在6个氨基酸的缺失(QPQEPQ),与K317、Serva、Laeyngo和LTBlen等弱毒疫苗株保持一致。将该毒株喉气管内回归接种,未观察到任何鸡死亡,仅有少部分鸡出现结膜分泌物,剖检显示喉头气管正常。提示国内ILTV流行株以较温和的形式在鸡群中流行,并呈现出独特的基因特征。

摘要： 传染性喉气管炎病毒(ILTV)编码的UL56蛋白在进化上非常保守,其功能尚不清楚。为明确UL56蛋白在鸡胚肾(CEK)细胞和气管环(TOC)两种不同感染模式中的表达特征及其在HEK293T细胞中的亚细胞定位,本研究分别构建了野生型ILTV UL56的重组质粒pUL56(WT)、其关键结构域突变体的质粒pUL56(AY)将UL56氨基酸序列中两个PY基序(PY motif)的脯氨酸(Pro,P)均突变为丙氨酸(Ala,A)及pUL56(ΔTMD)(删除UL56氨基酸序列中的跨膜域TMD),将这3个质粒分别转染DF-1细胞后均经western blot鉴定。结果显示,分别获得了约81 ku的特异性条带,表明野生型UL56及其突变体均获得了表达。以5000 EID_(50)/mL ILTV疫苗株K317分别感染CEK和TOC后不同时间,利用兔UL56多克隆抗体通过western blot检测UL56蛋白表达的变化。结果显示,UL56蛋白在两种不同感染模式中的表达特征明显不同。CEK中的UL56蛋白从感染后24 h开始表达,48 h达到高峰后逐渐下降;而TOC中UL56蛋白的表达量则持续上升,至感染后96 h达到峰值。将pUL56(WT)、pUL56(AY)和pUL56(ΔTMD)分别转染HEK293T细胞后瞬时表达UL56蛋白及其突变体,经高尔基体标志蛋白58k的抗体孵育后,通过激光共聚焦试验观察UL56蛋白的亚细胞定位。结果显示UL56蛋白主要定位于高尔基体,且亚细胞定位不受其PY motif的影响而受其TMD的影响。本研究首次揭示了ILTV感染细胞和离体组织后UL56蛋白表达的特征,并鉴定了影响其亚细胞定位的关键结构域,为后续探究该蛋白的分子作用机制和生物学功能奠定了实验基础。

摘要： 河北省沧州市某养鸡场饲养的510日龄蛋鸡发生急性上呼吸道疫病。为确定病因,采集发病鸡气管组织样品处理后接种鸡胚,利用特异性引物进行禽传染性喉气管炎病毒(ILTV)、禽传染性支气管炎病毒、新城疫病毒、J型禽白血病病毒等有关病原的PCR扩增,结果从接种病毒的鸡胚绒毛尿囊液中只扩增出ILTV gD基因片段(1133 bp),将分离的毒株命名为Hebei2021株;将分离株扩增产物连接载体构建质粒,测序后进行核苷酸序列同源性分析、氨基酸序列比对,并对分离株及参考株gD基因序列进行遗传进化分析,利用在线预测服务器预测gD蛋白二级结构及糖基化位点。结果显示:分离株与国内外参考株及疫苗株gD基因的核苷酸同源性均在99.0%以上,与参考毒株相比仅极个别氨基酸序列位点发生突变;分离株与江苏省分离株之外的国内其他分离株均在同一进化分支上,与疫苗株相比其糖基化位点并未发生突变。结果表明,此次河北省分离株gD基因较为保守,变异程度较低,当前疫苗对ILTV依然有较好的免疫保护力。本研究为禽传染性喉气管炎的流行病学调查和疫苗选择提供了参考。

摘要： 鸡传染性喉气管炎是由传染性喉气管炎病毒(禽疱疹病毒I型)引起鸡的一种急性、接触性上呼吸道疾病,属于二类传染病。其特征是呼吸困难,有伸脖张口呼吸、咳嗽并咳出含有血样的渗出物,剖检可见喉部与气管黏膜肿胀、出血和溃烂。通过调研和病例分析,发现鸡传染性喉气管炎是非常“刁钻顽劣”的,既难防又难治,是养殖场户和兽医工作者比较棘手的疾病。多年来,河北省蛋肉鸡创新团队沧州试验站和沧州市动物疫病预防控制中心展开了对该病的病例分析、疾病控制及免疫治疗等方面的联合攻关,取得了一定的防控效果。

摘要： 鸡传染性喉气管炎简称传喉,俗称鸡喉炎,是由传染性喉气管炎病毒引起的一种急性呼吸道传染病,其主要症状为病鸡呼吸困难、咳嗽,严重的会咳出含有血液的黏液,喉部和气管黏膜肿胀、出血等。具有传播快、死亡率高的特点。一、流行病学特点传喉病毒属于疱疹病毒,无血凝特性,且只有一个血清型,主要存在于病鸡的气管及其渗出物中,对外界环境抵抗力不强,55°C条件下15分钟即可失去感染性。

摘要： 为确诊山东某商品肉鸡群发病的原因,采集病死鸡的喉头、气管等组织,分别进行核酸和病原分离鉴定.结果显示,传染性喉气管炎病毒(ILTV)、传染性支气管炎病毒(IBV)和禽腺病毒4型(FAdV-4)等特异性PCR均呈阳性,而新城疫病毒(NDV)、低致病性禽流感H9N2等均为阴性.测序结果表明,ILTV分离株(PY)与疫苗株(K317)ICP4基因的核苷酸同源性为100％;而IBV分离株(PY)与疫苗株H120、4/91 N基因的同源性分别为86.4％、86.6％,显示出较大的差异.CAM途径接种鸡胚分离出腺病毒,且对SPF鸡胚具有一定的致病性.同时,从病鸡肝脏中分离到大肠杆菌,药敏试验证实对多粘菌素B、健牧茶多酚、阿莫西林棒酸、头孢噻肟敏感,采用敏感药物治疗后取得一定的临床治疗效果.综上所述,该病是一起由疫苗接种应激而引起的多病原混合感染.

摘要： 本研究以鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)王岗株为原料,通过病毒繁殖、外源病毒检验、灭活、冻干等步骤,成功制备鸡传染性喉气管炎病毒核酸检测用定性标准物质。采用荧光定量PCR方法对标准物质进行均匀性评估、稳定性监测以及由多家实验室合作定值,并对其进行了临床试用。结果表明,所研制的标准物质纯净,均匀性和稳定性良好,定性准确,无外源病毒污染,无生物传染风险;标准物质在-20°C、4°C、25°C、37°C环境下可分别稳定保存至少12个月、60 d、7 d、3 d;经7家有实验室检测资质认证的实验室合作定值,结果均为鸡传染性喉气管炎病毒阳性。本研究所制备的标准物质可用于鸡传染性喉气管炎病毒核酸检测相关实验室的质量检定和控制、仪器校准、检测方法评价等。

摘要： 鸡传染性喉气管炎(Avian Infectious Laryngotracheitis,AILT)是由疱疹病毒科、α型疱疹病毒亚科的传染性喉气管炎病毒(Infectious Laryngotracheitis Virus,ILTV)引起的一种急性、接触性上呼吸道传染病,在世界各国和地区时有发生。该病毒传播速度快,感染率高达95%~100%,感染后难以清除。虽然ILTV的致死率依据病毒毒力强弱以及鸡的个体免疫力差异从5%~70%不等,但该病毒可以感染所有年龄的蛋、肉、种用家禽,严重降低鸡的生产性能,是危害我国养禽业的主要传染病之一。

摘要： 利用同源重组将新城疫病毒(NDV)的F和HN基因、传染性喉气管炎病毒(ILTV)的gB基因以及报告基因LacZ插入鸡痘病毒(FPV)的017株的复制非必需区，其中NDV的F、HN基因、ILTV的gB基因以及报告基因LacZ是在早晚期启动子LP2EP2的控制下，大肠杆菌报告基因LacZ在晚期启动子P11的控制下。经过10轮蓝斑纯化获得了包含了NDV的F和HN基因、ILTV的gB基因以及报告基因LacZ的重组鸡痘病毒，称为rFPV-F/HN/gB/LacZ。经PCR方法证明rFPV-F/HN/gB/LacZ基因组中含有NDV的F基因、HN基因和ILTVgB基因；间接免疫荧光试验和Western-blot试验表明NDV的F、HN蛋白和ILTV gB蛋白在rFPV-F/HN/gB/LacZ感染的CEF细胞中获得表达。与亲本毒相比，重组病毒在病毒的复制和致鸡胚成纤维细胞的病变方面无显著不同。本研究证明了在鸡痘病毒载体的一个复制非必需区可以同时插入多个禽类病原的多个外源基因，为制备多价基因工程疫苗奠定了基础。

摘要： 本文根据传染性喉气管炎病毒(Infectious Laryngotracheitis Virus,ILTV)SA-2株ICP4基因序列设计并合成3对引物,以ILTV中国王岗株(WG)株DNA为模板扩增ICP4基因,并对其进行了序列测定.将ILTV WG株的ICP4基因及其推导的氨基酸序列分别与ILTV SA-2株、BHV-1、EHV-1、EHV-4、MDV-1、MDV-2、HVT、PRV、VZV、HSV-1和HSV-2的ICP4基因及其推导的氨基酸序列比较后发现,ILTV毒株之间ICP4基因相对保守,核苷酸和氨基酸水平的同源性分别为99.7﹪和99.1﹪,但与其他α-疱疹病毒的ICP4基因的同源性则较低,低于3.0﹪.对潜伏感染鸡三叉神经节中病毒基因的检测显示,在人工感染ILTV WG株后第10～60 d内均能检测到低水平的ICP4特异RNA,而gB、gC、TK则未能检出.鉴于目前国内外对α-疱疹病毒潜伏感染相关基因以及ICP4基因序列和结构功能的研究,ILTV WG株ICP4基因的克隆和序列测定,以及病毒基因在潜伏感染鸡三叉神经节中的差异表达,为进一步研究ICP4基因的功能及确定潜伏感染相关基因奠定了基础.

摘要： 传染性喉气管炎病毒(Infectious Laryngotracheitis Virus,ILTV),属于疱疹病毒科的a-疱疹病毒亚科,在分类学上被确定为Gallid herpesvirus 1.ILTV能引起感染鸡的死亡和产蛋下降而造成严重的经济损失,具有重要的兽医公共卫生意义.已有的研究证明ILTV是非常有潜力的禽呼吸道病毒疫苗载体,且gE基因又是疱疹病毒重要的毒力相关基因,将gE蛋白的主要抗原性片段表达于大肠杆菌中,为进一步研究gE基因缺失标记疫苗和病毒感染的监测奠定基础.

摘要： 用犬肾细胞(MDCK)从疑似犬传染性喉气管炎病毒感染犬的急性期血清中分离到1株病毒,经血凝试验、免疫电镜观察、中和试验、免疫荧光抗体试验、细胞培养特征观察和回归动物试验等鉴定,证明所分离的病毒为犬传染性喉气管炎病毒,命名为BJ-JB-3.

摘要： 为了检测表达鸡传染性喉气管炎病毒糖蛋白gB基因的重组鸡痘病毒(rFPV-ILTVgB)的稳定性,我们对重组病毒第6代和16代进行克隆纯化,对纯化后的病毒通过转瓶连续培养传代20代.结果发现第6代纯化病毒(rFPV-ILTVgB-C6)在传代过程中有白斑出现,说明病毒纯度不够;经过16代纯化的病毒(rFPV-ILTVgB-C16)对细胞的嗜性加强,病毒的效价进一步升高,20代传代后蓝斑率仍然为100﹪,PCR的检测进一步证明插入的外源基因能在病毒的长期传代过程中稳定地遗传.抽取病毒细胞传代过程中的5,10,15,20代次的病毒翅膀内侧无血管处皮下接种2周龄SPF鸡,20天后分为两组,分别用传染性喉气管炎病毒WG株和鸡痘病毒102株攻击,结果不同代次的重组病毒均可以使免疫鸡抗传染性喉气管炎病毒和鸡痘病毒强毒的攻击.鸡体内病毒传代试验表明,重组病毒在接种部位仅存在6天,之后就检测不到病毒,重组病毒通过SPF鸡连续传代,不存在病毒返祖的可能.由此可以得出一个结论,rFPV-ILTVg在结构上和免疫原性上是稳定的,无论是在体外传代,还是在体内均可以稳定遗传,不存在因为接种重组疫苗而给免疫鸡群带来安全威胁的可能,完全可以作为疫苗毒株进行商品化开发.

摘要： 本发明公开了一种检测鸡传染性喉气管炎病毒、鸡新城疫病毒和鸡传染性支气管炎病毒的试剂盒。本发明检测试剂盒可以准确、有效的检测鸡传染性喉气管炎病毒、鸡新城疫病毒和鸡传染性支气管炎病毒，且特异性强、灵敏度高、耗时短，检测快速，应用前景良好。

摘要： 本发明公开了一种检测鸡新城疫病毒、鸡传染性支气管炎病毒和鸡传染性喉气管炎病毒的基因芯片和试剂盒。本发明基因芯片和检测试剂盒可以准确、有效的检测鸡传染性喉气管炎病毒、鸡新城疫病毒和鸡传染性支气管炎病毒，且特异性强、灵敏度高、耗时短，检测快速，应用前景良好。

摘要： 本发明公开了一种检测鸡传染性支气管炎病毒和/或鸡传染性喉气管炎病毒的基因芯片和试剂盒。本发明基因芯片和检测试剂盒可以准确、有效的检测鸡传染性喉气管炎病毒和鸡传染性支气管炎病毒，且特异性强、灵敏度高、耗时短，检测快速，应用前景良好。

摘要： 本发明公开了新型重组多价非致病性马立克氏病病毒构建体及以及在家禽疫苗中使用它们的方法，所述构建体编码并表达传染性喉气管炎病毒蛋白抗原和传染性法氏囊病病毒蛋白抗原二者。

摘要： 本发明公开了新型的重组多价非致病性马立克氏病病毒构建体，其编码并表达传染性喉气管炎病毒和新城疫病毒蛋白二者的抗原，及其在家禽疫苗中使用的方法。

摘要： 本发明公开了一种检测鸡传染性喉气管炎病毒、鸡新城疫病毒和鸡传染性支气管炎病毒的试剂盒。本发明检测试剂盒可以准确、有效的检测鸡传染性喉气管炎病毒、鸡新城疫病毒和鸡传染性支气管炎病毒，且特异性强、灵敏度高、耗时短，检测快速，应用前景良好。

摘要： 本发明公开了一种检测鸡新城疫病毒、鸡传染性支气管炎病毒和鸡传染性喉气管炎病毒的基因芯片和试剂盒。本发明基因芯片和检测试剂盒可以准确、有效的检测鸡传染性喉气管炎病毒、鸡新城疫病毒和鸡传染性支气管炎病毒，且特异性强、灵敏度高、耗时短，检测快速，应用前景良好。

摘要： 本发明公开了一种检测鸡传染性支气管炎病毒和/或鸡传染性喉气管炎病毒的基因芯片和试剂盒。本发明基因芯片和检测试剂盒可以准确、有效的检测鸡传染性喉气管炎病毒和鸡传染性支气管炎病毒，且特异性强、灵敏度高、耗时短，检测快速，应用前景良好。

摘要： 本发明公开了新型重组多价非致病性马立克氏病病毒构建体及以及在家禽疫苗中使用它们的方法，所述构建体编码并表达传染性喉气管炎病毒蛋白抗原和传染性法氏囊病病毒蛋白抗原二者。

摘要： 本发明公开了新型的重组多价非致病性马立克氏病病毒构建体，其编码并表达传染性喉气管炎病毒和新城疫病毒蛋白二者的抗原，及其在家禽疫苗中使用的方法。