非整倍体

摘要： 目的 探讨利用培养液中游离DNA检测对应囊胚的13、15、16、18、21、22号染色体整倍性的效率.方法 本研究共纳入239枚囊胚,所有的胚胎均来源于PGT-A周期.囊胚活检的滋养层细胞采用SNP芯片检测胚胎的整倍性;培养液游离DNA采用无创胚胎染色体筛查(NICS)方法检测整倍性;采用盲法比较两者的结果.计算NICS在检测13、15、16、18、21、22号染色体整倍性的敏感性、特异性、诊断效率、阳性预测值和阴性预测值.结果 239枚囊胚中的209枚有NICS结果,NICS检出率为87.5％(209/239).NICS方法在检测13、15、16、18、21、22号染色体的特异性、效率比较高,均>90％,NICS结果的阴性预测值超过97％;但是敏感性波动较大(33％～100％),阳性预测值较低(<50％).结论 NICS方法可以检测囊胚整倍性.当NICS结果显示这些重要染色体(13、15、16、18、21、22号染色体)为整倍体时,对应囊胚该条染色体整倍性几率高;但是当NICS结果显示这些重要染色体为非整倍体时,对应胚胎并不一定为非整倍体.

摘要： 目的探究不同浓度褪黑素(MT)对控制性超排卵(COH)周期中体外成熟卵母细胞受精后所获胚胎发育的影响。方法收集COH周期的人未成熟卵母细胞行体外成熟(IVM)培养及单精子胞浆内注射(ICSI)受精,接着依次用含0、10^(-11)、10^(-9)、10^(-7)及10^(-5)mol/L MT的培养液进行分裂期和囊胚期胚胎体外培养,收集和冻存优质囊胚,最后通过array-CGH对复苏后优质囊胚进行非整倍体检测。结果10^(-9)mol/L组的囊胚率高于10^(-11)、10^(-7)、10^(-5)及0 mol/L组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01,P<0.0001,P<0.01);10^(-9)mol/L组的优质囊胚率均高于其他组,但仅与10^(-5)mol/L和0 mol/L组相比,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05);MT组的非整倍体发生率(17.6%)低于非MT组(33.3%),但差异无统计学意义。结论人类胚胎培养液中添加MT可以促进胚胎的体外发育,这种促进作用存在浓度相关性,10^(-9)mol/L是最佳的作用浓度。

摘要： 目的分析流产组织染色体整倍性对同一取卵周期冻融胚胎移植(FET)妊娠结局的影响。方法回顾性分析2012年3月至2020年1月在中山大学附属第六医院行辅助生殖(ART)治疗后妊娠患者的临床资料,检测流产组织染色体核型,收集同一取卵周期有冷冻胚胎并行FET助孕患者的临床结局数据。根据流产组织染色体结果,分为整倍体组(206例患者,292个周期)和非整倍体组(174例患者,247个周期),比较两组患者的妊娠结局。结果整倍体组取卵时年龄显著低于非整倍体组年龄(P0.05)。整倍体组与非整倍体组的临床妊娠率、流产率、活产率与累积活产率均无统计学差异(P>0.05)。流产组织染色体结果与临床妊娠率及活产率均无显著相关(P>0.05)。取卵时年龄、移植胚胎数目是影响临床妊娠率及活产率的独立危险因素(P<0.05)。结论流产组织染色体核型结果并未影响来自同一取卵周期FET的临床妊娠率、流产率、活产率及累积活产率。

摘要： 目的 使用胚胎植入前染色体非整倍体国家参考品,评价胚胎植入前染色体非整倍体检测试剂盒(半导体测序法)的性能。方法 取国家参考品进行细胞裂解及片段化,制备文库,进行文库的扩增和单细胞扩增后纯化。将纯化的单细胞扩增DNA片段化和纯化后,进行末端修复、加上接头以及PCR扩增等步骤,构建文库。将文库纯化后进行定量。使用基因测序仪BioelectronSeq 4000进行测序。使用试剂盒配套的全自动分析软件对测序数据进行信息分析,报告样本的染色体异常情况。结果 对于65个异常片段大于4 Mb的国家阳性参考品,试剂盒均能检出对应的染色体异常,检出率为100%;国家阳性参考品19-del(7)-25.3 M在7号染色体100.5 Mb-125.8 Mb位置存在片段大小约25.3 Mb的拷贝数缺失,Z-score为-28.6,其他国家阳性参考品的相应异常区域对应的染色体Z-score均>3或3或0.0001;如国家阴性参考品97-NC1在1-22号染色体和性染色体区域内均未检测出异常区域。对30%嵌合的嵌合体样本检出率为50%(3/6),相对应的70%嵌合体样本检出率为83.3%(5/6);国家嵌合体参考品110-0.3-del(4)-37.7M中,30%嵌合比例细胞在4号染色体153.1 Mb-190.8 Mb位置存在大小约37.7 Mb拷贝数缺失,其Z-score为-16.5;70%嵌合比例细胞的在15号染色体23.6 Mb-28.5 Mb位置存在大小约4.9 Mb拷贝数缺失,其Z-score为-10.5,结果显示30%嵌合和70%嵌合的细胞均正确检出。结论 胚胎植入前染色体非整倍体检测试剂盒能够符合胚胎植入前染色体非整倍体国家参考品的要求。

摘要： 目的建立一种可进行双重相对定量的基于重复序列的荧光定量聚合酶链反应(SD-qPCR)方法,实现单管同时检测X和Y染色体数目。方法建立双重相对定量SD-qPCR检测体系,并将其用于197例羊水样本的检测。根据重复序列间的相对定量2-ΔΔCt值来判断样本X和Y染色体的数目,将检测结果与染色体核型分析结果进行比较。结果筛选出了2对重复序列分子标记,分别定位于16号染色体、X染色体和1号染色体、Y染色体;197例羊水样本中,性染色体数目正常样本185例;45,X样本5例;47,XXX样本3例;47,XXY样本2例;47,XYY样本2例。双重相对定量SD-qPCR检测结果与染色体核型分析结果一致。结论建立的双重相对定量SD-qPCR方法可实现单管同时检测X和Y染色体的数目,具有检测位点多、检测结果稳定的特点,可在临床推广使用。

摘要： 目的:分析扩展性无创产前检测(NIPT-plus)用于胎儿染色体异常筛查的效果。方法:选取符合无创产前检测指征的孕妇9 136例,其中6 110例接受无创产前检测(NIPT),3 026例接受NIPT-plus,共检出265例高风险孕妇,其中248例行介入性产前诊断(低深度全基因组测序和染色体微阵列分析)以进一步明确诊断。结果:NIPT对21-三体、18-三体、13-三体的阳性预测值分别为90.24%、82.14%、14.29%,对性染色体非整倍体(SCA)的阳性预测值为26.23%,对拷贝数变异(CNV)的阳性预测值为33.33%,总阳性预测值为50.86%;NIPT-plus对以上异常的阳性预测值分别为93.33%、83.33%、0.00%、38.46%、32.26%,总阳性预测值为53.42%;两种方法比较,差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论:NIPT-plus与NIPT筛查胎儿染色体异常的效能相近,其中对21-三体、18-三体的阳性预测值较高,具有较高的临床应用价值。

摘要： 非整倍体(aneuploidy)指细胞核内染色体数不是染色体组的整倍数,包括单体、三体、四体、双三体、缺体等,与恶性肿瘤发生密切相关.非整倍体诱导剂(aneugen)指诱导子细胞染色体数目增加或减少,即导致非整倍体形成的物质.现行的遗传毒性试验指导原则要求评估化学物质诱发非整倍体的可能性,但标准的遗传毒性试验组合不包括专门评估非整倍体诱导剂的试验.微核试验结合FISH和CREST染色为染色体数目畸变提供了直接的证据;体外多终点试验和毒性追踪分析可通过MoA检测非整倍体诱导剂.目前对生殖细胞非整倍体诱导剂进行全面风险评估的数据较少,因此在未来有必要开展非整倍体诱导剂对生殖细胞影响的研究,并对其进行全面的风险评估,以补充这一领域数据的空缺.本文对目前哺乳动物体细胞和生殖细胞中非整倍体形成机制、检测方法、危害以及暴露后的风险评估进行综述.

摘要： 目的 探讨年龄、身体质量指数(body mass index,BMI)对反复种植失败人群的非整倍体的影响.方法 共纳入2017年5月至2020年6月因反复种植失败行植入前非整倍性基因测试(preimplantation genetic testing for aneuploidy,PGT-A)治疗的79个周期,按取卵年龄分0.05).进一步比较不同年龄分层分析不同BMI组间囊胚整倍体数和整倍体率间差异仍无明显统计学意义,但35～39岁年龄段体重正常组的囊胚形成率最高,差异有明显统计学意义.结论 当反复种植失败患者年龄增加至35～39岁时,整倍体率明显降低以及体重指数的异常可能影响囊胚形成率.超重以及体重过低可能不影响反复种植失败患者的非整倍体率.

摘要： 目的:分析胎儿染色体非整倍体无创检测在产前诊断中的具体效果.方法:筛选出本院2019/1-2020/1接受的孕中期实施无创检测的单胎孕妇770例为研究对象.对孕妇进行血检,实施胎儿染色体非整倍体无创检测,并对结果高风险者实施染色体核型分析,对检查结果呈(-)者实施电访随访.结果:通过无创检测发现高风险者15例,其中,21-三体10例、18-三体5例.并对这15例孕妇实施染色体核型检测,发现全部呈(+)性,对无创检测呈(-)性者755例进行随访,没有出现胎儿染色体异常问题.结论:通过无创检测技术对孕妇实施筛查,其筛查率比较高,且该项技术安全、有效,值得在一线广泛应用.

摘要： 目的:探讨叶酸缺乏对L02细胞增殖、凋亡以及纺锤体组装检查点相关蛋白基因表达的影响及其机制.方法:用不同浓度的叶酸(200 nmol/L、20 nmol/L、0 nmol/L)培养L02细胞2周后,用倒置显微镜观察L02细胞形态;流式细胞术检测细胞周期与凋亡;CCK8测定细胞增殖情况;qRT-PCR检测Mad2、Bub1、BubR1 mRNA的表达;Western blotting检测相关蛋白Mad2、Bub1、BubR1的表达.结果:与正常对照组相比,叶酸缺乏使L02细胞出现细胞体积变大、形态不规则现象;叶酸缺乏可降低L02细胞活性(P<0.01),诱导细胞发生S期阻滞(P<0.05),促进细胞凋亡(P<0.05),上调Mad2、Bub1、BubR1 mRNA及蛋白水平(P<0.01).结论:在L02细胞培养中,叶酸浓度为200 nmol/L时导致叶酸缺乏,SAC功能受损,细胞增殖异常,严重缺乏时导致细胞发生凋亡.

摘要： 染色体非整倍体是指染色体数目异常，包括三体征和单体征，主要有21、13、18-Turner综合征(45,X0)、XYY综合征及Klinefelter综合征(XXY)。在临床染色体异常的产前诊断中21、18、13及性染色体三体异常占80％以上。因此对非整倍体的检测一直是产前诊断的重要部分。荧光原位杂交技术(FISH)能有效检测出间期羊水细胞的非整倍体异常，其敏感性高、特异性强、操作简便、实验周期短，适合于非整倍体的产前诊断。

摘要： 本文对小金海棠(MalusxiaojinensisChengetJiang)(2n=4x=68)及其非整倍体(2n=5x-6=79)叶片的气孔与组织结构进行了比较研究，结果表明非整倍体保卫细胞明显增大，长度约为四倍体的156％，宽度约为四倍体的150％；保卫细胞内叶绿体数明显增多，约为四倍体的150％；气孔密度下降，约为四倍体的55％，经方差分析各项指标均达到了极显著水平。此外，非整倍体的下表皮细胞排列极不规则，且叶片有明显增厚的现象；二者的栅栏组织和海绵组织的细胞大小、形状、排列等方式均有差异。二者的叶脉内部结构也存在一定差异：四倍体叶脉中的木质部细胞较大且排列整齐，韧皮部与木质部的界限十分明显，细胞排列整齐；非整倍体叶脉中的木质部细胞较小，韧皮部的细胞排列杂乱无章。

摘要： 用遮光调节开花时期、喷施低浓度赤霉素等提高可杂交性措施、利用玉米与四倍体多年生玉米杂种FI合子发育过程中染色体配对不正常发生染色体消失得到少量非整倍体F2。对获得的几个F2植株进行形态观察、细胞学和SSR鉴定。结果表明，10株F2植株形态特征变化较大，有6株野生亲本型植株，2株中间型植株，2株玉米型植株；它们的体细胞数目为24、25、26，其中25条的频率较高：SSR标记鉴定结果表明，玉米的第2，3，4，5染色体较1，7，8，9，lO染色体易于在F2中消除，间接证明玉米×四倍体多年生玉米杂种Fl(2n=30)减数分裂单价体为玉米的第2，3，4，5染色体可能性大于玉米的其它染色体。另外，还对利用玉米与四倍体多年生玉米非整倍体染色体消除现象产生的原因和玉米与四倍体多年生玉米非整倍体染色体在玉米遗传育种研究的应用进行了讨论。

摘要： 本文报道了用FISH方法测定了接触二硫化碳,苯系物,丙烯腈工人精子的染色体数目畸变,见非整倍体率有不同程度的增加的研究结果，试验表明,工业化学物CS2、苯系物、丙烯腈可诱导接触工人精子性染色体和常染色体非整倍体率增高.本研究结果为做好劳动卫生职业病预防工作,如制订卫生标准,保护工人健康提供了有一定价值的参考资料。

摘要： 本发明提供了用于鉴定染色体异常的方法和材料，其可被用于鉴定哺乳动物患有疾病(例如，癌症或先天性畸形)。例如，本发明提供了用于评估测序数据以鉴定哺乳动物患有与一种或多种染色体异常相关的疾病(例如，癌症或先天性畸形)的方法和材料。例如，本发明提供了用于评估测序数据的方法和材料，其可被用于癌症诊断、无创产前检测(NIPT)、植入前遗传学诊断和先天性畸形的评估。

摘要： 本发明公开了一种检测非整倍体杂交子代植株的方法，包括：首先初步评估杂交子代植株的倍性水平；接着以子代植株、双亲的DNA为模板，分别进行PCR扩增；然后将扩增产物分别进行毛细管荧光电泳；最后以双亲的基因为参照，结合初步评估的植株的倍性水平，对获得的等位基因峰的数目和高度进行辨认，比较子代植株等位基因的组成情况，若位于某条染色体上的标记位点数目超出或少于预期，则确定为非整倍体植株。本发明方法可对非整倍体植株进行高通量、快速、准确检测，对开展非整倍体杂交遗传改良及染色体操作研究有重要意义。与传统的染色体核型分析方法相比，具有成本低、易操作、检测速度快、可靠性强等优点，且适用于大规模群体材料的分析。

摘要： 本发明涉及检测染色体非整倍体数目异常的PCR扩增组合物及检测试剂盒，本发明的组合物能同时对16和22号染色体上19个STR位点进行复合扩增；本发明开发的人染色体数目异常的检测试剂盒，具体为针对产前诊断和自然流产分析的常见数目异常的染色体，即16和22号染色体，应用定量荧光PCR结合毛细管电泳技术，开发出适用中国人群的STR基因分析的一种自动化，高通量，低成本的快速检测试剂盒。

摘要： 本发明公开了一种检测非整倍体杂交子代植株的方法，包括：首先初步评估杂交子代植株的倍性水平；接着以子代植株、双亲的DNA为模板，分别进行PCR扩增；然后将扩增产物分别进行毛细管荧光电泳；最后以双亲的基因为参照，结合初步评估的植株的倍性水平，对获得的等位基因峰的数目和高度进行辨认，比较子代植株等位基因的组成情况，若位于某条染色体上的标记位点数目超出或少于预期，则确定为非整倍体植株。本发明方法可对非整倍体植株进行高通量、快速、准确检测，对开展非整倍体杂交遗传改良及染色体操作研究有重要意义。与传统的染色体核型分析方法相比，具有成本低、易操作、检测速度快、可靠性强等优点，且适用于大规模群体材料的分析。

摘要： 本发明公开了一种可同时实现囊胚非整倍体检测和高着床潜能筛选的方法，该方法不仅可以检测全基因组的拷贝数变异，完成PGT‑A，还可以同时实现着床潜能的预测，并且适用于更加广泛的囊胚，极大地提高了囊胚的利用率，预测模型与临床实际情况更加接近，在PGT‑A和胚胎发育潜能预测中均具有较高的成功率，在实际临床应用中也取得良好效果，具有极高的推广价值。

摘要： 一种获取银中杨非整倍体植株的方法，它涉及植物遗传育种领域。它涉及解决三倍体植株，尤其是三倍体银中杨无法获取部分染色体的加倍的问题。本发明采取处于单核靠边期的银中杨花粉进行诱导愈伤培养，进行花粉愈伤组织继代，获得愈伤组织，诱导出芽，获得不定芽分化苗，生根培养，土壤移栽。通过以上方法获得银中杨成苗，再进行根尖的压片实验观察即可筛选银中杨非整倍体株系。本发明方法极为方便快捷的获得了银中杨非整倍体植株，具有很强的可操作性，为杨树倍性育种提供了新的见解，并且对其他植物的非整倍体诱导也有重要的借鉴意义。本发明应用于杨树培养领域。

摘要： 本发明涉及分子生物学检测领域，具体涉及一种用于检测染色体非整倍体及单基因突变的试剂盒及应用；本方法包括制备待测孕妇血浆游离DNA文库，将待测孕妇血浆游离DNA文库与探针组中的探针进行杂交，得杂交产物，从杂交产物中收集靶序列，获得测孕妇血浆游离DNA捕获文库，将测孕妇血浆游离DNA捕获文库进行测序，判断待测孕妇及待测胎儿是否携带单基因遗传病涉及的突变基因，从待测孕妇血浆游离DNA文库中的数据中提取非目标区域的数据，计算判断胎儿的第13号染色体、第18号染色体、第21号染色体、X染色体或Y染色体数目是增加、减少或正常；本发明经过杂交捕获及高通量测序实现染色体缺失或增加及50个显性基因的自发突变的一体化检测。

摘要： 本发明提供了一种胚胎植入前非整倍体遗传学检测用样本保存液及其制备方法与应用。所述胚胎植入前非整倍体遗传学检测用样本保存液组合物包括以下组分：TrisHCl；EDTA；以及KCl。本发明还提供了一种胚胎植入前非整倍体遗传学检测方法。本发明的样本保护液能够为精子和细胞样本提供一个稳定的pH值缓冲环境和盐离子平衡作用，保护生物蛋白和生物特性，尽可能地维护细胞结构的完整性，避免样本在运输过程中因反复冻融而导致的细胞核酸物质释放。

摘要： 本发明提供了一种胎儿染色体非整倍体多重数字PCR检测的引物、探针及其试剂盒和应用，包括用于检测第21、18、13号染色体非整倍体的引物和探针。本发明克服了NGS技术平台耗时长、成本高和技术操作要求高，以及常规多重数字PCR需要设计和使用多条检测探针导致的成本高，设计难度高等缺点；本发明可使用但不限于使用孕周5～8周的宫颈脱落细胞或其他含有胎儿DNA的样本，避免有创取样导致的流产情况，是一种操作简单、成本低、时效快且准确度高的试剂盒及检测方法，可用于多重数字PCR平台检测胎儿染色体拷贝数变异现象。

摘要： 本发明公开了一种基于NGS的染色体非整倍体检测方法、装置、介质和设备，涉及生物医学技术领域。包括接收肿瘤组织和正常组织的NGS测序数据；对所述NGS测序数据进行预处理，获得中间数据文件；利用所述中间数据文件，对性别和胚系SNP进行一致性评估；利用所述中间数据文件获取待测样本基因组上覆盖深度信息及SNP基因型信息；检测肿瘤样本纯度、倍性和SCNV片段；根据单个肿瘤样本和准备好的泛癌队列SCNV数据库，计算每个肿瘤样本染色体臂水平的SCNV；基于样本染色体臂水平的SCNV，计算每个肿瘤样本最终的染色体非整倍体得分。所述装置、介质和设备均基于所述的方法。本发明提高了肿瘤染色体非整倍体检测的准确性。