肝窦内皮细胞

摘要： 肝窦内皮细胞(liver sinusoidal endothelial cells,LSECs)作为肝脏窦状毛细血管通道,是肝脏最丰富的非实质细胞群。LSECs不仅在肝窦内形成屏障,且具有重要的生理和免疫学功能,包括滤过、内吞、抗原提呈和白细胞募集。现已明确,LSECs在维持肝脏内的免疫稳态及延缓急、慢性肝损伤免疫反应中起着重要作用。本综述概述了LSECs如何影响肝脏内的免疫微环境,并讨论了它们在免疫介导的慢性肝病、癌变、炎症以及衰老中的作用。

摘要： 外基质(特别是胶原)合成增加和降解减少的结果,取决于二者的动态平衡。肝纤维化由肝星状细胞(或Ito细胞)活化启动;肝细胞、血小板细胞以及肝窦内皮细胞的破坏,导致肝枯否细胞中多种细胞因子分泌,参与纤维化形成。肝星状细胞是肝脏细胞外基质的主要来源,其一旦活化,即转分化为肌成纤维细胞,伴细胞外基质合成增加、大量沉积,导致肝纤维化。

摘要： 目的探讨C型凝集素结构域家族4成员G(CLEC4G)与肿瘤血管生成标记物CD34之间的表达相关性及其与肝细胞癌(HCC)侵袭转移间的关系。方法收集2019年1月至2019年12月在株洲市中心医院经外科手术切除的40例HCC标本及相应术前血清标本分为转移组和非转移组,同时收集30例健康体检者血清标本,实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测CLEC4G、CD34的mRNA水平,免疫组织化学法(IHC)检测CLEC4G、CD34蛋白水平。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清CLEC4G的含量;采用ROC曲线分析血清CLEC4G对HCC转移的预测价值;定义高于均值水平为高表达,低于均值水平为低表达,采用χ;检验分析CLEC4G水平与患者临床资料之间的相关性。结果qRT-PCR、IHC检测结果均显示CLEC4G与CD34之间存在明显负相关关系(R=-0.89,P<0.001;R=-0.817,P<0.05);健康对照组血清CLEC4G含量为(479.4±30.7)pg/mL,HCC非转移组为(303.0±22.1)pg/mL,转移组为260.3±26.6 pg/mL,转移组与健康对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),转移组与非转移组比较,差异有统计学意义(P<0.05);血清CLEC4G对预测HCC转移具有较高的价值,AUC值为0.833(特异性:0.938;灵敏性:0.667);血清CLEC4G含量与HCC患者性别、年龄、HBV感染等无相关性,与患者肿瘤大小(P=0.023)、肿瘤分期(P=0.046)、侵袭转移(P=0.008)有关。结论CLEC4G与CD34的表达在HCC侵袭转移中呈负相关关系,CLEC4G低表达与HCC侵袭转移密切相关,对预测HCC转移有较高的临床应用价值。

摘要： 目的介绍一种稳定可靠的肝组织上和体外培养的大鼠肝窦内皮细胞(liver sinusoidal endothelial cells,LSECs)的扫描电子显微镜样本制作方法,以便于形态学方面的研究。方法采用戊二醛、单宁酸、锇酸三步固定;酒精梯度脱水;六甲基二硅氮烷置换;离子喷镀导电处理。结果扫描电子显微镜下可观察到肝组织上及体外培养的大鼠LSECs的精细结构。结论该实验方法可作为可靠的大鼠LSECs扫描电子显微镜样本的制作方法。

摘要： 肝缺血再灌注损伤(HIRI)包括缺血损伤和循环恢复后的再灌注损伤两个过程,是肝切除、肝移植等术后发生肝功能障碍甚至肝衰竭的重要原因。血红素加氧酶1(HO-1)是一种重要的内源性细胞保护基因,其能作用于肝脏的实质细胞和非实质细胞(库普弗细胞、肝窦内皮细胞等),并通过复杂的分子信号通路相互交联发挥保护作用。目前针对HIRI治疗的效果尚不理想,随着精准医疗的快速发展,了解HO-1在HIRI中的细胞保护机制对未来的肝细胞靶向治疗极为重要。

摘要： 目的 探讨芪术颗粒含药血清对四氯化碳(CCl)诱导的肝纤维化模型大鼠肝窦内皮细胞(liver sinusoidal endothelial cells,LSECs)失窗孔化及整合素αVβ3(integrin αVβ3,ITGαVβ3)-黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)-大鼠肉瘤(rat sarcoma,Ras)/丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases, MAPK)信号通路的影响与机制。方法 70只雄性Wistar大鼠,先取50只大鼠分为正常对照组、模型组及芪术颗粒高、中、低剂量组,每组10只,分别给予相应处理,制备含药血清和正常对照组血清。另20只雄性Wistar大鼠用于制备肝窦内皮细胞,其中14只大鼠采用CCl腹腔注射建立肝纤维化模型4周后,采用Masson与HE染色观察肝纤维化程度。另6只大鼠作为正常对照。分离LSECs,将LSECs分为阳性对照组、模型组、芪术低剂量组、芪术中剂量组、芪术高剂量组,其中模型组加入正常大鼠血清,其余组分别加入相应含药血清,常规培养48小时,进行相关指标检测。流式细胞仪检测大鼠肝窦内皮细胞中的血小板-内皮细胞黏附分子(platelet endothelial cell adhesion molecule-1,CD31)阳性细胞比例和肝窦内皮细胞1抗体(hepatic sinusoidal endothelial cells antibody,SE-1)阳性细胞比例;扫描电镜观察肝窦内皮细胞窗口情况;Western Blot法检测LSECs中CD31、SE-1、Ras、ITGαVβ3、FAK、MAPK、磷酸化黏着斑激酶(phosphorylation focal adhesion kinase,p-FAK)及磷酸化丝裂原活化蛋白激酶(phosphorylation mitogen-activated protein kinases,p-MAPK)蛋白表达情况。结果 (1)大鼠CCl腹腔注射造模后纤维增生显著,肝纤维化LSECs组的CD31阳性细胞比例和SE-1阳性细胞比例均显著升高。(2)模型组窗孔数少而稀疏,芪术颗粒干预后,扫描电镜观察LSECs窗孔数有所恢复,尤以芪术高剂量组明显。(3)与模型组比较,芪术各剂量组的SE-1、CD31、αVβ3表达量明显降低(P<0.05),其中芪术各剂量组的SE-1、CD31、αVβ3表达量随剂量的升高而降低,表现为一定的剂量依赖关系。与正常对照组相比,模型组LSECs中整合素αⅤβ3、p-FAK和p-MAPK蛋白的表达增加(P<0.05)。(4)经芪术颗粒含药血清治疗后,CCl诱导的肝纤维化大鼠LSECs整合素αⅤβ3、FAK、MAPK、p-FAK和p-MAPK蛋白表达降低(P<0.05)。结论 芪术颗粒含药血清可通过减轻CCl诱导的肝纤维化大鼠LSECc失窗孔化、改变LSECs表型,减少毛细血管的增值,从而发挥抗肝纤维化的作用,其机制可能与调控整合素αVβ 3-FAK-Ras/MAPK信号通路有关。

摘要： 目的:探讨人脐带间质干细胞来源的外泌体(mesenchymal stem cell derived exosomes,MSC-Ex)对肝窦内皮细胞(liver sinusoidal endothelial cell,LSEC)毛细血管样改变的影响。方法:从人脐带组织中分离培养间质干细胞,采用超速离心法提取培养上清液中的MSC-Ex。采用透射电镜、纳米颗粒跟踪分析仪以及蛋白质免疫印迹对MSC-Ex进行形态和表征的鉴定。用TNF-α诱导建立LSEC血管化模型,并加入DIO荧光染料标记的MSC-Ex共培养,观察LSEC对MSC-Ex的摄取能力。采用qRT-PCR检测LSEC中促血管生成素-2(angiopoietin-2,Ang-2)、CD34的mRNA相对表达,采用蛋白质免疫印迹检测LSEC中Ang-2、CD34蛋白表达,采用小管形成实验检测LSEC的管腔形成能力。构建蛋氨酸、胆碱缺乏饮食(methionine and choline deficiency diet,MCD)诱导的ICR小鼠肝纤维化模型,然后尾静脉分别注射MSC-Ex(10 mg/kg)和100μL PBS,每3 d注射1次,共注射5次。采用天狼猩红染色及免疫组织化学染色分别观察肝组织胶原沉积及检测Ang-2蛋白表达。结果:蛋白质免疫印迹显示MSC-Ex高表达外泌体特征性标志物Alix、TSG101、CD63、CD9,透射电镜显示MSC-Ex为直径约100 nm的盘状囊泡,纳米颗粒跟踪分析仪显示其颗粒浓度约为3.4×10^(11)/mL。MSC-Ex可被LSEC摄取,并显著抑制TNF-α诱导的LSEC的管腔形成及Ang-2、血管内皮细胞标志CD34表达。天狼猩红染色和免疫组织化学染色显示,MSC-Ex可限制纤维化肝组织的胶原沉积和Ang-2蛋白表达。结论:人脐带MSC-Ex可在体内外抑制LSEC毛细血管样改变。

摘要： 目的 基于蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路探讨黄芪汤含药血清对血管内皮生长因子(VEGF)诱导的大鼠肝窦内皮细胞(LSEC)增殖、迁移和成管能力的影响。方法 制备黄芪汤含药血清,体外分离、培养SD大鼠LSEC,将大鼠LSEC随机分为空白组,VEGF组,血清对照组,低、中、高剂量黄芪汤含药血清组,利用噻唑蓝(MTT)比色法、Transwell实验、成管实验分别检测各组LSEC增殖、迁移和成管能力,通过Western Blot法检测血小板-内皮细胞黏附分子-1(CD31)、内皮素-1(ET-1)、内皮性一氧化氮合酶(eNOS)和AKT/mTOR信号通路中AKT、磷酸化(p)-AKT、mTOR、磷酸化(p)-mTOR蛋白表达水平。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用Tukey’s检验。结果 与空白组相比,VEGF组、血清对照组能够促进大鼠LSEC增殖、迁移和血管新生(P值均0.05)。与血清组比较,黄芪汤中、高剂量组能显著抑制VEGF诱导的大鼠LSEC增殖、迁移和血管新生(P值均<0.05);Western Blot结果显示,CD31、ET-1、eNOS和AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达均显著降低(P值均<0.05)。结论 较高剂量黄芪汤含药血清能抑制VEGF诱导的大鼠LSEC增殖、迁移和成管能力,其作用机制可能与调控AKT/mTOR信号通路有关。

摘要： cqvip:细胞自噬对于维持细胞、组织及器官的稳态具有重要作用,并与多种病理生理过程密切相关。肝脏接受着肝门静脉的灌注,容易受到各种有害物质的损伤,而细胞自噬在降低肝脏损伤、调节肝脏内环境稳态中发挥重要作用[1]。肝纤维化是由慢性肝损伤导致的细胞外基质(extracellular matrix,ECM)蓄积的过程,造成这一病理改变的常见诱因有病毒性肝炎、酒精性肝病、非酒精性脂肪性肝炎和自身免疫性疾病等[2],多种细胞包括肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)、浸润的免疫细胞、肝实质细胞等都参与了肝纤维化过程。

摘要： 肝脏是人体重要的代谢器官,具有独特的再生能力,然而急性肝功能衰竭及肝脏先天性代谢疾病等终末期肝病的预后极差,如何促进肝脏再生成为研究热点.肝再生是一个非常复杂和精确的调控过程,涉及多种细胞间的相互协调,目前有研究结果证实血小板对肝再生过程具有重要作用,本文对此做一综述并探讨进一步研究的方向,以期对肝病的治疗和药物研发提供基础依据,提高患者生存质量.

摘要： 目的：探讨健脾软肝方对CCL4诱导的肝纤维化大鼠肝窦内皮细胞失窗孔的影响. 方法：60只雄性Wistar大鼠随机分为6组,采用2mL/kg的30％CCL4与70％橄榄油混合液腹腔注射,2次/周,复制肝纤维化模型.造模同时给予药物干预,正常组和模型组均给予生理盐水灌胃,阳性对照组用扶正化瘀方灌胃,健脾软肝方高、中、低剂量组分别给予不同剂量的健脾软肝方灌胃.4周后,采用HE染色和Mallory染色观察肝组织纤维化程度,透射电镜观察肝窦内皮细胞窗孔变化,ELISA法检测血清HA含量、Real-time PCR及免疫组化ABC法检测CD31、CD44mRNA及蛋白表达. 结果：健脾软肝方干预后,光镜显示肝纤维化程度比模型组减轻;电镜显示大鼠肝窦内皮细胞窗孔直径变大、数目增多;HA含量降低(P＜0.01),且高、中、低剂量组血清HA的降低随剂量的升高而变化,表现为一定的剂量依赖关系;CD44阳性及mRNA表达增高(P＜0.05),CD31阳性及mRNA表达降低(P＜0.05),且表达量随剂量的升高而逐渐降低,呈一定的剂量依赖关系. 结论：健脾软肝方可减轻肝纤维化大鼠LSEC失窗孔的作用.

摘要： 目的：基于肝脏血管新生病理,设VEGF受体酪氨酸激酶抑制剂索拉非尼对照,探讨五味子酯甲对肝窦内皮细胞细胞增殖及血管新生的影响.rn 方法：MTT法检测五味子酯甲作用于SK-HEP-1细胞株的最大无毒浓度.SK-HEP-1细胞分为空白组、模型组、索拉非尼组、五味子酯甲2μM、20μM组,VEGF诱导SK-HEP-1细胞增殖,EdU法检测细胞增殖;荧光探针法检测胞内NO水平和NOS活力.通过细胞迁移、Matrigel管腔形成实验检测细胞管腔形成情况;大鼠主动脉环实验检测血管生长变化;转基因斑马鱼实验观察斑马鱼荧光血管量、功能血管数及碱性磷酸酶变化.rn 结果：与空白对照组比较,模型组细胞增殖显著增加,NO水平和NOS活力显著提高;在20μmol/L最大无毒浓度范围内,与模型组比较,索拉非尼和2μM、20μM五味子酯甲能显著抑制VEGF诱导的SK-HEP-1细胞增殖,显著降低NO水平和NOS活力.20μM五味子酯甲能够显著抑制VEGF诱导的SK-HEP-1细胞迁移和管腔形成,抑制大鼠主动脉环血管生长;对转基因斑马鱼节间血管具有显著抑制作用.rn 结论：五味子酯甲能够抑制内皮细胞增殖,具有抑制血管新生的作用.

摘要： 肝窦内皮细胞(LSEC)是肝常驻抗原提呈细胞,可摄取门静脉血中的抗原物质,诱导肝乃至全身的特异性免疫耐受.肿瘤来源的外泌体含肿瘤特异或相关性抗原,具有刺激免疫应答和诱导免疫耐受的双重作用.由于外泌体尺寸很小,以往研究缺少用成像的方法直接观察外泌体与LSEC的相互作用,对此,本研究采用共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)对外泌体与LSEC间的作用进行显微成像,直观研究体外和体内环境下LSEC对肿瘤来源外泌体的摄取.最终成功分离出小鼠LSEC，从小鼠结肠癌CT26.WT细胞培养液中分离出外泌体。建立了荧光染料DiI标记外泌体的方法。在体外直接观察到LSEC对外泌体的快速摄取。通过自小鼠尾静脉注射Exo-DiI，在CLSM下观察到LSEC对肝血窦中外泌体的快速摄取。成功构建了CT26-DsRed/EGFP-Ex。转基因细胞，建立了小鼠原位荷CT26-DsRed/EGFP-Ex。结肠癌模型，应用CLSM直接观察到了肿瘤释放外泌体到肿瘤间质，进入门静脉血中，循门脉血流到达肝脏，被LSEC所摄取。本研究成果为进一步研究LSEC通过摄取肿瘤来源外泌体诱导肿瘤免疫耐受以及促进结肠癌肝转移奠定了基础。

摘要： 肝窦内皮细胞(Liver sinusoidal endothelial cell LSEC)作为一种特殊的内皮细胞,其在细胞结构及生理功能等方面有别于其他内皮细胞,并与肝脏许多生理病理过程有密切关系,本文从中西医角度出发对肝窦内皮细胞的研究进行概述.肝窦内皮细胞作为肝脏非实质细胞的重要组成部分，具有特殊的细胞结构、生理功能，在肝脏生理及病理生理过程中发挥着重要作用，西医对其的研究较多，中医较少。随着现代医学技术的发展，肝窦内皮细胞的生理作用会进一步被阐述。

摘要： 肝窦内皮细胞具有开放的、没有横膈膜的窗孔,内皮下没有基底膜,这种结构有利于调控肝细胞与肝窦血液的物质交换.肝窦内皮细胞能分泌内皮素-1和一氧化氮,通过窗孔的变化,对肝脏微循环进行调节.而且其能分泌大量的形成基底膜的成分,在肝窦毛细血管化的过程中起主导作用.肝窦内皮细胞表型标志发生变化,Ⅶ因子相关抗原、CD44等表达增强,也是肝窦毛细血管化的重要标志,笔者对肝窦内皮细胞的结构及其在肝窦毛细血管化中的功能和表型变化进行综述.

摘要： 在肝脏非实质细胞中，肝窦内皮细胞是数量最多的一种细胞，约占肝非实质细胞总数的40-50％。肝窦内皮细胞有着不同于普通内皮细胞的独特形态来适应肝脏代谢的特殊要求。由于肝窦内皮细胞无论在形态、功能还是在细胞表面分子的表达上都与普通内皮细胞不同，因此原代分离培养肝窦内皮细胞是研究其在肝脏各种病理生理环境中作用机制的不可替代的手段。本实验比较了贴壁纯化法或淘洗纯化法对肝脏窦内皮细胞提取纯化的效果。

摘要： 在肝脏非实质细胞中，肝窦内皮细胞是数量最多的一种细胞，约占肝非实质细胞总数的40-50％。肝窦内皮细胞有着不同于普通内皮细胞的独特形态来适应肝脏代谢的特殊要求。由于肝窦内皮细胞无论在形态、功能还是在细胞表面分子的表达上都与普通内皮细胞不同，因此原代分离培养肝窦内皮细胞是研究其在肝脏各种病理生理环境中作用机制的不可替代的手段。本实验比较了贴壁纯化法或淘洗纯化法对肝脏窦内皮细胞提取纯化的效果。

摘要： 目的:探讨黄芪配伍当归(QG)对气虚血瘀模型大鼠心肺血管内皮和肝窦内皮细胞CD54表达的影响.rn 方法:用饥饿+游泳制造"气虚血瘀"大鼠模型,灌胃给药15d后测定心肺血管内皮和肝窦内皮细胞CD54的表达.rn 结果:气虚血瘀模型大鼠心肺血管内皮和肝窦内皮细胞CD54的表达明显增高,QG能显著降低其过度表达.rn 结论:QG益气活血作用与降低心肺血管内皮和肝窦内皮细胞CD54的过度表达有关.

摘要： 肝主疏泄与解剖学之脑和肝脏功能相关,其调畅气机的功能与肝脏调节物质代谢(能量)、流动以及分布有关,肝窦内皮细胞窗孔构成的肝筛结构可能是肝输布、宣泄气机、精微、毒物的超微结构.慢性肝病如慢性肝炎、肝纤维化和脂肪肝的病机多为肝失疏泄、由气及血、络脉瘀阻,表现为肝窦内皮细胞窗孔数量、结构及功能异常,引起微循环障碍,因此,肝窦内皮功能障碍可能是肝失疏泄之络病的病机关键,是肝主疏泄之络病理论的新的假说.

摘要： 目的：探讨虫草菌丝提取物(CME)对二甲基亚硝胺(DMN)大鼠肝硬化肝窦毛细血管化作用的机制。方法：采用DMN4周12次腹腔注射制作大鼠肝纤维化模型,分别于造模后3d、2周、4周作为观察时相点;透射电镜观察肝组织超微结构,免疫组织化学法观察肝窦壁CD44、Ⅷ因子相关抗原(vWF)、Ⅳ型胶原(ColⅣ),酶谱法测定MMP-2和MMP-9活性;放射免疫法测定血清透明质酸(HA)含量。造模同时给予CME10mlkg-1灌胃,每日1次,共4周。结果：DMN造模后第3d,MMP-2、MMP-9活性显著增加,肝窦壁ColⅣ沉积显著减少、CD44.染色减弱、vWF阳性染色明显增强,SECs窗孔减少,血清HA含量显著升高(P<0.05),4周时可见SECs失窗孔和SECs下基底膜形成;CME早期(3d,2周)能够显著降低MMP-2、MMP-9活性(P<0.05),肝窦内皮(SECs)失窗孔和SECs下基底膜形成减轻;CME灌胃2、4周后,大鼠血清HA水平下降(P<0.05),肝窦壁CD44表达增强、vWF阳性染色减弱(P<0.05),SECs窗孔增多,SECs基底膜形成减轻。结论：早期MMP-9、MMP-2活性升高,降解肝窦内皮细胞下正常分布的ColⅣ,是肝窦毛细血管化形成的重要因素;CME早期通过降低MMP-2、MMP-9活性,抑制肝窦毛细血管化的启动：CME能够减轻DMN大鼠肝窦内皮细胞损伤和表型改变,抑制肝窦毛细血管化形成。

摘要： 本发明公开了靶向肝窦内皮细胞的和厚朴酚纳米颗粒在治疗肝纤维化中的应用。本发明提供了靶向肝窦内皮细胞的Honokiol纳米颗粒的如下用途：1)制备治疗肝纤维化疾病产品；2)制备抑制肝纤维化产品；3)制备促进或维持或恢复肝窦内皮细胞处于分化状态产品；4)制备提高肝窦内皮细胞促进肝脏修复作用产品；5)制备提高肝窦内皮细胞中HGF蛋白表达和/或Wnt2蛋白表达产品；6)制备抑制肝纤维化结节形成或促进肝纤维化结节消除产品。利用由cRGD标记的PEG纳米颗粒包装Honokiol抑制肝纤维化。

摘要： 本发明公开了一种共培养肝细胞系与肝窦内皮细胞系的方法及其应用。其特征在于：将肝窦内皮细胞系进行缺氧培养一定时间，然后收获肝窦内皮细胞系，与肝细胞系以一定比例进行共培养。与肝窦内皮细胞系共培养可部分模拟体内肝脏环境，有利于肝细胞功能，并且通过缺氧激活肝窦内皮细胞后，其促进肝细胞功能的能力增强，且不需使用外源的内皮细胞激活剂，减少外源物质的引入，有利于后续的细胞应用。本发明还提供这种共培养方法在包括药物筛选和生物人工肝制备等领域的应用。

摘要： 本发明提出了胎肝窦内皮细胞在构建造血干细胞微环境中的用途。胎肝窦内皮细胞能够为造血干细胞构建微环境，支持造血干细胞的体外扩增，以及促进多潜能干细胞向HSCs分化或直接重编程体细胞获得HSCs。

摘要： 本发明公开了一种调控肝窦内皮细胞的纳米载体及其制备方法和在治疗肝脏相关疾病领域中的应用。负载肝窦内皮细胞调节药物的纳米制剂，通过调控患病肝脏的微血管、微环境，在肝脏相关疾病（如肝纤维化）治疗中促进维持或修复肝窦内皮细胞的窗孔和功能，提高肝窦内皮细胞通透性，从而达到增加药物渗透和蓄积，提高疗效的目的。本发明首次利用通过预防或修复肝窦毛细血管化，来克服慢性肝脏疾病病程中肝窦毛细血管化造成的物质交换屏障，促进治疗药物的渗透和蓄积，为治疗药物的高效递送提供了一种新的途径和策略。该调控肝窦内皮细胞的纳米载体也可用于其他伴有肝窦毛细血管化症状的肝脏疾病，如各类慢性肝炎、肝硬化、肝癌等。

摘要： 本发明公开了一种小鼠肝窦内皮细胞的提取方法，该方法利用氯化钆注射清除枯否细胞，结合两步灌流、差速离心、percoll离心、差速贴壁的来实现敢斗内皮细胞的分离。小鼠肝窦内皮细胞的提取方法，简单易行、细胞纯度高、获得率高，并在体外培养保留完整的结构和功能活性，可用于生化及免疫学。此外，本发明方法使用实验室常规仪器，成本低可在大部分实验室推广。

摘要： 本发明公开了靶向肝窦内皮细胞的和厚朴酚纳米颗粒在治疗肝纤维化中的应用。本发明提供了靶向肝窦内皮细胞的Honokiol纳米颗粒的如下用途：1)制备治疗肝纤维化疾病产品；2)制备抑制肝纤维化产品；3)制备促进或维持或恢复肝窦内皮细胞处于分化状态产品；4)制备提高肝窦内皮细胞促进肝脏修复作用产品；5)制备提高肝窦内皮细胞中HGF蛋白表达和/或Wnt2蛋白表达产品；6)制备抑制肝纤维化结节形成或促进肝纤维化结节消除产品。利用由cRGD标记的PEG纳米颗粒包装Honokiol抑制肝纤维化。

摘要： 本发明公开了一种大鼠肝窦内皮细胞的分离培养方法，在分离步骤开创性地使用活检针营造了一个消化腔，形成了一个完全在肝脏内部的消化腔，消化稳定高效，且污染率低；本发明杜绝了胰酶的使用，改为使用多种酶的组合，最大化的保护的细胞；同时在消化液中加入了内皮因子、肝素等不利于肝脏实质细胞生长但有利肝窦内皮细胞生长的组分，在细胞分离的步骤即开始了实质细胞和肝窦内皮细胞的筛选；同时本发明的分离培养方法自始至终均无需吹打，最大限度地保护了肝窦内皮细胞的活力，使得培养得到的细胞活率高，活性好；本发明具有较大的推广意义，为以肝窦内皮细胞培养为基础的相关研究提供了良好的细胞培养解决方案。

摘要： 本发明公开了一种小鼠肝窦内皮细胞的提取方法，该方法利用氯化钆注射清除枯否细胞，结合两步灌流、差速离心、percoll离心、差速贴壁的来实现敢斗内皮细胞的分离。小鼠肝窦内皮细胞的提取方法，简单易行、细胞纯度高、获得率高，并在体外培养保留完整的结构和功能活性，可用于生化及免疫学。此外，本发明方法使用实验室常规仪器，成本低可在大部分实验室推广。

摘要： 本实用新型涉及一种肝窦内皮细胞分离培养试剂盒，包括盒体、盖罩、第一垫块、第二垫块和生物冰袋，盒体后侧与盖罩后侧铰接，盒体内底部设有第一垫块，第一垫块顶部设有第一凹槽，第二垫块设在第一垫块顶部；第二垫块底部设有第二凹槽，第一凹槽和第二凹槽内设有生物冰袋，第二垫块顶部设有试剂瓶孔，试剂瓶孔与第二凹槽之间设有通孔。本实用新型的有益效果是：使用时，通过生物冰袋，可对盒体内的试剂进行冷藏，冷藏效果好，可延长试剂的保存时间，同时也可方便对试剂盒进行拆装。

摘要： 本实用新型涉及一种肝窦内皮细胞分离培养试剂盒，包括盒体和设在盒体内的四个无菌密封瓶，所述四个无菌密封瓶内分别装有用于肝窦内皮细胞分离培养的清洗浓缩液、消化液、分离液、培养液。该试剂盒包含分离培养肝窦内皮细胞中所需的所有试剂，无需额外配制试剂，实验方便快捷；所有的试剂瓶均采用无菌密封瓶，无需灭菌，操作简单。