离体保存

摘要： 为延长朱顶红离体保存时间、提高存活率,研究了甘露醇、蔗糖、矮壮素、脱落酸对朱顶红试管苗离体保存及恢复生长的影响。结果表明:在培养室温度(15±2)°C、光照强度2500~3000 lx、光照时间10 h/d的条件下,MS培养基中添加20~40 g/L甘露醇能有效抑制朱顶红植株生长,保存5个月后恢复培养2个月的死亡率为0%~40%;75 g/L蔗糖能抑制朱顶红生长发育,离体保存5个月、恢复生长2个月后存活率达100%;0.5~4.0 mg/L ABA能明显抑制朱顶红植株生长,但恢复生长培养后死亡率较其他几种添加物高,恢复生长培养2个月后死亡率最高达50%。10~50 mg/L矮壮素的添加对朱顶红生长抑制效果较差。

摘要： 以金钻蔓绿绒组培苗为试验材料,研究了不同蔗糖及甘露醇质量浓度对金钻蔓绿绒组培苗离体保存及恢复生长的影响。结果表明:最适合金钻蔓绿绒组培苗离体保存的培养基为MS+15 g/L蔗糖+30 g/L甘露醇。离体保存6个月的金钻蔓绿绒组培苗恢复生长60 d后,其形态指标、生理指标和生根情况与对照组数值接近,表明组培苗离体保存后在正常条件下能恢复生长。

摘要： 为研究渗透压在马铃薯种质资源试管苗长期保存中的作用,延长试管苗保存的时间,以早熟品种富金的脱毒试管苗为材料,通过设计5个不同浓度琼脂梯度,对脱毒试管苗保存情况进行试验,以筛选出最佳琼脂浓度。结果表明,富金试管苗在17°C离体低温保存条件下,MS培养基中琼脂浓度为18 g/L时,试管苗保存时间有明显延长效果,最长能保存4~5个月。

摘要： 我国丰富的药用植物资源是中医药事业蓬勃发展的物质基础,是人民生命健康的重要保障.但是,由于需求量增加以及自然环境恶化,一些重要的药用植物品种资源日益稀少,有些品种甚至处于极度濒危的境地,而这些珍稀濒危品种常具有独特的疗效,是中药资源的重要组成部分,亟待采取相应措施进行资源的保存恢复.离体保存是一项基于植物组织培养技术发展起来的植物资源新型保存手段,具有诸多优势,已成为实现珍稀濒危药用植物资源保存恢复与可持续利用的主要途径,对中医药发展起到了重要支撑作用.鉴于此,依据资源濒危程度,系统梳理了珍稀濒危药用植物资源的主要种类;从基本原理,操作流程,关键技术环节以及应用实例等方面,阐述了组织培养保存,超低温保存,基因资源保存等离体保存技术的最新研究进展;同时,总结分析了珍稀濒危药用植物资源离体保存存在的问题,并对今后研究方向进行了展望,以期为珍稀濒危药用植物资源保护、扩大及开发利用提供一定借鉴.

摘要： 为探索缓慢生长法离体保存技术在韭菜中的应用,以航研998为试验材料,利用植物组织培养法,在MS+6-BA 0.5 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1的基本培养基中添加不同浓度的山梨醇、琼脂、蔗糖、矮壮素(CCC)和脱落酸(ABA)对韭菜组培苗进行保存,每隔20 d调查1次组培苗的不定芽数、株高和存活率.结果表明,20 g·L-1的山梨醇、70 g·L-1的蔗糖、250 mg·L-1的CCC和1.0 mg·L-1的ABA均能有效抑制韭菜组培苗的生长,且在保存120 d后保持较高的成活率和良好的生长表现.研究结果为韭菜缓慢生长法离体保存体系的建立提供了理论依据.

摘要： 以‘红阳’和‘米良1号’猕猴桃组培苗为材料,研究培养基中添加不同浓度的蔗糖对猕猴桃组培苗保存的影响。结果表明,培养基中添加20 g·L^(-1)的蔗糖,2种猕猴桃离体保存140 d后的成活率最高,分别为87.50%和96.65%,说明适宜浓度的蔗糖有利于延长猕猴桃组培苗的保存;但不同品种间存在一定差异,随着培养时间的延长,‘红阳’猕猴桃组培苗死亡率高于‘米良1号’猕猴桃,要提早转接,更换新的继代培养基。

摘要： 以'红阳'和'米良1号'猕猴桃组培苗为材料,研究培养基中添加不同浓度的蔗糖对猕猴桃组培苗保存的影响.结果表明,培养基中添加20 g·L-1的蔗糖,2种猕猴桃离体保存140 d后的成活率最高,分别为87.50％和96.65％,说明适宜浓度的蔗糖有利于延长猕猴桃组培苗的保存;但不同品种间存在一定差异,随着培养时间的延长,'红阳'猕猴桃组培苗死亡率高于'米良1号'猕猴桃,要提早转接,更换新的继代培养基.

摘要： 以江西铅山红芽芋超低温疗法脱毒苗为试验材料,从温度、培养基养分水平、培养基物理状态、渗透压调节剂、生长抑制剂、活性炭等方面对铅山红芽芋超低温疗法脱毒苗进行离体保存,从DNA分子标记、气孔参数、光合参数和叶绿素荧光参数等方面衡量江西铅山红芽芋超低温疗法脱毒苗离体保存后的遗传稳定性,并对江西铅山红芽芋超低温疗法脱毒苗离体保存后相关基因表达水平进行qRT-PCR检测.结果表明,5°C低温、1 mg/L多效唑(PP333)、18 g/L蔗糖、0.6 g/L琼脂、1/8 MS、2 g/L活性炭、20 g/L甘露醇、0.5 mg/L脱落酸均有利于江西铅山红芽芋超低温疗法脱毒苗的离体保存,并且可以显著提高其离体保存过程中蔗糖合成酶、超氧化物歧化酶[Cu-Zn]、过氧化物酶、多胺氧化酶、衰老相关半胱氨酸蛋白酶、L-抗坏血酸氧化酶等基因的表达水平.与常温继代苗对照组相比,江西铅山红芽芋超低温疗法脱毒苗离体保存后复苏苗经SSR检测,电泳峰型一致,遗传距离为0,遗传相似系数为1,可以聚为一类;铅山红芽芋超低温疗法脱毒苗离体保存后复苏苗和常温继代苗对照组的气孔长径、短径、周长、气孔数量、气孔密度、净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、细胞间CO2浓度(Ci)、蒸腾速率(Tr)、实际光化学效率ΦPSⅡ、捕获激发能效率Fv′/Fm′、光化学猝灭系数(qP)、非光化学猝灭系数NPQ均无显著差异.由此可见,铅山红芽芋超低温疗法脱毒苗离体保存可以保证其种质遗传稳定性.

摘要： [目的]在优化植物激素的基础上,通过添加渗透调节剂和生长抑制剂,探索青钱柳愈伤组织离体保存的方法,为青钱柳种质资源的长期离体保存提供理论依据和技术支撑.[方法]以青钱柳愈伤组织为试验材料,采用二因素完全随机法优化培养基内6-BA(0.4、0.6、0.8、1.0mg·L-1) +IBA(0.2、0.4 mg·L-1)浓度组合;在此基础上,采用单因素完全随机法,针对不同蔗糖浓度(30、45、50、55、60 g·L-1)及其保存时间(60、90、120、150、180天)、不同渗透调节剂浓度(甘露醇:0、10、20、30、40、50 g·L-1;肌醇:0、10、20、30、40、50 g·L-1)及不同生长抑制剂浓度(多效唑(PP333):0、2、4、6、8、10 mg· L-1;丁酰肼(B9):0、2、4、6、8、10 mg·L-1)开展愈伤组织离体保存试验.在保存过程中,结合流式细胞术和SSR分子标记技术,检测不同保存代数下愈伤组织的细胞倍性和遗传稳定性,并对保存第15代的愈伤组织进行恢复生长试验.[结果]通过对6-BA+IBA浓度组合、渗透调节剂、生长抑制剂的筛选,改良MS+0.8 mg·L-16-BA+0.2 mg·L-1IBA+45 g·L-1蔗糖+6.0 g·L-1琼脂粉(pH5.8)是适宜的青钱柳愈伤组织离体保存培养基,该培养基可有效地限制青钱柳愈伤组织生长;90天为适宜的继代保存时间,愈伤组织存活率为100％;愈伤组织呈黄绿色,颗粒状、颗粒小且疏松.与对照组(叶片)相比,不同保存代数下愈伤组织的细胞倍性没有发生改变,遗传稳定性好.保存的愈伤组织均能恢复生长,在形态、生活力和生长势方面表现好,并能够分化.[结论]适宜的青钱柳愈伤组织离体保存的培养基为改良MS基本培养基+0.8 mg·L-16-BA+0.2 mg·L-1IBA+45g·L-1蔗糖+6.0 g·L-1琼脂粉,pH5.8,在(20±1)°C下每隔90天转接1次,是青钱柳愈伤组织离体保存继代的最佳途径;保存的愈伤组织遗传稳定性好、未发生变异.甘露醇、肌醇、多效唑和丁酰肼等添加剂均不利于青钱柳愈伤组织的离体保存.

摘要： 目的:建立一种能延长短瓣石竹种质资源离体保存时间的方法.方法:以短瓣石竹无菌苗为材料,研究了无机盐、PP333、CCC、ABA、甘露醇及蔗糖对短瓣石竹无菌苗离体保存的影响,并进行再生苗与继代苗形态指标的比较.结果:短瓣石竹无菌苗在3种无机盐(MS、1/2 MS、1/4 MS)浓度培养基上的离体保存时间无显著差异,培养90 d后植株叶片开始逐渐枯黄掉落,存活率达到80％;添加蔗糖浓度为25～30 g/L的无菌苗长势较好,植株健壮,叶片嫩绿,保存时间长达100 d;四种植物生长抑制剂均能抑制植株的生长,具有壮苗的作用,其中PP333的壮苗效果最佳,且植株长势良好.结论:在1/2 MS+1.0～1.5 mg/L PP333+25 g/L蔗糖培养基上,无菌苗能保存120 d,植株恢复培养生长正常,成活率达90％以上,适合短瓣石竹无菌苗的离体保存.

摘要： 本文通过调节蔗糖浓度、培养基、生长调节剂、温度、光照等的条件和方法,对丁香属植物缓慢生长离体保存进行了初步研究.结果表明:添加20g/L山梨醇,40g/L蔗糖,1.0mg/L的ABA,采用1/2MS培养基,低温条件下都能够有效抑制丁香组培苗的生长,存活率都在75％以上;脱落酸 抑制效果最明显;在保存150天中,综合表现最好为40g/L蔗糖和1/2MS培养基保存.

摘要： 以鄂马铃薯5号脱毒试管苗为试验材料,MS为基本培养基,添加不同浓度的植物生长调节剂CCC(矮壮素),比较其对试管苗离体保存的影响。结果表明:CCC可抑制马铃薯试管苗的生长,提高其成活率,其中马铃薯种质离体保存最佳的CCC浓度为500 mg·L-1,保存时间可达9个月。

摘要： 中国古老月季在月季品种中是一类十分重要的种质资源.目前,保留至今的中国古老品种已经非常有限,亟待对留存的品种进行保护与保存研究.本文对中国古老月季品种'四面镜'常温离体保存技术进行了初步研究,结果发现:中国古老月季'四面镜'其最佳的离体组织培养配方为:①诱导培养基1/2MS+6-BA1.5mg/L+IAA01mg/L;②继代增殖培养基1/2MS+6-BA1.0mg/L+IAA0.01mg/L;③离体保存最佳的基本培养基配方为1/4MS+6-BA0.5mg/L+IAA0.1mg/L,以上培养基均附加蔗糖30g/L+琼脂5g/L,pH6.2.研究了影响离体保存的部分主要因子,发现1/4MS基本培养基较1/2NS的保存效果好,温度15°C时,保存时间较25°C延长约60天.在最佳离体保存基本培养基中附加适宜浓度的不同生长抑制物后,保存时间均可大幅延长,其最佳的附加浓度分别为甘露醇10g/L,山梨醇10g/L,多效唑5mg/L,B950mg/L.经过离体保存7个月恢复培养的试管苗在表型性状及腋芽分化率、茎高、增殖系数等指标上与正常培养的试管苗无明显差异.

摘要： 以蝴蝶兰无菌苗为离体保存材料,研究了培养基中添加不同浓度甘露醇对蝴蝶兰试管苗保存的影响.结果表明:在培养温度24+3°C,保存前3个月光照强度2000～2500lx,3个月后光照强度500～1000lx,光照时间12 h·d-1的培养条件下,花宝1号(Hyponex No.1)3.0g·L-1+AC 0.5g·L-1+蔗糖20g·L-1培养基中添加15g·L-1甘露醇能使蝴蝶兰试管苗连续保存18个月,存活率达87.5％,比对照存活率68.8％,提高了18.7％;保存18个月的试管苗在增殖培养基上能恢复生长,与正常生长的继代苗相比,形态上没有发生变异.

摘要： 百合种质资源保护和收集保存是其种质资源创新的关键,但是目前相关研究开展的非常有限.本文从组织培养(限制生长)保存和超低温保存两方面概述了目前国内外百合种及品种的离体保存中所用到的具体技术及措施,分析了百合种质资源离体保存中存在的问题,以期进一步扩大百合离体保存范围,并服务于后期育种工作.

摘要： 以菊花(Dendranthema×grandiflorum)'火炬'(Huoju)和'神马'(Jinba)品种为试材,研究了不同植物生长抑制物质对试管苗离体保存的影响,并对保存材料再生后代的遗传稳定性进行了探讨.结果表明,添加适宜浓度的生长抑制物质有利于菊花种质的离体保存,1250～2000mg·L-1 CCC、200～600mg·L-1 B9、35～140mg·L-1SA均能使'火炬'和'神马'试管苗延长保存至10个月以上,尤以1750mg·L-1CCC、200mg·L-1B9、140mg·L-1 SA的保存效果较为理想,试管苗保存10个月后生长健壮,存活率分别为74.07％和40.74％、81.48％和74.07％,100％和100％;20mg·L-1和80mg·L-1的ABA分别适于'火炬'和'神马'的离体保存,10个月存活率均达100％,且植株生长良好;3～5mg·L-1 PP333和5～9mg·L-1 PP333分别使'火炬,和'神马'较CK延长存活3个月,而高浓度(7～9mg·L-1)PP333对'火炬'试管苗有毒害作用,3mg·L-1PP333对'神马'试管苗抑制作用不明显.保存10个月的试管苗恢复生长能力正常,并且保存材料再生后代的过氧化物酶(POD)及酯酶(EST)同工酶酶谱、ISSR扩增图谱与CK株相比无差异,保持了良好的遗传稳定性.

摘要： 为了研究植物渗透调节剂山梨醇在马铃薯种质资源试管苗离体保存中的作用,本文以两个马铃薯品种为试验材料,在25±1°C培养条件下添加山梨醇对马铃薯试管苗生长发育情况以及表型特征进行了观察与分析.试验结果表明,山梨醇处理两个马铃薯试管苗后其植株高度、根系长度、节数、叶片数目、第二节节长、第二节节粗、根系鲜重、根系干重、地上部鲜重和地上部干重处理间差异显著;第二节节粗、根系干重、地上部鲜重和地上部干重品种间差异显著.结合两个马铃薯品种试管苗表型特征分析,25±1°C保存条件下,40～60 g/L的山梨醇可以作为马铃薯种质资源离体保存的添加剂,可以显著的抑制试管苗的生长速度.

摘要： 金钗石斛Dendrobium flexicaule又名金钗、金耳环、曲茎石斛,系我国传统名贵药材,主要分布于秦巴山区.金钗石斛具有重要药用价值、文化价值、生态保护价值和提高秦巴山区贫困农户收益的经济价值,但由于长期过渡采集,其野生资源已非常稀少,且目前尚无成功栽培范例,亟待加强保护.针对金钗石斛的资源现状,提出资源保护与可持续利用对策：自然保护区内原地保护与回归保育;迁地保护与离体保存;金钗石斛文化的传承与保护：加强野生变家种研究,建立产业化商品生产基地;加强地理分布、生境及生物学特性的基础研究.

摘要： 本试验以“夏波蒂”马铃薯脱毒试管苗为试验材料，MS为基本培养基，添加不同浓度的植物生长抑制剂CCC、PP333、CCC+PP333，比较其对试管苗离体保存的影响。为马铃薯种质资源的长期保存提供一定的理论依据。本试验结果表明，矮壮素(CCC)和多效唑(PP333)均可以抑制“夏波蒂”试管苗的生长和延长保存时间。CCC的最佳浓度是40mg/L，可使试管苗节间缩短，节间长度有不同层度变短，茎增粗，叶片颜色变深，叶片变厚，根增多，生物量随其培养时间增加，可用于培养健壮的马铃薯试管苗。PP333的最佳浓度是1.5mg/L，可使生物量随其培养时间增加，节间数增加，节间距变短，茎秆加粗，叶片皱缩，对根数和植株形态也有抑制作用。CCC+PP333的最佳浓度是MS+CCC 25mg/L+PP333 3.0mg/L，可使生物量随其培养时间加重，节间数也增加，节间距变短，茎秆加粗，有结薯现象，叶片皱缩。

摘要： 种质资源是遗传改良和育种的基础,.科学的保存方法是种质资源利用的重要条件.随着我国马铃薯育种和研究工作的深入,收集和创新的马铃薯资源规模在扩大,资源的保存条件和方法也日益完善.本文介绍当前马铃薯资源保存方面的研究成果,与大多数通过实生种子繁殖的作物不同，马铃薯种质资源的保存具有其特殊性。生产和研究中使用的大部分原始栽培种以及育成品种和改良的种质资源以营养体生长方式进行繁殖，这部分材料通过块茎或试管苗保存。自然界中原本通过有性方式繁殖后代的野生种，则可以通过实生种子保存物种的遗传信息，部分原始栽培种也通过实生种子群体保存。目前保存方法主要有低温库种子保存、块茎保存、超低温保存、试管苗保存(或离体保存)，对我国来说目前需要利用现代装备和技术建立标准化的资源保存中心，扩大保存容量，延长保存时间保障保存安全、加强保存方法的研究，为资源长期安全保存提供技术支持、建立安全高效的合作平台，分享资源信息和交流资源材料，服务产业发展。

摘要： 本发明提供了一种福建莲座蕨离体保存培养基及离体保存方法，涉及种质保存技术领域。本发明所述离体保存培养基包括以下成分：花宝2号3g/L、NAA 0.5mg/L、蔗糖20g/L、活性炭1g/L和琼脂6g/L，pH值为5.8。利用所述离体保存培养基进行离体保存时，萌发培养15d后孢子萌发，30d后镜检孢子萌发率可达67.32％，50d左右发育成幼原叶体；将幼原叶体接种于增殖培养基中，每瓶接种4个，幼原叶体继续长大和增殖，30d继代一次，增殖率可达1:3；将原叶体团转接到离体保存培养基上，每瓶接种4个，原叶体长条形，中间厚边缘薄，原叶体团的继代周期可延长至1.5年以上。为后续莲座蕨属植物相关野生种质资源的开发、利用及保护提供理论基础和技术支持。

摘要： 本发明公开了一种川芎种质的离体保存方法，它包括如下步骤：（1）取川芎茎尖，消毒灭菌；（2）将步骤（1）处理后的川芎茎尖接种于川芎离体保存培养基中保存，保存条件为：温度4~25°C，光照强度600~1500lx，光照时间10~14h/d；所述保存培养基以1/2MS培养基为基础培养基，添加20~30g/L蔗糖，或者以MS培养基为基础培养基，添加20~60g/L蔗糖。本发明还公开了一种川芎种质的离体保存培养基。本发明川芎种质的离体保存方法操作方便，操作简单，保存效果优良。

摘要： 本发明提供了一种福建莲座蕨离体保存培养基及离体保存方法，涉及种质保存技术领域。本发明所述离体保存培养基包括以下成分：花宝2号3g/L、NAA 0.5mg/L、蔗糖20g/L、活性炭1g/L和琼脂6g/L，pH值为5.8。利用所述离体保存培养基进行离体保存时，萌发培养15d后孢子萌发，30d后镜检孢子萌发率可达67.32％，50d左右发育成幼原叶体；将幼原叶体接种于增殖培养基中，每瓶接种4个，幼原叶体继续长大和增殖，30d继代一次，增殖率可达1:3；将原叶体团转接到离体保存培养基上，每瓶接种4个，原叶体长条形，中间厚边缘薄，原叶体团的继代周期可延长至1.5年以上。为后续莲座蕨属植物相关野生种质资源的开发、利用及保护提供理论基础和技术支持。

摘要： 本发明公开了一种川芎种质的离体保存方法，它包括如下步骤：（1）取川芎茎尖，消毒灭菌；（2）将步骤（1）处理后的川芎茎尖接种于川芎离体保存培养基中保存，保存条件为：温度4～25°C，光照强度600～1500lx，光照时间10～14h/d；所述保存培养基以1/2MS培养基为基础培养基，添加20～30g/L蔗糖，或者以MS培养基为基础培养基，添加20～60g/L蔗糖。本发明还公开了一种川芎种质的离体保存培养基。本发明川芎种质的离体保存方法操作方便，操作简单，保存效果优良。

摘要： 本发明公开了一种无花果种质资源离体保存箱及保存方法，包括保存箱本体，所述保存箱本体一侧对称设置有散热网，所述保存箱本体一侧的上端对称固定连接有固定块，所述固定块一侧设置有转杆，所述转杆一侧的下端固定连接有转轴，所述转杆一侧的上端固定连接有把手，所述保存箱本体顶部设置有箱盖，所述箱盖一侧的下端固定连接有卡扣，在侧筒底部设置有滤网，当对无花果种质资源喷淋水分过多时，通过滤网内部设置的滤孔进行排出，使得水分通过导向槽后的出水管进行排出，防止无花果种质资源表面因水分较多而导致内部细胞组织损坏，进一步提高无花果种质资源保存的效果。

摘要： 本发明公开了一种文心兰种质资源离体保存及保存后恢复生长的方法，从文心兰新生长的假鳞茎上剥取茎尖，将其置于原球茎诱导培养基表面培养成原球茎，将原球茎进行反复切割和继代培养，从而繁殖出所需数量的原球茎，然后采用离体保存培养基进行培养，待原球茎进入发育生长阶段后，在0～5°C条件下暗培养；将暗培养中的原球茎转移至分化培养基上，由原球茎分化产生幼苗。本发明利用文心兰茎尖培养技术，诱导出原球茎，然后通过原球茎分化获得文心兰幼苗。低温保存原球茎，结合添加适量多效唑，可以大大延长保存时间，减少继代培养次数，有效保持了种质资源的遗传特性。保存一定时间后，置于正常温度和光照条件下培养，能迅速恢复生长，分化出幼苗。

摘要： 本发明公开了一种寒兰种质资源离体保存及保存后恢复生长的方法，从寒兰新生长的假鳞茎上剥取茎尖，将其置于原球茎诱导培养基表面培养成原球茎，将原球茎进行反复切割和继代培养，从而繁殖出所需数量的原球茎，然后采用离体保存培养基进行培养，待原球茎进入发育生长阶段后，在0～5°C条件下暗培养；将暗培养中的原球茎转移至分化培养基上，由原球茎分化产生幼苗。本发明利用寒兰茎尖培养技术，诱导出原球茎，然后通过原球茎分化获得寒兰幼苗。低温保存原球茎，结合添加适量多效唑，可以大大延长保存时间，减少继代培养次数，有效保持了种质资源的遗传特性。保存一定时间后，置于正常温度和光照条件下培养，能迅速恢复生长，分化出幼苗。

摘要： 本发明公开了一种春兰种质资源离体保存及保存后恢复生长的方法，从春兰新生长的假鳞茎上剥取茎尖，将其置于原球茎诱导培养基表面培养成原球茎，将原球茎进行反复切割和继代培养，从而繁殖出所需数量的原球茎，然后采用离体保存培养基进行培养，待原球茎进入发育生长阶段后，在0～5°C条件下暗培养；将暗培养中的原球茎转移至分化培养基上，由原球茎分化产生幼苗。本发明利用春兰茎尖培养技术，诱导出原球茎，然后通过原球茎分化获得春兰幼苗。低温保存原球茎，结合添加适量多效唑，可以大大延长保存时间，减少继代培养次数，有效保持了种质资源的遗传特性。保存一定时间后，置于正常温度和光照条件下培养，能迅速恢复生长，分化出幼苗。

摘要： 本发明公开了一种建兰种质资源离体保存及保存后恢复生长的方法，从建兰新生长的假鳞茎上剥取茎尖，将其置于原球茎诱导培养基表面培养成原球茎，将原球茎进行反复切割和继代培养，从而繁殖出所需数量的原球茎，然后采用离体保存培养基进行培养，待原球茎进入发育生长阶段后，在0～5°C条件下暗培养；将暗培养中的原球茎转移至分化培养基上，由原球茎分化产生幼苗。本发明利用建兰茎尖培养技术，诱导出原球茎，然后通过原球茎分化获得建兰幼苗。低温保存原球茎，结合添加适量多效唑，可以大大延长保存时间，减少继代培养次数，有效保持了种质资源的遗传特性。保存一定时间后，置于正常温度和光照条件下培养，能迅速恢复生长，分化出幼苗。

摘要： 本发明公开了一种蕙兰种质资源离体保存及保存后恢复生长的方法，从蕙兰新生长的假鳞茎上剥取茎尖，将其置于原球茎诱导培养基表面培养成原球茎，将原球茎进行反复切割和继代培养，从而繁殖出所需数量的原球茎，然后采用离体保存培养基进行培养，待原球茎进入发育生长阶段后，在0～5°C条件下暗培养；将暗培养中的原球茎转移至分化培养基上，由原球茎分化产生幼苗。本发明利用蕙兰茎尖培养技术，诱导出原球茎，然后通过原球茎分化获得蕙兰幼苗。低温保存原球茎，结合添加适量多效唑，可以大大延长保存时间，减少继代培养次数，有效保持了种质资源的遗传特性。保存一定时间后，置于正常温度和光照条件下培养，能迅速恢复生长，分化出幼苗。