毒害艾美耳球虫

摘要： 旨在探析毒害艾美耳球虫氧化还原酶EnOXIO1的功能。提取毒害艾美耳球虫扬州株配子体总RNA,应用RT-PCR获取EnOXIO1编码基因,构建原核表达载体pET-28a(+)-EnOXIO1,转化至大肠杆菌BL21(DE3),体外诱导表达,对重组蛋白进行抗原性分析,应用制备的多抗进行激光共聚焦免疫荧光定位。结果显示,获得的EnOXIO1基因全长为2535 bp,体外重组表达的蛋白大小约100 ku,主要以包涵体的形式存在,表达量约为0.5 mg·mL^(-1)。Western blot分析结果显示,该重组蛋白能被6×HIS标签单克隆抗体识别,同时能被制备的鼠多抗以及毒害艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫和柔嫩艾美耳球虫病鸡康复血清所识别,表明该重组蛋白具有较好的反应原性和交叉反应原性。激光共聚焦免疫荧光定位结果显示,EnOXIO1基因表达产物主要存在于配子体内的成壁体上,参与了卵囊壁的形成。本研究成功克隆和表达了毒害艾美耳球虫EnOXIO1蛋白,并将其定位于配子体和卵囊壁上,为进一步解析EnOXIO1蛋白参与卵囊壁形成的分子机制奠定基础,为研制新型免疫阻断型球虫亚单位疫苗提供重要靶抗原。

摘要： 旨在制备毒害艾美耳球虫(Eimeria necatrix)配子体抗原EnGAM22单克隆抗体,用Ni-NTA亲和层析纯化的重组抗原rEnGAM22免疫BALB/c小鼠,免疫3次后,取脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,用预先建立的ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞,经有限稀释法对阳性杂交瘤细胞进行4次亚克隆后,获得2株能稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株并命名为2F3和3D3;对单抗亚类和特异性进行鉴定,应用单抗识别天然蛋白和虫体定位。结果显示,单克隆抗体2F3和3D3亚类分别为IgG2a、IgG2b,纯化后腹水效价分别为1∶256000、1∶64000,能特异性识别重组抗原rEnGAM22和毒害艾美耳球虫天然配子体蛋白;免疫荧光定位显示单克隆抗体2F3和3D3能特异性识别大配子体的成壁体和卵囊壁,表明EnGAM22抗原参与卵囊壁的形成。制备的单克隆抗体为研究球虫卵囊壁形成的分子机制奠定了基础。

摘要： 【目的】探讨毒害艾美耳球虫(Eimeria necatrix)早熟株对鸡的免疫效果,为获得安全有效的鸡球虫疫苗株提供试验参考依据。【方法】取4日龄健康、体质量50~70 g鸡随机分为4组,分别为对照组、盐酸氨丙啉添加组、一免组和二免组,每组50只鸡地面饲养,试验期81 d。对照组、免疫组(免疫组包括一免组和二免组)鸡饲喂基础日粮,盐酸氨丙啉添加组鸡按照药物说明全程基础日粮加盐酸氨丙啉拌服。一免组鸡4日龄一免,剂量1 000个/只毒害艾美耳球虫早熟株孢子化卵囊;二免组鸡53日龄二免,剂量200个/只毒害艾美耳球虫早熟株孢子化卵囊。鸡25日龄、53日龄、74日龄时从地面饲养的各组随机抽取6只鸡移到笼上饲养,同时设置红对照组(鸡不免疫不喂药仅攻毒)。笼养鸡除对照组外,其他组鸡均攻毒,攻毒方法为逐只鸡经口接种毒害艾美耳球虫亲本株(10×10^(4)个孢子化卵囊/只)。肉眼观察鸡临床症状,测定鸡平均相对体增质量、小肠病变记分、小肠病变记分减少率、存活率、卵囊减少率与抗球虫指数等指标。【结果】免疫鸡攻毒后,临床观察对照组鸡精神状态良好,未出现任何异常症状;免疫组与红对照组相比精神状态良好、血便减少。不同日龄鸡(25日龄、53日龄和74日龄)攻毒后第7天,盐酸氨丙啉添加组和免疫组鸡相对体增质量均明显低于对照组但极显著高于红对照组且二免组高于一免组。免疫组鸡小肠平均病变记分均低于红对照组,小肠病变记分减少率高于红对照组,其中二免组不同日龄攻毒后鸡小肠平均病变记分均低于一免组,且74日龄鸡攻毒后小肠病变记分减少率最高。红对照组不同日龄鸡卵囊数极显著高于盐酸氨丙啉添加组和免疫组,其中免疫组53日龄鸡和74日龄鸡攻毒后卵囊数均显著高于盐酸氨丙啉添加组,卵囊减少率低于盐酸氨丙啉添加组,且二免组74日龄鸡攻毒后卵囊减少率高达90%。免疫组不同日龄鸡抗球虫指数极显著高于红对照组,二免组不同日龄鸡抗球虫指数均高于145且高于一免组,即二免组鸡抗球虫效果达到中效水平。【结论】毒害艾美耳球虫早熟株2次免疫对鸡具有良好的保护效果,且对鸡生长发育的影响较小。

摘要： 将柔嫩艾美耳球虫重组配子体蛋白rEtGAM22、rEtGAM56和rEtGAM59分别单独免疫(单免)或联合免疫(联免)雏鸡,同时设未免疫攻虫组和空白对照组为对照,分别用柔嫩艾美耳球虫和毒害艾美耳球虫进行攻虫试验,以存活率、排出血便数、平均增重、相对增重率、病变记分、卵囊减少率、抗球虫指数和血清特异性抗体水平为指标来评价这3种重组蛋白免疫雏鸡的抗球虫免疫保护效果。结果显示:各试验组的成活率均为100%。与空白对照组比较,各免疫组鸡排血便堆数减少、平均增重显著(P<0.05)增加;用柔嫩艾美耳球虫攻虫后,rEtGAM22与rEtGAM59联免组相对增重率(86.71%)最高,rEtGAM59单免组平均病变记分最低、卵囊减少率(59.61%)最高,rEtGAM22与rEtGAM59联免组抗球虫指数值(163.71)最高。用毒害艾美耳球虫攻虫后,rEtGAM22与rEtGAM59联免组相对增重率(83.06%)最高,rEtGAM56与rEtGAM59联免组平均病变记分最低,rEtGAM56单免组卵囊减少率(66.97%)最高,rEtGAM56与rEtGAM59联免组抗球虫指数(158.23)最高。各免疫组血清特异性抗体水平均显著(P<0.05)高于空白对照组,其中rEtGAM56单免组血清特异性抗体水平最高,且显著(P<0.05)高于其他免疫组。结论:rEtGAM59单免或与rEtGAM22联免的抗柔嫩艾美耳球虫的保护效果较好,rEtGAM56单免或与rEtGAM59联免的抗毒害艾美耳球虫的保护效果较好。

摘要： 鸡球虫病是由艾美耳科,艾美耳属的球虫寄生于鸡的肠道引起的。目前全国范围内鸡的球虫被公认的有7种,凡是有鸡的地方,均有鸡球虫存在,生产中多以一种以上的球虫混合感染为主。发病最多、危害最大的球虫主要有柔嫩艾美耳球虫和毒害艾美耳球虫。柔嫩艾美耳球虫寄生于盲肠,致病力最强,在感染后第5天引起宿主的盲肠严重出血和高度肿胀,后期出现干酪性肠芯,因此又被称为盲肠球虫。毒害艾美耳球虫主要寄生在小肠中1/3段,以卵黄蒂前后最为常见,是小肠球虫中致病力最强的一种。鸡小肠球虫病主要是由毒害艾美耳球虫引起,多发生在散养草鸡的30-70日龄,临床症状可见棕色粪便,以及褐灰色粪便,病鸡表现精神不振、缩颈、厌食、消瘦、血便,并带有腹泻症状,零星死亡,是散养草鸡常见的疾病。

摘要： 为了研究鸡毒害艾美耳球虫表面抗原基因(EnSAG)的功能,以毒害艾美耳球虫(扬州株)第二代裂殖子的总RNA为模板,RT-PCR扩增其EnSAG,连接至pGEM-T-Easy载体,鉴定后构建pET28a(+)-EnSAG表达载体,转化至大肠杆菌BL21,鉴定后进行诱导表达和纯化。用纯化重组蛋白免疫BALB/c小鼠,制备抗EnSAG蛋白的多克隆抗体。利用多克隆抗体,用Western blot技术检测子孢子和第二代裂殖子中的天然EnSAG蛋白。用重组蛋白按高剂量(200μg/羽)、中剂量(100μg/羽)和低剂量(50μg/羽)免疫雏鸡,同时设置未免疫攻虫组和未免疫未攻虫组为对照,以成活率、平均增重、相对增重率、卵囊减少率、病变记分和抗球虫指数(ACI)为指标,评价重组蛋白的免疫保护力。结果显示:该基因全长768 bp,编码255个氨基酸,分子质量24.63 ku;重组蛋白大小约为30 ku,以包涵体形式为多,能被组氨酸单抗和鸡抗毒害艾美耳球虫阳性血清特异性识别;在第二代裂殖子中检测到天然EnSAG蛋白,其分子质量大约为27 ku。各试验组的成活率均为100%;免疫组的平均增重增加,病变记分显著降低(P<0.05);低剂量组相对增重率最高(86.19%);高剂量组卵囊减少率(61.54%)和ACI值(160.03)最高。本研究结果为进一步探析EnSAG蛋白的功能以及鸡球虫病亚单位疫苗研制奠定了基础。

摘要： 为了探索河南地区鸡球虫病免疫预防的方法,应用早熟选育技术对河南地区分离的纯种毒害艾美耳球虫(E.necatrix)虫株进行了连续30代的早熟选育,并通过对E.necatrix早熟减毒株与母株的孢子化卵囊大小、毒力、致病性、免疫原性等指标进行测定,分析E.necatrix早熟减毒株与母株之间基本生物学特性的差异.结果 显示,经过早熟选育后E necatrix潜隐期由母株144 h降低至121 h,潜隐期缩短了23 h;E.necatrix早熟减毒株的孢子化卵囊大小与母株相等或略小,但差异不显著(P＞0.05);在致病性方面,E.necatrix早熟减毒株的毒力明显低于母株;在免疫性方面,200个/羽剂量的E.necatrix免疫组即能产生较好的免疫保护力,表明E.necatrix母株和早熟减毒株均具有良好的免疫原性.经选育的E necatrix早熟减毒株具有潜隐期明显缩短、致病性较母株弱、保持了母株免疫原性等球虫早熟减毒株的独特特点.

摘要： 一、研究背景鸡球虫病是鸡常见的由一种或多种球虫引起急性流行性寄生虫病,病原为原虫中的艾美耳科艾美耳属的球虫,目前世界公认的有7种,不同种的球虫在鸡消化道内寄生的部位不同,其致病力也不相同,其中危害最严重的为柔嫩艾美耳球虫和毒害艾美耳球虫,前者寄生于鸡的盲肠,后者寄生于小肠粘膜中。

摘要： 鸡球虫病是鸡的一种常见原虫病，分布广泛，可引起15—50日龄的雏鸡发病。危害鸡的球虫主要是艾美耳属的8—9个虫种，其中以柔嫩艾美耳球虫和毒害艾美耳球虫最为常见，且危害大。前者主要寄生于鸡的盲肠内，雏鸡多见，死亡率在70％以上；后者主要寄生在鸡的小肠内，青年鸡多见，死亡率在50％以上。全世界每年由鸡球虫病造成的经济损失在20亿美元以上。因此，在雏鸡阶段做好该病的预防和治疗具有重要意义。

摘要： 连续10天观察鸡盲肠粪、小肠粪排泄频数,摸清盲肠粪、小肠粪排泄规律.再通过鸡体经口接种毒害艾美耳球虫贺州株(PNHZ),收集感染后含卵囊的小肠粪及盲肠粪,采用麦克马斯特法计数每羽鸡小肠粪、盲肠粪所排泄的卵囊数量.从结果可知,鸡粪便排泄具有规律性,主要以小肠粪排泄为主,盲肠粪排泄量较少,平均每羽鸡每天小肠粪排泄频数在44～48次,盲肠粪排泄频数在2～4次.比较小肠粪与盲肠粪毒害艾美耳球虫卵囊排泄量,毒害艾美耳球虫卵囊主要分布于盲肠粪中,影响疫苗后代卵囊的均匀重复感染.通过人工二免,可提高鸡群的免疫均匀性,加强毒害艾美球虫的免疫保护效果.

摘要： 本研究通过免疫保护试验,评价了一商品化鸡球虫病四价活疫苗对毒害和柔嫩艾美耳球虫的免疫效果,旨在为鸡球虫病的免疫预防提供依据.试验期间，各组试验鸡均未发生死亡。所有阳性对照组和免疫攻虫组鸡均出现不同程度的临床症状，并排出数量不等的血便，均以阳性对照组较严重。阴性对照组和免疫对照组鸡精神、食欲和粪便保持正常。各组鸡的平均增重差异极显著(P＜0.01)。按增重速度快慢依次为阴性对照组、免疫对照组、免疫攻毒害艾美球虫组、攻毒害艾美耳球虫阳性对照组、免疫攻柔嫩艾美耳球虫组和攻柔嫩艾美耳球虫阳性对照组。免疫攻毒害艾美球虫组和免疫攻柔嫩艾美耳球虫组的卵囊数分别较相应的阳性对照组减少42.6%和38.1%。所有攻虫组鸡的肠道均有程度不等的病变，以攻柔嫩艾美耳球虫阳性对照组最为严重。免疫攻毒害艾美球虫组和免疫攻柔嫩艾美耳球虫组的病变值分别较相应的阳性对照组减少了93.3%和39.1%。表明疫苗对毒害艾美耳球虫有完全保护作用，而对柔嫩艾美耳球虫只有部分保护作用。统计结果表明，疫苗抗毒害艾美耳球虫指数为157.3，抗柔嫩艾美耳球虫指数为135.6，均低于160。表明疫苗抗两种球虫的效果均为低效。

摘要： 为了探讨毒害艾美耳球虫与巨型艾美耳球虫、毒害艾美耳球虫与柔嫩艾美耳球虫间在免疫上的相互影响。挑选体况相近的5日龄黄羽肉鸡132只，分设3种球虫的单独免疫组、4个2种球虫混合免疫组、3种球虫的未免疫攻虫组、未免疫未攻虫组，共11个组，每组12只雏鸡。分别以死亡率、肠道病变记分、平均增重、相对增重率、相对卵囊产量、抗体水平等为评价指标，结果显示：①毒害降低巨型抗体的生成，而巨型对毒害抗体的生成存在免疫协同效应。②毒害对柔嫩抗体的生成没有影响，柔嫩对毒害抗体的生成存在免疫协同效应。结论：巨型艾美耳球虫与毒害艾美耳球虫混合免疫，巨型艾美耳球虫对毒害艾美耳球虫的免疫有一定的协同效应，而毒害艾美耳球虫对巨型艾美耳球虫的免疫有一定的负面影响，但不显著;柔嫩艾美耳球虫与毒害艾美耳球虫混合免疫，柔嫩艾美耳球虫对毒害艾美耳球虫的免疫有一定的协同效应，而毒害艾美耳球虫对柔嫩艾美耳球虫的免疫没有影响。

摘要： 福建某鸡场肉鸡发病，粪便带血，重者死亡。经解剖观察、粪便浮卵镜检和设计毒害艾美耳球虫特异NA4和NPmz19基因引物对虫卵和小肠粘膜刮取物进行PCR扩增检测，根据检测结果，确定为毒害艾美耳属球虫感染。经药物治疗，病情迅速得以控制。

摘要： 给15、17、19日胚龄的鸡胚经羊膜腔分别接种不同剂量的毒害艾美耳球虫E.necatrix孢子化卵囊、孢子囊或子孢子,出雏后在无球虫环境中笼养,收集2~7日龄间全部粪便,以饱和盐水漂浮法检查卵囊的产生,并于17日龄时以12×10/鸡的同源孢子化卵囊攻虫,以相对增重率(RWG)、病变记分减少率(RLS)、相对卵囊产量(ROP)评价免疫保护效果.结果表明,孢子化卵囊、孢子囊或子孢子经羊膜腔免疫接种后对鸡胚的孵化率无明显影响,所有接种组在出雏后2~7日龄间均能检获后代卵囊,攻虫后各免疫组的相对增重率由攻虫对照的38﹪~42.9﹪提高到73.2﹪~90.5﹪,病变记分减少率达50﹪~74.9﹪,相对卵囊产量为攻虫对照组的28.1﹪~60.2﹪,表明以一定剂量的E.necatrix孢子化卵囊、孢子囊和子孢子经羊膜腔免疫接种鸡胚,可诱导鸡在出雏后笼养条件下对于同源艾美耳球虫的免疫保护力;比较不同剂量、不同胚龄的免疫效果,发现在试验设定条件下于17日胚龄接种8×10个子孢子/胚的效果最好.

摘要： 本研究以孢子化卵囊的总RNA为模板,用RT-PCR方法克隆获得了毒害艾美耳球虫(Eimeria necatrix)广东株子孢子微线蛋白-2基因(EnMIC2)和堆型艾美耳球虫(E.acervulina)广东珠子孢子表面抗原基因cSZ1的cDNA.再以PCR方法扩增获得该二基因的开放读框(ORF)后,克隆至减毒鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium),构建了EnMIC2、cSZ1及二基因共表达的重组减毒S.typhimurium,经IPTG诱导获得了重组抗原的高效表达,SDS-PAGE分析表明,表达产物分别占菌体总蛋白的8.6﹪、9.2﹪和8.3﹪.将重组减毒S.typhimurium经口免疫雏鸡后,能诱导产生抗鸡球虫重组抗原的特异性IgG和IgA.免疫后3周试验鸡以同源E.necatrix和E.acervulina攻击,可同时获得部分保护,表现为卵囊产量明显减少.

摘要： 本发明为一种鸡毒害艾美耳球虫孢子化卵囊的特异性扩增引物及其PCR检测方法，其设计特异性引物并建立用于检测毒害艾美耳球虫孢子化卵囊的特异性PCR检测方法，为鸡毒害艾美耳球虫的临床检测应用和推广提供理论依据和技术支撑。本发明采用的技术方案为：所述特异性引物序列如下：SP4124‑F：5’‑ACTACACAAGTCCCGTCAAAC‑3’；SP4124‑R：5’‑CTATGCTGTCTTCCTCTATCCC‑3’。特异性引物在检测鸡毒害艾美耳球虫孢子化卵囊中的PCR检测方法为：首先富集纯化待测样本中的卵囊，提取卵囊总RNA并通过反转录得到cDNA，然后以上述cDNA为模板，用特异性引物进行PCR扩增并对扩增产物进行电泳检测，若电泳结果出现444bp的特异条带，提示待测样本中存在毒害艾美耳球虫孢子化卵囊。

摘要： 本发明涉及兽用生物制品领域，具体而言，涉及一种用于防治毒害艾美耳球虫的重组多肽及疫苗。通过免疫毒害艾美耳球虫重组多肽疫苗EN‑NAVA蛋白，能有效控制鸡体感染毒害艾美耳球虫，大大降低养鸡场抗球虫药的使用量，有效控制鸡球虫病。

摘要： 本发明为一种鸡毒害艾美耳球虫孢子化卵囊的特异性引物及PCR检测方法，其设计特异性引物并建立用于检测毒害艾美耳球虫孢子化卵囊的特异性PCR检测方法，为鸡毒害艾美耳球虫的临床检测应用和推广提供理论依据和技术支撑。本发明采用的技术方案为：所述特异性引物序列如下：SP2908‑F：5’‑GACAATCATACA CACTGGGC‑3’；SP2908‑R：5’‑AGATGCCTC TTCCAAAGC‑3’。特异性引物在检测鸡毒害艾美耳球虫孢子化卵囊中的PCR检测方法为：以待测样本的cDNA为模板，以特异性引物作为扩增引物进行PCR扩增，对扩增产物进行电泳检测，若电泳结果出现286bp目的条带，则待测样本为毒害艾美耳球虫孢子化卵囊。

摘要： 本发明提供了一种毒害艾美耳球虫SAG20抗原亚单位疫苗及其制备方法和应用，所述毒害艾美耳球虫SAG20抗原亚单位疫苗是通过基因工程方法制备的亚单位疫苗，以毒害艾美耳球虫SAG20蛋白为抗原，以弗氏佐剂作为免疫佐剂，所述毒害艾美耳球虫SAG20抗原亚单位疫苗具有良好的免疫原性，在抵抗E.necatrix卵囊感染方面具有良好的活性。与强毒或减毒活疫苗相比，本发明中的基因工程亚单位疫苗不仅可以诱导良好的抗体反应，保护禽类抵抗艾美耳球虫卵囊的感染，而且安全性高、稳定性好，解决了活疫苗存在散毒风险的问题。

摘要： 本发明公开了一种毒害艾美耳球虫亚单位疫苗及其制备方法和应用。所述毒害艾美耳球虫亚单位疫苗包括毒害艾美耳球虫SAG13蛋白，所述毒害艾美耳球虫SAG13蛋白的氨基酸序列包括SEQ ID NO.1所示的序列。本发明以毒害艾美耳球虫SAG13蛋白作为亚单位疫苗候选蛋白，深入分析其信号肽和跨膜结构域，创造性地去除信号肽和跨膜结构域的多肽序列，发现其能够有效激发鸡抵抗毒害艾美耳球虫感染的免疫保护力，即可作为高效亚单位疫苗，且序列显著简化，利于制备和纯化，能够实现高效、低成本制备，具有广泛推广应用的潜质。

摘要： 本发明提供了一种毒害艾美耳球虫SAG7抗原亚单位疫苗及其制备方法和应用。本发明还提供了一种核酸分子，所述核酸分子编码毒害艾美耳球虫SAG7蛋白；所述核酸分子包括SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。本发明以毒害艾美耳球虫SAG7作为抗原制备亚单位疫苗，所述SAG7蛋白具有良好的免疫原性，所述SAG7蛋白亚单位疫苗在抵抗毒害艾美耳球虫卵囊感染方面具有较强的活性。与强毒或减毒活疫苗相比，基因工程亚单位疫苗不仅可以诱导良好的抗体反应，保护禽类抵抗艾美耳球虫卵囊感染，而且安全性高、稳定性好，解决了活疫苗存在散毒风险的问题。

摘要： 本发明涉及兽用生物制品领域，具体而言，涉及一种用于防治毒害艾美耳球虫的重组多肽及疫苗。通过免疫毒害艾美耳球虫重组多肽疫苗EN‑NAVA蛋白，能有效控制鸡体感染毒害艾美耳球虫，大大降低养鸡场抗球虫药的使用量，有效控制鸡球虫病。

摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种抗毒害艾美耳球虫配子体EnGAM22蛋白单克隆抗体的制备方法，包括EnGAM22重组蛋白的制备、动物免疫、杂交瘤细胞的制备和单克隆抗体的制备，EnGAM22重组蛋白免疫小鼠后可产生高效价抗体，制备的杂交瘤细胞株可稳定分泌高性能抗EnGAM22蛋白单克隆抗体。本发明还公开了一种抗毒害艾美耳球虫配子体EnGAM22蛋白单克隆抗体，亚型分别为IgG2a、IgG2b，结合能力强、特异性好、效价高。本发明还公开了EnGAM22蛋白在毒害艾美耳球虫虫体中的定位，特异性强，准确性好。

摘要： 本发明为一种鸡毒害艾美耳球虫孢子化卵囊的特异性扩增引物及其PCR检测方法，其设计特异性引物并建立用于检测毒害艾美耳球虫孢子化卵囊的特异性PCR检测方法，为鸡毒害艾美耳球虫的临床检测应用和推广提供理论依据和技术支撑。本发明采用的技术方案为：所述特异性引物序列如下：SP4124‑F：5’‑ACTACACAAGTCCCGTCAAAC‑3’；SP4124‑R：5’‑CTATGCTGTCTTCCTCTATCCC‑3’。特异性引物在检测鸡毒害艾美耳球虫孢子化卵囊中的PCR检测方法为：首先富集纯化待测样本中的卵囊，提取卵囊总RNA并通过反转录得到cDNA，然后以上述cDNA为模板，用特异性引物进行PCR扩增并对扩增产物进行电泳检测，若电泳结果出现444bp的特异条带，提示待测样本中存在毒害艾美耳球虫孢子化卵囊。

摘要： 本发明为一种鸡毒害艾美耳球虫孢子化卵囊的特异性引物及PCR检测方法，其设计特异性引物并建立用于检测毒害艾美耳球虫孢子化卵囊的特异性PCR检测方法，为鸡毒害艾美耳球虫的临床检测应用和推广提供理论依据和技术支撑。本发明采用的技术方案为：所述特异性引物序列如下：SP2908‑F：5’‑GACAATCATACACACTGGGC‑3’；SP2908‑R：5’‑AGATGCCTCTTCCAAAGC‑3’。特异性引物在检测鸡毒害艾美耳球虫孢子化卵囊中的PCR检测方法为：以待测样本的cDNA为模板，以特异性引物作为扩增引物进行PCR扩增，对扩增产物进行电泳检测，若电泳结果出现286bp目的条带，则待测样本为毒害艾美耳球虫孢子化卵囊。