定位机制
定位机制的相关文献在1989年到2022年内共计108篇,主要集中在自动化技术、计算机技术、地质学、财政、金融
等领域,其中期刊论文76篇、会议论文6篇、专利文献394162篇;相关期刊64种,包括党政论坛、学术论坛、信息系统工程等;
相关会议6种,包括中国遗传学会第九次全国会员代表大会暨学术研讨会、2010中国人兽共患病学术交流会、中国通信学会信息通信网络技术委员会2009年年会等;定位机制的相关文献由216位作者贡献,包括郭进京、F·科蒂卡皮恩、J·李普曼等。
定位机制—发文量
专利文献>
论文:394162篇
占比:99.98%
总计:394244篇
定位机制
-研究学者
- 郭进京
- F·科蒂卡皮恩
- J·李普曼
- M·扎雷姆
- R·A·科尔比
- W·J·拉度切尔
- 冯明月
- 刘亮
- 刘建华
- 刘爱珍
- 叶勋
- 吕敏
- 周晟
- 夏银丽
- 孙浩然
- 孙继平
- 尹文君
- 平小艳
- 庄威
- 张宗喜
- 张文雪
- 张略
- 徐楠
- 曲俊媚
- 朱朝强
- 李建红
- 李新海
- 梁良
- 洪大卫
- 王嘉祯
- 王淑贞
- 王鼎瑞
- 罗映
- 罗麒珍
- 葛元鹏
- 蔡煜琦
- 袁桂邦
- 贝太学
- 赵磊
- 邱丽霓
- 闫法义
- 陈华
- 陈梦华
- H·程
- H·西莫普勒斯
- S·法琴
- 万艳平
- 乐亭县人大1
- 代术成
- 任丰厚
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董宜勇;
周贤旭;
胡志戍
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摘要:
文章以旋扭构造动力学理论为依据,分析了九瑞矿集区城门山、武山矿田主成矿岩体、围岩构造形迹及其与成矿的关系,解释了围绕城门山、武山矿田主成矿岩体东、西两端的块状硫化物型矿体存在的空间分布、成矿元素组合的不对称差异现象,初步确定其主要是受控于岩浆逆时针螺旋上冲侵位机制及其成矿作用,对今后九瑞矿集区铜矿成矿作用研究及找矿勘查工作的部署具有一定的借鉴意义。
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黄正锋
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摘要:
加快体育产业发展是国家战略,体育产业指向的城市定位与产城融合,对体育产业发展和城市竞争力提升提供了极好的历史机遇,也是一项前沿性的研究课题.运用文献分析法,以体育社会学理论作指引,从体育产业指向的产城融合定位机制内涵、城市自身资源禀赋优势、社会需求和城市需求以及资源禀赋与需求相结合等角度厘清体育产业产城融合的定位过程,提出体育产业指向的产城融合定位过程中出现的差异性、可行性以及目标导向性等问题及其规避,有益于促进体育产业融入城市高质量发展.
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乐亭县人大1
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摘要:
1月19日,乐亭县十六届人大三次会议胜利闭幕,会议期间共收到代表意见、建议81件。为做好今年建议交办工作,保障建议得到有效解决,今年,乐亭县人大常委会建立健全三个精准定位交办建议,确保建议办理质量得到提升。
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宋杨;
蔡源益;
黄晨;
吴华章
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摘要:
从政府对公立医院定位的角度,厘清公立医院职能定位的基本问题.按照定位主体的不同,将公立医院定位分为3类,即政府定位、社会定位和自我定位.通过分析公立医院定位机制的内涵、政府对公立医院定位实现程度不足的突出表现、政府对公立医院定位的影响因素等问题,试图为制定科学的公立医院综合改革方案提供理论基础.
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方茂龙;
薛伟;
张玉双;
刘小刚
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摘要:
A study of geometric and kinematic features of structures in No.460 uranium deposit indicates that the structural framework of No.460 uranium deposit was formed by the dextral strike-slip of the fault zone F45 and its reaction with F45' under the action of tectonic stress from northwest to southeast.According to the attitude and distribution of ore-hosting structures in the main ore block,the authors have reached the conclusion that the NW-trending reversed s-shaped or arc-shaped tensile to tensio-shear faults in the mineralized area,which serve as branch faults of the F45 fault zone,are the decisive factors for the emplacement of uranium mineralization,and that the "fault-strata trap",constructed by steep-inclined faults and gentle-inclined strata,is another significant factor.Uranium mineralization had no direct genetic relation to Late Jurassic to Early Cretaceous volcanism,but was closely related to regional tectonic activities during the strong structural movement.The intrusion of subrhyolite-porphyry and two uranium mineralization events were all produced by regional tectonic evolution at different stages and had no necessary genetic relation because they respectively corresponded to one of the strong structural movements in this region.%460矿床构造几何学和运动学特征研究表明,460矿床构造格架是在大致自北西而南东的构造应力作用下,F45断裂带右行扭动并与F45'相互作用所形成.结合主矿段容矿构造产状和分布特征,提出矿区北西向反S形或弧形张-张扭性断裂是F45断裂的派生构造,是矿床定位的决定性因素;由陡倾断裂和缓倾地层组成的“断裂-地层圈闭”是矿床定位的另一重要因素.铀成矿作用与晚侏罗世—早白垩世火山作用没有直接的成因联系,而是与区域上强烈构造活动时期的构造活动密切相关.次流纹斑岩的侵入和两次铀成矿作用在时间上与区域上的强烈构造运动时期相对应,是区域构造演化不同阶段的产物,二者没有必然的因果关系.
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陈海霞;
王连明
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摘要:
In order to improve the localization effect of sensor nodes, aiming at the parameters optimization problem of support vector machine,we designed a sensor node localization model based on artificial bee colony algorithm optimizing support vector mathine.Firstly,relevant data of sensor nodes were collected,and the effective parameters were extracted.Secondly,support vector machine was used to establish sensor node localization model,and artificial bee colony algorithm was used to solve the parameter selection problem of support vector machine.Finally,sensor node localization experiment was implemented on MATLAB2014 platform.The experimental results show that the proposed model can reflect the position of current sensor nodes,and obtain the accurate positioning results of the sensor nodes.%为了提高传感器节点的定位效果,针对支持向量机参数优化问题,设计一种人工蜂群算法优化支持向量机的传感器节点定位模型.首先采集传感器节点的相关数据,提取有效参数;然后采用支持向量机建立传感器节点定位模型,并采用人工蜂群算法解决支持向量机的参数选择问题;最后在MTALAB2014平台进行传感器节点定位实验.实验结果表明,该模型可以反映当前传感器节点的位置,获得较精准的传感器节点定位结果.
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姚玉增;
李维群;
张友刚;
朱元初;
王美叶
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摘要:
石湖金矿床位于太行山中北段,矿床产出严格受断裂构造控制.在详细野外观察及室内综合研究基础上,结合矿山生产地质资料的二次开发,认为石湖金矿控矿构造是在前中生代近SN向和NW向剪节理基础上,经燕山期构造追踪、叠加、复合而成.在主成矿期NNW-SSE向左行走滑应力作用下,石湖金矿区101脉控矿构造NW向部位以早期充填的石英闪长玢岩脉顶底板为薄弱面相对扩容,相应地矿床围岩蚀变带变宽、矿化强度高、矿化类型以石英脉型为主,形成局部"富矿柱";而近SN向部位则相对空间压缩,相应地围岩蚀变带变窄、矿化强度低、矿化类型以蚀变岩型为主,不利于成矿;富矿柱以高角度(约70°)侧列式分布,各富矿柱联合形成总体以40°向南侧伏的假象.根据该构造控矿规律,预测石湖金矿101脉47~61勘探线间、标高150 m以下部位为有利成矿部位,该成果已为矿山生产所证实.%The Shihu gold deposit lies in the middle-northern Taihang Mountains and is strictly controlled by faults. The ore-controlling structures in the mining district are not well-documented. Detailed field observation and laboratory investigation of the No.101 vein indicated that the ore-controlling structures of the Shihu gold deposit are the pre-Mesozoic shear joints with SN and NW strike that reactivated during the Yanshanian emerged from. The NNW-SSE left-strike-slip stresses during the main mineralization stage led to the dilation of the NW-strike structural segments along the roof and footwall of the early quartz diorite porphyrite veins, which contributed to the extensive wall-rock alteration, intensive gold mineralization and occur as quartz-vein type ores, and consequently the formation of rich ore pillars. On the contrary, the SN-strike compressive structures correspond to the weak wall-rock alteration and gold mineralization and occur as altered-rock type ores. All the rich ore pillars laterally distributed with high-angle (70o±), and wholly pitched southward with 40o angle. According to the structural ore-controlling regularities, the location between the No.47 and the No.61 exploratory line with elevation below 150 m is an excellent ore-prospecting area. Our prospecting proposal based on the ore-controlling structural analyses in the study area has been proven by the underground works in the Shihu gold deposit.
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许炜熔
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摘要:
在网页布局中,CSS+DIV布局网页已经成为主流,用CSS+DIV布局最重要的是掌握CSS的盒子模型以及盒子在浏览器中的排列定位.通过理论和实例阐述了Position定位,讲述了Position定位的属性以及Posi_tion定位中的两个重要的取值绝对定位和相对定位,并列举了相应的实例,加深对定位属性的理解.
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陈冲;
陈开旭;
石文杰;
李艳军;
李欢
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摘要:
义敦岛弧中段夏塞地区发育多个由断裂破碎带控制的大、中型岩浆热液脉状多金属矿床,这些矿床具有极其相似的地质背景,形成于相同的断裂构造体系。本文选取夏塞银铅锌矿床进行控矿断裂特征调查、断裂构造序次和成矿应力场分析及矿体定位机制研究,以期为该地区热液矿床的下一步找矿工作提供理论依据。对该矿床成矿地质背景及控矿断裂构造的综合研究表明:(1)矿区NNW向控矿断裂具有多期活动且成矿阶段断裂性质为左行正断层;(2)矿体定位于德格-乡城断裂和德莱-定曲断裂(Ⅰ)的次级断裂(Ⅱ)所派生的NNW向更次级的结构面(Ⅲ)中;(3)矿区NNW向断裂控制着矿化局部富集空间、矿脉展布型式及矿体的产出。
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张勇
- 《中国遗传学会第九次全国会员代表大会暨学术研讨会》
| 2013年
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摘要:
核小体是染色质的基本结构单元,核小体定位,也就是核小体相对于DNA序列的位置,可以影响转录因子与DNA的结合,从而有效地调控基因的转录.对核小体定位机制的研究已经成为表观遗传领域的一个研究热点;国际上有学者基于核小体对DNA序列的偏好性提出"核小体密码"的观点,认为核小体的定位主要是由DNA序列信息所决定的.前期的工作通过将体外组装的核小体定位信息与细胞内的核小体定位信息进行比较,系统的评估了DNA序列对核小体定位的影响.通过对高通量数据的比较发现,细胞内与体外组装的核小体定位之间存在实质性区别:首先,细胞内核小体在基因转录起始位点周围存在规律性的周期排布,而体外组装的核小体定位缺乏这一特征;其次,细胞内核小体之间的连接区长度大致相等,而体外组装的核小体缺乏规律;此外,细胞内核小体定位信号的稳定性要显著高于体外组装的核小体.这个工作针对"核小体密码"的观点提出了相反的证据,表明DNA序列本身对于核小体定位影响较小;而转录和转录因子结合等调控事件会对其具有较大影响。
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李建红;
梁良;
蔡煜琦;
冯明月
- 《第七届全国矿床会议》
| 2002年
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摘要:
本文应用岩石化学图解、花岗岩矿物组合和同位素等特征,判别研究区产铀花岗岩体的地球动力学环境为造山带后碰撞型.岩体定位机制为复合定位,早期为岩墙扩展,中期属气球膨胀,后期是火口塌陷.对岩体内的几条韧性剪切带的特征、应变状况、活动特点作了对比,认为其成因属于岩体固结前处于假塑性状态时整体发生旋转而成.
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陈苏芳;
朱翠明;
万艳平
- 《2010中国人兽共患病学术交流会》
| 2010年
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摘要:
研究目的:为了分析人乳头瘤病毒16型(HPV16) E6蛋白与hDaxx在HeLa细胞中的分布与定位,研究两蛋白高表达对TNF-α诱导HeLa细胞凋亡的影响.rn 方法:将质粒pDsRed-Monomer-C1/HPV16 E6或pEGFP-C1/hDaxx转染或共转染HeLa细胞,观察DsRed-HPV16 E6或EGFP-hDaxx融合蛋白在HeLa细胞中的表达;激光共聚焦显微镜观察HPV16 E6蛋白与hDaxx在HeLa细胞中的分布,并分析共定位.HPV16 E6与hDaxx真核细胞表达质粒瞬时共转染HeLa细胞,MTT法测定细胞增殖活性;用Hoechst 33258染色细胞核,在荧光显微镜下观察细胞核形态,并对活细胞和凋亡细胞分别计数,计算凋亡率.光显微镜下观察细胞核形态,并对活细胞和凋亡细胞分别计数,计算凋亡率。分别将Oμg, O.5μg, 1.Oμg, 2.OμgpcDNA3.1(-)lhDaxx和2.Oμg pcDNA3.1(-)iHPV 16E6瞬时共转染HeLa细胞,以空细胞组、pcDNA3.1(-)转染组和pcDNA3.1。lbDaxx转染组作为对照,TNF-a处理12h后分别收集各组细胞,经70%的乙醇4°C固定过夜,PI染色后,用流式细胞术检测细胞凋亡。rn 结果显示:HPV16 E6或hDaxx能在HeLa细胞表达;在激光共聚焦显微镜下,DsRed-HPV 16 E6融合蛋白所发的红色荧光主要分布于胞核,EGFP-hDaxx融合蛋白所发的绿色荧光仅分布于胞核;HPV16 E6和hDaxx共转染组,绿色荧光和红色荧光在胞浆较弱呈均匀分布,在胞核较强且集中分布在核膜附近,红色荧光同绿色荧光融合成黄色荧光。与HPV16 E6转染组比较,HPV16 E6与hDaxx共转染时,细胞增殖活性降低,差异有统计学意义(P<0.05 )。TNF-a处理的各组细胞均可见胞核呈现深染、致密的颗粒块状荧光的凋亡细胞。pcDNA3.10JE6转染组凋亡率低于pcDNA3.1(-)转染组,差异有统计学意义(P<0.05 );与E6转染组相比,共转染组凋亡率显著升高(P<0.01),且凋亡率随pcDNA3.1(-)/hDaxx转染量的增加而升高。rn 结论:DsRed-HPV16 E6与EGFP-hDaxx融合蛋白能在HeLa细胞内表达,HPV16 E6使部分hDaxx从细胞核转位至细胞浆,且两者发生共定位。HPV16 E6蛋白抑制TNF-a诱导HeLa细胞凋亡;在表达HPV16 E6蛋白的HeLa细胞,hDaxx高表达通过剂量依赖方式促进TNF-a诱导细胞凋亡。
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陈苏芳;
朱翠明;
万艳平
- 《2010中国人兽共患病学术交流会》
| 2010年
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摘要:
研究目的:为了分析人乳头瘤病毒16型(HPV16) E6蛋白与hDaxx在HeLa细胞中的分布与定位,研究两蛋白高表达对TNF-α诱导HeLa细胞凋亡的影响.rn 方法:将质粒pDsRed-Monomer-C1/HPV16 E6或pEGFP-C1/hDaxx转染或共转染HeLa细胞,观察DsRed-HPV16 E6或EGFP-hDaxx融合蛋白在HeLa细胞中的表达;激光共聚焦显微镜观察HPV16 E6蛋白与hDaxx在HeLa细胞中的分布,并分析共定位.HPV16 E6与hDaxx真核细胞表达质粒瞬时共转染HeLa细胞,MTT法测定细胞增殖活性;用Hoechst 33258染色细胞核,在荧光显微镜下观察细胞核形态,并对活细胞和凋亡细胞分别计数,计算凋亡率.光显微镜下观察细胞核形态,并对活细胞和凋亡细胞分别计数,计算凋亡率。分别将Oμg, O.5μg, 1.Oμg, 2.OμgpcDNA3.1(-)lhDaxx和2.Oμg pcDNA3.1(-)iHPV 16E6瞬时共转染HeLa细胞,以空细胞组、pcDNA3.1(-)转染组和pcDNA3.1。lbDaxx转染组作为对照,TNF-a处理12h后分别收集各组细胞,经70%的乙醇4°C固定过夜,PI染色后,用流式细胞术检测细胞凋亡。rn 结果显示:HPV16 E6或hDaxx能在HeLa细胞表达;在激光共聚焦显微镜下,DsRed-HPV 16 E6融合蛋白所发的红色荧光主要分布于胞核,EGFP-hDaxx融合蛋白所发的绿色荧光仅分布于胞核;HPV16 E6和hDaxx共转染组,绿色荧光和红色荧光在胞浆较弱呈均匀分布,在胞核较强且集中分布在核膜附近,红色荧光同绿色荧光融合成黄色荧光。与HPV16 E6转染组比较,HPV16 E6与hDaxx共转染时,细胞增殖活性降低,差异有统计学意义(P<0.05 )。TNF-a处理的各组细胞均可见胞核呈现深染、致密的颗粒块状荧光的凋亡细胞。pcDNA3.10JE6转染组凋亡率低于pcDNA3.1(-)转染组,差异有统计学意义(P<0.05 );与E6转染组相比,共转染组凋亡率显著升高(P<0.01),且凋亡率随pcDNA3.1(-)/hDaxx转染量的增加而升高。rn 结论:DsRed-HPV16 E6与EGFP-hDaxx融合蛋白能在HeLa细胞内表达,HPV16 E6使部分hDaxx从细胞核转位至细胞浆,且两者发生共定位。HPV16 E6蛋白抑制TNF-a诱导HeLa细胞凋亡;在表达HPV16 E6蛋白的HeLa细胞,hDaxx高表达通过剂量依赖方式促进TNF-a诱导细胞凋亡。
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陈苏芳;
朱翠明;
万艳平
- 《2010中国人兽共患病学术交流会》
| 2010年
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摘要:
研究目的:为了分析人乳头瘤病毒16型(HPV16) E6蛋白与hDaxx在HeLa细胞中的分布与定位,研究两蛋白高表达对TNF-α诱导HeLa细胞凋亡的影响.rn 方法:将质粒pDsRed-Monomer-C1/HPV16 E6或pEGFP-C1/hDaxx转染或共转染HeLa细胞,观察DsRed-HPV16 E6或EGFP-hDaxx融合蛋白在HeLa细胞中的表达;激光共聚焦显微镜观察HPV16 E6蛋白与hDaxx在HeLa细胞中的分布,并分析共定位.HPV16 E6与hDaxx真核细胞表达质粒瞬时共转染HeLa细胞,MTT法测定细胞增殖活性;用Hoechst 33258染色细胞核,在荧光显微镜下观察细胞核形态,并对活细胞和凋亡细胞分别计数,计算凋亡率.光显微镜下观察细胞核形态,并对活细胞和凋亡细胞分别计数,计算凋亡率。分别将Oμg, O.5μg, 1.Oμg, 2.OμgpcDNA3.1(-)lhDaxx和2.Oμg pcDNA3.1(-)iHPV 16E6瞬时共转染HeLa细胞,以空细胞组、pcDNA3.1(-)转染组和pcDNA3.1。lbDaxx转染组作为对照,TNF-a处理12h后分别收集各组细胞,经70%的乙醇4°C固定过夜,PI染色后,用流式细胞术检测细胞凋亡。rn 结果显示:HPV16 E6或hDaxx能在HeLa细胞表达;在激光共聚焦显微镜下,DsRed-HPV 16 E6融合蛋白所发的红色荧光主要分布于胞核,EGFP-hDaxx融合蛋白所发的绿色荧光仅分布于胞核;HPV16 E6和hDaxx共转染组,绿色荧光和红色荧光在胞浆较弱呈均匀分布,在胞核较强且集中分布在核膜附近,红色荧光同绿色荧光融合成黄色荧光。与HPV16 E6转染组比较,HPV16 E6与hDaxx共转染时,细胞增殖活性降低,差异有统计学意义(P<0.05 )。TNF-a处理的各组细胞均可见胞核呈现深染、致密的颗粒块状荧光的凋亡细胞。pcDNA3.10JE6转染组凋亡率低于pcDNA3.1(-)转染组,差异有统计学意义(P<0.05 );与E6转染组相比,共转染组凋亡率显著升高(P<0.01),且凋亡率随pcDNA3.1(-)/hDaxx转染量的增加而升高。rn 结论:DsRed-HPV16 E6与EGFP-hDaxx融合蛋白能在HeLa细胞内表达,HPV16 E6使部分hDaxx从细胞核转位至细胞浆,且两者发生共定位。HPV16 E6蛋白抑制TNF-a诱导HeLa细胞凋亡;在表达HPV16 E6蛋白的HeLa细胞,hDaxx高表达通过剂量依赖方式促进TNF-a诱导细胞凋亡。
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陈苏芳;
朱翠明;
万艳平
- 《2010中国人兽共患病学术交流会》
| 2010年
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摘要:
研究目的:为了分析人乳头瘤病毒16型(HPV16) E6蛋白与hDaxx在HeLa细胞中的分布与定位,研究两蛋白高表达对TNF-α诱导HeLa细胞凋亡的影响.rn 方法:将质粒pDsRed-Monomer-C1/HPV16 E6或pEGFP-C1/hDaxx转染或共转染HeLa细胞,观察DsRed-HPV16 E6或EGFP-hDaxx融合蛋白在HeLa细胞中的表达;激光共聚焦显微镜观察HPV16 E6蛋白与hDaxx在HeLa细胞中的分布,并分析共定位.HPV16 E6与hDaxx真核细胞表达质粒瞬时共转染HeLa细胞,MTT法测定细胞增殖活性;用Hoechst 33258染色细胞核,在荧光显微镜下观察细胞核形态,并对活细胞和凋亡细胞分别计数,计算凋亡率.光显微镜下观察细胞核形态,并对活细胞和凋亡细胞分别计数,计算凋亡率。分别将Oμg, O.5μg, 1.Oμg, 2.OμgpcDNA3.1(-)lhDaxx和2.Oμg pcDNA3.1(-)iHPV 16E6瞬时共转染HeLa细胞,以空细胞组、pcDNA3.1(-)转染组和pcDNA3.1。lbDaxx转染组作为对照,TNF-a处理12h后分别收集各组细胞,经70%的乙醇4°C固定过夜,PI染色后,用流式细胞术检测细胞凋亡。rn 结果显示:HPV16 E6或hDaxx能在HeLa细胞表达;在激光共聚焦显微镜下,DsRed-HPV 16 E6融合蛋白所发的红色荧光主要分布于胞核,EGFP-hDaxx融合蛋白所发的绿色荧光仅分布于胞核;HPV16 E6和hDaxx共转染组,绿色荧光和红色荧光在胞浆较弱呈均匀分布,在胞核较强且集中分布在核膜附近,红色荧光同绿色荧光融合成黄色荧光。与HPV16 E6转染组比较,HPV16 E6与hDaxx共转染时,细胞增殖活性降低,差异有统计学意义(P<0.05 )。TNF-a处理的各组细胞均可见胞核呈现深染、致密的颗粒块状荧光的凋亡细胞。pcDNA3.10JE6转染组凋亡率低于pcDNA3.1(-)转染组,差异有统计学意义(P<0.05 );与E6转染组相比,共转染组凋亡率显著升高(P<0.01),且凋亡率随pcDNA3.1(-)/hDaxx转染量的增加而升高。rn 结论:DsRed-HPV16 E6与EGFP-hDaxx融合蛋白能在HeLa细胞内表达,HPV16 E6使部分hDaxx从细胞核转位至细胞浆,且两者发生共定位。HPV16 E6蛋白抑制TNF-a诱导HeLa细胞凋亡;在表达HPV16 E6蛋白的HeLa细胞,hDaxx高表达通过剂量依赖方式促进TNF-a诱导细胞凋亡。
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陈苏芳;
朱翠明;
万艳平
- 《2010中国人兽共患病学术交流会》
| 2010年
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摘要:
研究目的:为了分析人乳头瘤病毒16型(HPV16) E6蛋白与hDaxx在HeLa细胞中的分布与定位,研究两蛋白高表达对TNF-α诱导HeLa细胞凋亡的影响.rn 方法:将质粒pDsRed-Monomer-C1/HPV16 E6或pEGFP-C1/hDaxx转染或共转染HeLa细胞,观察DsRed-HPV16 E6或EGFP-hDaxx融合蛋白在HeLa细胞中的表达;激光共聚焦显微镜观察HPV16 E6蛋白与hDaxx在HeLa细胞中的分布,并分析共定位.HPV16 E6与hDaxx真核细胞表达质粒瞬时共转染HeLa细胞,MTT法测定细胞增殖活性;用Hoechst 33258染色细胞核,在荧光显微镜下观察细胞核形态,并对活细胞和凋亡细胞分别计数,计算凋亡率.光显微镜下观察细胞核形态,并对活细胞和凋亡细胞分别计数,计算凋亡率。分别将Oμg, O.5μg, 1.Oμg, 2.OμgpcDNA3.1(-)lhDaxx和2.Oμg pcDNA3.1(-)iHPV 16E6瞬时共转染HeLa细胞,以空细胞组、pcDNA3.1(-)转染组和pcDNA3.1。lbDaxx转染组作为对照,TNF-a处理12h后分别收集各组细胞,经70%的乙醇4°C固定过夜,PI染色后,用流式细胞术检测细胞凋亡。rn 结果显示:HPV16 E6或hDaxx能在HeLa细胞表达;在激光共聚焦显微镜下,DsRed-HPV 16 E6融合蛋白所发的红色荧光主要分布于胞核,EGFP-hDaxx融合蛋白所发的绿色荧光仅分布于胞核;HPV16 E6和hDaxx共转染组,绿色荧光和红色荧光在胞浆较弱呈均匀分布,在胞核较强且集中分布在核膜附近,红色荧光同绿色荧光融合成黄色荧光。与HPV16 E6转染组比较,HPV16 E6与hDaxx共转染时,细胞增殖活性降低,差异有统计学意义(P<0.05 )。TNF-a处理的各组细胞均可见胞核呈现深染、致密的颗粒块状荧光的凋亡细胞。pcDNA3.10JE6转染组凋亡率低于pcDNA3.1(-)转染组,差异有统计学意义(P<0.05 );与E6转染组相比,共转染组凋亡率显著升高(P<0.01),且凋亡率随pcDNA3.1(-)/hDaxx转染量的增加而升高。rn 结论:DsRed-HPV16 E6与EGFP-hDaxx融合蛋白能在HeLa细胞内表达,HPV16 E6使部分hDaxx从细胞核转位至细胞浆,且两者发生共定位。HPV16 E6蛋白抑制TNF-a诱导HeLa细胞凋亡;在表达HPV16 E6蛋白的HeLa细胞,hDaxx高表达通过剂量依赖方式促进TNF-a诱导细胞凋亡。
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