PI3K/Akt信号通路

摘要： 背景:人参皂苷Rg3在脑缺血疾病中具有一定的神经保护作用,但其对氧糖剥夺/复糖复氧损伤的PC12细胞是否也有保护作用,目前尚不明确。目的:研究人参皂苷Rg3对氧糖剥夺/复糖复氧损伤的PC12细胞是否有保护作用以及相关机制。方法:构建高分化PC12细胞的氧糖剥夺/复糖复氧损伤模型,采用MTT、乳酸脱氢酶、Calcein-AM/PI染色、Western blot、流式检测氧糖剥夺/复糖复氧损伤后对PC12细胞的影响,以及不同浓度人参皂苷Rg3处理PC12细胞后的保护作用,并且使用PI3K/AKT通路抑制剂LY294002和AKT激活剂SC79从PI3K/AKT信号通路研究其作用机制。结果与结论:①氧糖剥夺/复糖复氧损伤模型能随着缺糖缺氧时间的延长从而降低PC12细胞的存活率,促进细胞凋亡,上调p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT蛋白比值,促进NLRP3炎性小体、肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、BAX蛋白的表达,促进乳酸脱氢酶的释放;②人参皂苷Rg3在一定浓度范围内能提高氧糖剥夺/复糖复氧损伤的PC12细胞存活率、减少乳酸脱氢酶的释放,抑制细胞凋亡,降低p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT蛋白比值,下调NLRP3炎性小体、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α、BAX蛋白的表达,还会降低活化的caspase-9蛋白表达,促进活化的caspase-3蛋白表达;③LY294002对氧糖剥夺/复糖复氧损伤的PC12细胞的保护作用与人参皂苷Rg3相当,而SC79可以减轻人参皂苷Rg3对PC12细胞的保护效果。因此,人参皂苷Rg3可以通过抑制PI3K/AKT信号通路,抑制PI3K和AKT的磷酸化,发挥抗炎、抗凋亡的作用,减轻氧糖剥夺/复糖复氧对PC12细胞造成的损伤。

摘要： 目的:探讨miR-21对食管癌细胞增殖及凋亡影响与分子机制。方法:将食管癌细胞分成miR-21-NC组、miR-21组、LY294002组、LY294002+miR-21组、对照组5组,检测miR-21表达情况及食管癌细胞系中PI3K、Akt与p-Akt表达情况。结果:食管癌细胞系的miR-21相对表达量明显高于正常食管上皮细胞系(P<0.05);miR-21组在miR-21相对表达量高于对照组、miR-21-NC组(P<0.05);在Eca-109细胞增殖率上,结果显示而miR-21组的细胞增值率要远比对照组、miR-21-NC组的指标更高,对比差异有统计学意义(P<0.05);LY294002组在Eca-109细胞增值率上比对照组低,差异有统计学意义(P<0.05);LY294002+miR-21组在Eca-109细胞增值率上比LY294002组明显更高,差异有统计学意义(P<0.05);miR-21组细胞中PI3K、p-Akt相对表达量均高于对照组,LY294002组PI3K、p-Akt相对表达量均低于对照组(P<0.05)。结论:miR-21可通过调节PI3K/Akt信号通路,促进食管癌细胞的增殖及凋亡,为食管癌靶向治疗提供一定理论依据。

摘要： 目的探讨微小RNA-199b-3p(miR-199b-3p)对肾癌细胞增殖、凋亡、侵袭的影响,并分析其调控机制。方法应用RT-qPCR检测人正常肾小管上皮细胞株HK-2细胞、肾癌细胞株786-O中的miR-199b-3p。取肾癌细胞株786-O,分别转染孔质粒、miR-199b-3p mimics建立miR-NC组和miR-199b-3p mimics组,分别应用CCK-8增殖实验、克隆形成实验、细胞流式实验、Transwell实验观察各组细胞增殖、凋亡、侵袭能力。应用生物信息学方法分析miR-199b-3p可能作用的靶基因。取肾癌细胞株786-O,分别转染孔质粒、miR-199b-3p mimics(10 nmol/L)、miR-199b-3p mimics(50 nmol/L)、成纤维细胞生长因子2(FGF2)-siRNA,建立miR-NC组、miR-199b-3p mimics 10 nmol/L组、miR-199b-3p mimics 50 nmol/L组、FGF2-siRNA组,应用Western blotting法检测FGF2及PI3K/AKT信号通路关键分子表达蛋白。结果786-O细胞中miR-199b-3p表达低于HK-2细胞(P<0.05)。CCK-8增殖实验、克隆形成实验验显示miR-199b-3p mimics组细胞增殖能力低于miR-NC组(P均<0.05)。细胞流式实验显示,miR-199b-3p mimics组细胞凋亡率高于miR-NC组(P<0.05)。Transwell实验结果显示,miR-199b-3p mimics组786-O细胞侵袭能力低于miR-NC组(P<0.05)。TargetScan7.2软件在线预测显示FGF23′非编码区与miR-199b-3p具有结合位点。Western boltting法实验结果显示,miR-NC组、miR-199b-3p mimics 10 nmol/L组、miR-199b-3p mimics 50 nmol/L组FGF2蛋白表达分别为0.87±0.11、0.42±0.06、0.23±0.04,三组两两比较P均<0.05。miR-199b-3p mimics组、FGF2-siRNA组细胞中FGF2、p-AKT、p-ERK蛋白表达低于miR-NC组,AKT、ERK蛋白表达高于miR-NC组(P均<0.05)。结论miR-199b-3p在肾癌细胞中低表达,可以抑制肾癌细胞增殖、侵袭并促进其凋亡,其作用机制可能与miR-199b-3p负靶向调控FGF2、PI3K/AKT信号通路有关。

摘要： 目的:探讨瘦素对大鼠脑缺血再灌注损伤后脑组织的神经保护作用及其机制。方法:将40只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、瘦素组和PI3K抑制剂组,每组10只。除假手术组外,其余3组均采用改良Longa线栓法建立大鼠大脑局灶性缺血再灌注损伤模型。对各组大鼠进行神经功能缺损评分,采用2,3,5-氯化三苯四氮唑(TTC)染色法检测脑梗死体积,苏木素—伊红(HE)染色法观察皮层组织的病理形态变化,原位末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡,蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测各组磷酸化蛋白酶B(p-Akt)的表达,组织免疫荧光法比较各组内质网应激相关蛋白C/EBP同源蛋白(CHOP)和半胱氨酸蛋白酶12(Caspase 12)的表达。结果:与假手术组比较,模型组神经功能缺损评分、脑梗死体积、细胞凋亡率均升高(P<0.05),CHOP和Caspase 12的荧光强度均增强;与模型组比较,瘦素组的神经功能缺损评分、脑梗死体积、细胞凋亡率均降低(P<0.05),CHOP和Caspase 12的荧光强度均减弱,皮层组织中神经细胞形态明显改善,并且p-Akt蛋白水平升高(P<0.01);与瘦素组比较,PI3K抑制剂组的神经功能缺损评分、脑梗死体积、细胞凋亡率均升高(P<0.05);CHOP和Caspase 12的荧光强度均增强。结论:瘦素可改善大鼠脑缺血再灌注后损伤,其机制可能与激活PI3K/Akt信号通路,下调内质网应激相关的促凋亡因子CHOP和Caspase 12的表达有关。

摘要： 目的探讨过表达miR-411对宫颈癌细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及机制。方法以正常宫颈上皮永生化细胞End1/E6E7为对照细胞,qRT-PCR检测宫颈癌Caski、SiHa和C-33A细胞miR-411表达。MTT法、Transwell小室及流式细胞术检测转染miR-411 mimics 48 h的SiHa细胞增殖、侵袭能力和凋亡率。通过双荧光素酶报告基因实验及miR-411 mimics/inhibitor对PIK3R3表达影响验证miR-411和PIK3R3靶向关系。将PIK3R3 siRNA及miR-411 mimics+PIK3R3过表达载体转染至SiHa细胞,转染48 h,检测细胞的增殖、侵袭能力和凋亡率。Western blotting检测转染miR-411 mimics 48 h的SiHa细胞PI3K、p-AKT、PCNA、E-cadherin和cleaved caspase3表达。结果miR-411在宫颈癌细胞表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。过表达miR-411可明显抑制SiHa细胞增殖和侵袭能力,促进细胞凋亡(P<0.05)。miR-411可靶向负调控PIK3R3表达。抑制PIK3R3表达可明显降低SiHa细胞增殖和侵袭能力,促进细胞凋亡(P<0.05)。过表达PIK3R3可逆转miR-411对SiHa细胞增殖、侵袭和凋亡的影响。过表达miR-411可明显抑制PI3K、p-AKT和PCNA表达,促进E-cadherin和cleaved caspase3表达(P<0.05)。结论miR-411可通过靶向PIK3R3抑制PI3K/AKT信号通路,从而影响宫颈癌细胞增殖、侵袭和凋亡。

摘要： 目的:运用网络药理学方法筛选党参、海藻“药对”治疗肝癌主要化学成分,预测其作用靶点及通路。方法:借助中药系统药理分析数据库(TCMSP)、“中国知网”数据库检索党参、海藻“药对”的化学成分;TCMSP、PubChem、SEA以及Swiss Target Prediction数据库检索化学成分的靶点;通过TTD、人类孟德尔遗传数据库(OMIM)获取肝癌的相关作用靶点;运用Cytoscape3.8.2软件构建“党参、海藻-活性成分-靶点-肝癌”网络图;运用STRING数据库构建蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络图;采用OmicsBean数据库进行基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析;采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测岩藻甾醇对人HepG2肝癌细胞增殖的抑制作用。结果:经数据库分析表明,党参的活性成分有20种、海藻6种,其中党参抗肝癌主要化合物是木犀草素、党参炔苷;海藻抗肝癌主要化合物是槲皮素、岩藻甾醇。党参、海藻“药对”化合物作用靶点共有964个,肝癌作用靶点有486个,化合物-肝癌共同作用靶点有32个,细胞表皮生长因子受体(EGFR)、蛋白激酶B(AKT1)、血管内皮生长因子A(VEGFA)与TP53为主要作用靶点。GO功能富集分析主要涉及细胞增殖、程序性死亡、凋亡负调控和催化等多个生物过程;胞质、细胞器和细胞核等结构;蛋白质二聚的分子功能。KEGG通路分析共得到信号通路190条,丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)-AKT为最主要的信号通路。MTT检测显示,与空白对照组(0 mmol/L)相比,岩藻甾醇各剂量组细胞存活率明显降低,差异均有显著性(均P<0.05)。结论:党参、海藻“药对”是多靶点、多通路治疗肝癌,为后续深入研究党参、海藻“药对”治疗肝癌的作用机制奠定基础,初步证明岩藻甾醇可以抑制人HepG2肝癌细胞的增殖。

摘要： 目的探讨黄连素(berberine,BE)对HSV-1病毒感染HEp-2细胞活性影响及其相关分子机制。方法构建感染细胞模型,分为对照组、感染组、BE低浓度组(5μmol·L^(-1)-BE)、中浓度组(10μmol·L^(-1)-BE)和高浓度组(15μmol·L^(-1)-BE),培养24 h。qRT-PCR测定HSV-1感染相关基因(gD、ICP-4、ICP-8、ICP-27)及LncRNA NRAV、miR-299-3p、RAB5C的mRNA表达水平;CCK-8法与流式细胞术分析检测细胞的活性与凋亡率;Western blot分析PI3K/AKT信号通路和JNK/p38 MAPK信号通路相关蛋白的表达水平。结果BE降低了gD、ICP-4、ICP-8、ICP-27的mRNA表达,提升了细胞活性,抑制了细胞凋亡,通过抑制LncRNA NRAV与RAB5C,促进miR-299-3p的表达,同时抑制了PI3K/AKT信号通路和JNK/p38 MAPK信号通路蛋白PI3K、AKT、JNK、p38的蛋白表达水平。结论BE能提升HSV-1感染后HEp-2细胞的活性,并抑制其凋亡,其机制可能与LncRNA NRAV、RAB5C靶向竞争结合miR-299-3p,抑制PI3K/AKT信号通路和JNK/p38 MAPK信号通路的激活有关。

摘要： 目的:探讨桃核承气汤含药血清对脂多糖(LPS)诱导的主动脉内皮细胞增殖及相关因子表达的影响。方法:将30只雄性SD大鼠随机分为2组,正常组与含药血清组各15只,含药血清组用桃核承气汤灌胃,正常组给予等剂量生理盐水灌胃,7 d后自腹主动脉取血,离心取血清,分装备用。用不同浓度梯度含药血清干预细胞,CCK-8法、流式细胞仪检测各浓度含药血清对内皮细胞增殖、凋亡的影响,确定10μmol/L为最佳干预浓度。将主动脉内皮细胞分为空白对照组(10%空白血清)、空白血清组(10%含药血清)、模型对照组(LPS+10%空白血清)、模型血清组(LPS+10%含药血清)。Western-blotting检测各组干预后的主动脉内皮细胞磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、转化生长因子(TGF-β)、假性蛋白激酶3(TRIB3)蛋白的表达。结果:与空白血清组、空白对照组相比,模型对照组的PI3K、Akt、TGF-β表达均下降,TRIB3表达含量上升,差异有统计学意义(P<0.05);经桃核承气汤含药血清培养后,与模型对照组相比,模型血清组的PI3K、Akt、TGF-β表达含量上升,TRIB3表达下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:桃核承气汤含药血清可以抑制TRIB3表达,促进PI3K、Akt和TGF-β表达,桃核承气汤含药血清能促进损伤内皮细胞新生,可能与PI3K/Akt信号通路有关。

摘要： 目的研究环状RNA核受体相互作用蛋白1(circNRIP1)在肺腺癌组织中的表达及临床意义,并探讨circNRIP1对肺腺癌细胞增殖和转移能力的影响和发挥作用的分子机制。方法采用qRT-PCR检测circNRIP1在肺腺癌组织和癌旁组织中的表达,并分析circNRIP1的表达与肺腺癌患者临床病理参数的关系及对肺腺癌患者预后的影响。常规培养肺腺癌细胞A549,转染circNRIP1 siRNA,分为si-NC组和si-circNRIP1-1组、si-circNRIP1-2组,qRT-PCR检测各组细胞中circNRIP1的表达,MTS检测各组细胞增殖能力,平板克隆实验检测各组细胞克隆形成能力,流式细胞仪检测各组细胞周期,Transwell实验检测各组细胞转移能力;Western blotting检测circNRIP1对PI3K/AKT信号通路关键蛋白表达影响。结果与癌旁组织相比,circNRIP1在肺腺癌组织中的表达显著升高(P<0.05),circNRIP1高表达与肺腺癌肿瘤分化程度、TNM分期和淋巴结转移显著相关(P<0.05),高表达circNRIP1的肺腺癌患者预后较差。与si-NC组相比,si-circNRIP1-1组和si-circNRIP1-2组肺腺癌细胞中circNRIP1的表达显著降低(P<0.05),肺腺癌细胞增殖、平板克隆形成能力和转移能力显著降低(P<0.05),细胞周期阻滞在G0/G1期(P<0.05)。干扰circNRIP1表达显著抑制肺腺癌细胞PI3K/AKT信号通路关键蛋白pPI3K和pAKT的表达及其下游靶蛋白cyclinD1和MMP2的表达。结论circNRIP1可能通过调控PI3K/AKT信号通路促进肺腺癌细胞的增殖和转移。

摘要： 磷脂酰激醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路作为经典的细胞信号转导途径,在细胞生长、增殖、分化和凋亡等多种生物学过程中发挥作用。脑出血是一种高致残率和高致死率的脑血管疾病,该通路在脑出血发生发展中的研究也备受关注。该文以PI3K/Akt信号通路为主线,对该通路的结构及生物学特点、与脑出血之间的关系以及基于该通路探讨药物对脑出血的作用进行综述,为临床脑出血的治疗提供新的思路。

摘要： 本发明涉及基于SREBP‑1/PI3K/AKT信号通路调控乳腺癌增殖迁移的抑制剂及其应用，所述抑制剂为短肽，所述短肽具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。本发明的抑制剂可以采用现有短肽合成技术生成，成本低，但是效果好，安全性高，选择性高。

摘要： 本发明公开了一种IL‑11单克隆抗体在抑制P13K/Akt信号通路中的应用，IL‑11单克隆抗体的浓度为8ug/mL；IL‑11单克隆抗体的用量为10ug。本发明寻找到了一种安全有效的P13K/Akt信号通路抑制剂(IL‑11单克隆抗体)，该抑制剂能特异性的结合细胞分泌的IL‑11，诱导PTEN的转录，上调PTEN的表达，抑制P13K/Akt信号通路下游的AKT的表达，达到抑制整条信号通路的作用。该抑制剂是天然抗体，因而减少毒副作用，安全有效。

摘要： 本发明涉及关于PRCP的拮抗剂、PREP的拮抗剂、或者PRCP以及PREP的双重拮抗剂的药物组合物。本发明也涉及关于联合使用PRCP的拮抗剂和mTOR的拮抗剂、联合使用PREP的拮抗剂和mTOR的拮抗剂、或者联合使用PRCP以及PREP的双重拮抗剂和mTOR的拮抗剂的药物组合物。此外，本发明还涉及治疗或预防癌症等与PI3K/AKT/mTOR信号通路相关的疾病的方法。

摘要： 本发明首次公开了一种18F标记的8‑乙氧基‑2‑(4‑氟苯基)‑3‑硝基‑2H‑色烯(S14161)及其制备方法，所述制备合成方法具有以下优势：制备原料廉价易得，合成工艺简单，反应条件温和，放射化学合成时间快捷；所得产物提纯分离简单方便，所得产物放射化学纯度超过98％，同时产物放射化学产率高，不校正产率高达92％，药物的放射性比活度高；所得产物具有用于肿瘤的检查诊断和肿瘤的放射治疗的价值。18F标记的8‑乙氧基‑2‑(4‑氟苯基)‑3‑硝基‑2H‑色烯其结构式如下所示：

摘要： METTL3抑制剂在制备抑制PI3K/Akt和ERK1/2信号通路的药物中的应用，本发明属于细胞内信号通路技术领域，是要解决现有PI3K/Akt和ERK1/2信号通路抑制剂存在副作用的问题。METTL3抑制剂在制备抑制PI3K/Akt和ERK1/2信号通路的药物中的应用。敲低METTL3能够抑制结肠癌细胞增殖，能够抑制结肠癌细胞侵袭、迁移和克隆形成，能够抑制EphA2和VEGFA的表达，抑制血管拟态的形成。本发明应用于结肠癌靶向药物的筛选领域。

摘要： 本发明涉及生物医药工程技术领域，具体涉及PI3K/ATK信号通路激活剂在制备预防或治疗心脏疾病药物的用途、药物组合物。本发明设计实验验证miRNA‑130a‑3p可部分通过激活PI3K/AKT信号通路，促进细胞自噬，抑制细胞凋亡，提高细胞活性，减轻LPS诱导的炎症性心肌细胞损伤。表明miRNA‑130a‑3p可以作为炎症性细胞损伤的治疗靶点，miRNA‑130a‑3p、miRNA‑130a‑3p模拟物、促进miRNA‑130a‑3p表达的活性成分可以作为PI3K/ATK信号通路激活剂，通过激活PI3K/ATK信号通路，减轻炎症性心肌细胞损伤，能够应用于治疗伴随有炎症性心肌损伤的心脏疾病。

摘要： 本发明涉及基于SREBP‑1/PI3K/AKT信号通路调控乳腺癌增殖迁移的抑制剂及其应用，所述抑制剂为短肽，所述短肽具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。本发明的抑制剂可以采用现有短肽合成技术生成，成本低，但是效果好，安全性高，选择性高。

摘要： 长链非编码RNA在增生性瘢痕中抑制PI3K/AKT信号通路中的应用，包括以下步骤：检测增生性瘢痕和瘢痕旁正常皮肤组织以及其来源的原代成纤维细胞中AKT蛋白的磷酸化水平；不同浓度的PI3K磷酸化抑制剂LY294002处理来源于增生性瘢痕原代成纤维细胞，并检测抑制剂LY294002对成纤维细胞的抑制率；采用锁核苷酸（LNA）技术干扰lncRNA FPASL表达，采用慢病毒过表达lncRNA FPASL并转染至增生性瘢痕原代成纤维细胞，并检测lncRNA FPASL的表达；干扰和过表达lncRNA FPASL后检测改变lncRNA FPASL后成纤维细胞p‑AKT、AKT的蛋白表达水平；PI3K磷酸化抑制剂LY294002处理干扰lncRNA FPASL后的成纤维细胞后，CCK8细胞活力测定分析成纤维细胞的增殖能力。本发明为增生性瘢痕的形成机制提供了新的视角，也为其治疗提供了潜在靶点。

摘要： 本发明涉及一种c‑Src/PI3K信号通路在生殖损伤保护中的应用，涉及生物技术和医学技术领域。本发明提供了一种c‑Src/PI3K信号通路作为靶点在制备用于治疗生殖损伤的药物中的应用，为开发天然生精药物提供新作用靶点。

摘要： 本发明公开左金丸对人胃癌耐药细胞ROCK/PTEN/PI3K信号通路的调控作用及其应用。本发明通过抑制ROCK、PI3K信号对ZJW诱导胃癌耐药细胞凋亡及周期的影响，结果显示：ZJW可以诱导SGC7901/DDP细胞凋亡；单独施加Y27623无明显变化；ZJW+Y27623联用对SGC7901/DDP细胞凋亡诱导明显低于单用ZJW，表明ROCK信号的激活是ZJW诱导凋亡的重要因素；单用LY294002对SGC7901/DDP细胞凋亡明显增加，表明PI3K信号是凋亡的抑制信号；联合应用ZJW+LY294002比单用ZJW对SGC7901/DDP细胞凋亡诱导作用进一步增加，表明两种处理方式具有协同作用。