吞噬活性

摘要： 为研究克氏原螯虾(Procambarus clarkii)Rab5(PcRab5)和Rab6(PcRab6)的生物学功能,利用同源重组技术构建了克氏原螯虾pET-B2m-PcRab5和pET-B2m-PcRab6原核表达载体,并进行了诱导表达和多克隆抗体的制备,采用ELISA和Western Blot技术检测了抗体效价和特异性。将PcRab5和PcRab6的原核表达蛋白和多克隆抗体注射到健康克氏原螯虾体内,研究了其对血淋巴细胞吞噬活性的影响。实验结果表明构建的pETB2m-PcRab5和pET-B2m-PcRab6原核表达载体经诱导后可表达目的蛋白,分子量均为67 kD,纯化后蛋白条带单一,纯度较高。重组表达纯化后的PcRab5和PcRab6蛋白免疫日本大耳兔分别获得效价为1:2048 K和1:512 K的兔抗血清,制备的抗体可分别特异性识别PcRab5和PcRab6蛋白。将PcRab5和PcRab6蛋白注射健康克氏原螯虾后,其血淋巴细胞中可吞噬荧光微球的细胞比例分别显著上升至38%和30%(P<0.01)。而将纯化的PcRab5和PcRab6多克隆抗体分别注射至螯虾体内后,其血淋巴细胞的吞噬细胞比例均出现显著下降(P<0.05),PcRab5和PcRab6蛋白参与了血淋巴细胞吞噬功能。实验为进一步研究克氏原螯虾PcRab5和PcRab6分子功能奠定基础,也可为理解甲壳动物Rab5和Rab6在血淋巴细胞吞噬功能中的作用提供帮助。

摘要： 为研究光棘球海胆的体液免疫机理,首先测定在不同反应基质中等量光棘球海胆吞噬细胞对不同处理的酵母细胞的吞噬率,其次比较分析从受调理酵母细胞和非调理酵母细胞以及光棘球海胆无细胞体腔液分离出成分的样品的电泳结果,随后将光棘球海胆无细胞体腔液进行提取分离后得到调理素样分子,最后于等渗缓冲溶液中测定等量光棘球海胆吞噬细胞在不同浓度调理素样分子和不同时间点作用下的吞噬率的变化.试验结果显示,光棘球海胆吞噬细胞分别在等渗缓冲液、经酵母细胞吸附过无细胞体腔液、光棘球海胆无细胞体腔液对非调理的酵母细胞和在等渗缓冲液中对受调理的酵母细胞的吞噬率之比为1.00:1.17:2.00:1.71.在3个样品里,仅有受调理酵母细胞分离出来的成分的电泳结果显示为1个明显条带.等渗缓冲溶液里,分别加入0.5、1.0、1.5 mL经纯化的调理素样分子后,4个时间点吞噬率均高于对照组,当调理素样分子浓度升高,吞噬率亦增加.试验结果表明,在光棘球海胆体腔液里含有某种调理素样分子,分子质量约156 ku,能促进光棘球海胆体腔液中吞噬细胞的吞噬作用.

摘要： 目的 探讨芪斛楂颗粒不同部位对小鼠巨噬细胞增殖、吞噬活性及细胞周期的影响.方法 取芪斛楂颗粒浸膏制备多糖部位(Fr.A)、非多糖水洗脱部位(Fr.B)、非多糖75％乙醇洗脱部位(Fr.C)及非多糖95％乙醇洗脱部位(Fr.D),取对数生长期的小鼠单核巨噬细胞株RAW264.7,分别加7.81、15.73、31.25、62.50、125.00、250.00、500.00及1000.00 mg/L芪斛楂颗粒Fr.A、Fr.B、Fr.C及Fr.D处理24 h,同时设空白组(不含药完全培养基);采用四唑盐(MTT)法检测各组RAW264.7细胞的吸光度(OD)值并计算细胞增殖率;取对数生长期RAW264.7细胞,分为空白组(完全培养基)、脂多糖(LPS)组(5.00 mg/L LPS)及低(30.00 mg/L)、中(60.00 mg/L)、高剂量(120.00 mg/L)Fr.A组,采用中性红吞噬试验测定各组RAW264.7细胞的OD值并计算中性红吞噬率,采用流式细胞术测定各组细胞周期.结果 MTT法检测显示,与空白组相比,15.73～1000.00 mg/L Fr.A和Fr.C组、500.00～1000.00 mg/L Fr.B组RAW264.7细胞的增殖率均上升(P0.05);中性红吞噬试验结果显示,与空白组比较,各质量浓度Fr.A组中性红吞噬率均上升(P0.05),G2/M期的细胞比例降低(P<0.05或P<0.01).结论 芪斛楂颗粒Fr.A、Fr.B及Fr.C部位能促进小鼠巨噬细胞RAW264.7的增殖,以Fr.A部位作用最强,且可促进RAW264.7细胞的吞噬能力,增加处于G0/G1期的巨噬细胞比例.

摘要： 为了探究脂多糖(LPS)对大黄鱼原代头肾巨噬细胞(PKM)的激活作用及其相应受体,采用流式细胞术检测LPS对大黄鱼PKM吞噬活性和氮呼吸爆发的影响,用实时荧光定量PCR检测LPS对3种促炎因子(IL-1β、IL-6、IL-8)和7种受体基因(TLR1、TLR2、TLR21、MR1、MR2、NOD1、NOD2)转录水平的影响.结果显示:0.1μg·mL-1 LPS可以显著提高大黄鱼PKM的吞噬能力(P<0.05),1、10、100μg·mL-1 LPS可以极显著地增强细胞的吞噬能力(P<0.01);1、10、100μg·mL-1 LPS可以极显著提高细胞的氮呼吸爆发(P<0.01);LPS可以显著上调3种促炎因子(IL-1β、IL-6、IL-8)和6种受体基因(TLR1、TLR2、TLR21、MR2、NOD1、NOD2)的表达水平,显著下调MR1的表达水平.研究表明,LPS对大黄鱼PKM有明显的激活作用,并刺激细胞向M1型巨噬细胞分化.

摘要： 目的探讨芪斛楂颗粒不同部位对小鼠巨噬细胞增殖、吞噬活性及细胞周期的影响。方法取芪斛楂颗粒浸膏制备多糖部位(Fr.A)、非多糖水洗脱部位(Fr.B)、非多糖75%乙醇洗脱部位(Fr.C)及非多糖95%乙醇洗脱部位(Fr.D),取对数生长期的小鼠单核巨噬细胞株RAW264.7,分别加7.81、15.73、31.25、62.50、125.00、250.00、500.00及1000.00 mg/L芪斛楂颗粒Fr.A、Fr.B、Fr.C及Fr.D处理24 h,同时设空白组(不含药完全培养基);采用四唑盐(MTT)法检测各组RAW264.7细胞的吸光度(OD)值并计算细胞增殖率;取对数生长期RAW264.7细胞,分为空白组(完全培养基)、脂多糖(LPS)组(5.00 mg/L LPS)及低(30.00 mg/L)、中(60.00 mg/L)、高剂量(120.00 mg/L)Fr.A组,采用中性红吞噬试验测定各组RAW264.7细胞的OD值并计算中性红吞噬率,采用流式细胞术测定各组细胞周期。结果MTT法检测显示,与空白组相比,15.73~1000.00 mg/L Fr.A和Fr.C组、500.00~1000.00 mg/L Fr.B组RAW264.7细胞的增殖率均上升(P0.05);中性红吞噬试验结果显示,与空白组比较,各质量浓度Fr.A组中性红吞噬率均上升(P0.05),G2/M期的细胞比例降低(P<0.05或P<0.01)。结论芪斛楂颗粒Fr.A、Fr.B及Fr.C部位能促进小鼠巨噬细胞RAW264.7的增殖,以Fr.A部位作用最强,且可促进RAW264.7细胞的吞噬能力,增加处于G0/G1期的巨噬细胞比例。

摘要： 目的:探讨仙茅多糖对小鼠巨噬细胞吞噬活性的影响.方法:采用不同浓度的仙茅多糖(500,250,125,62.5,31.25μg/mL)分别处理小鼠腹腔原代巨噬细胞和小鼠巨噬细胞株RAW264.7细胞,36 h后加入荧光标记的大肠杆菌,室温避光孵育1.5 h,荧光显微镜下观察不同剂量的仙茅多糖对两类细胞吞噬大肠杆菌活性的影响.结论:仙茅多糖呈剂量依赖性增强小鼠巨噬细胞的吞噬功能.

摘要： 实验以虹鳟为研究对象,选取17种中草药开展中草药免疫增强剂的体外快速筛选研究。采用Percoll密度梯度离心方法,对虹鳟外周血白细胞进行分离纯化实验。结果表明:白头翁、桂桔、白芨、大黄、贯众、红景天6种中草药的SPO显著高于对照组(P15%];白芨、厚朴、麻黄、丹参、大黄、马齿苋、泽泻、黄柏、苍耳子、贯众、红景天组的吞噬活性(PA)值显著高于对照组(P<0.05),蒲公英组的吞噬指数(PI)值显著高于对照组(P<0.05)。综合上述评价指标:白芨、大黄、贯众、红景天可作为虹鳟免疫增强剂的备选中草药。

摘要： 目的 探讨5-氨基酮戊酸光动力疗法(5-aminolevulinicacid photodynamic therapy, 5-ALA-PDT)对RAW264.7细胞吞噬活性和活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)的影响.方法 细胞实验研究用灭活痤疮丙酸杆菌诱导小鼠巨噬细胞株RAW264.7细胞,产生炎症细胞模型,给予不同浓度的5-ALA孵育RAW264.7细胞,并给予16 J/cm2红光照射.采用中性红法检测巨噬细胞的吞噬活性,荧光显微镜观察细胞内活性氧离子的荧光强度,2', 7'-二氯荧光黄双乙酸盐法(dihydrochloride acetyl acid dichloride,DCFH-DA)检测活性氧自由基水平.结果 模型组吞噬活性比空白组高,随着5-ALA浓度升高,吞噬活性降低 ,呈剂量依赖性.荧光显微镜下5-ALA 0.12 mmol/L组细胞内有大量红色荧光.随着5-ALA浓度升高,ROS水平升高,呈剂量依赖性.结论 5-ALA-PDT可对RAW264.7细胞吞噬活性和活性氧自由基产生影响,可能影响5-ALA-PDT的疗效.%Objective To explore the effect of 5-ALA-PDT on capability of phagocytosis and the level of ROS of murine macrophage RAW264.7 cells. Methods Murine macrophage RAW264.7 cells were induced by inactivated Propionibacterium acnes fluid to establish an inflammatory cell model, then the RAW264.7 cells were treated with different concentrations of 5-ALA combined with infrared radiation with a light dose of 16 J/cm2. The capability of phagocytosis of RAW264.7 cells was detected by using neutral red method. Fluorescence intensity of cellular reactive oxygen species(ROS) was detected by fluorescence microscopy, the level of reactive oxygen species(ROS) was detected by dihydrochloride acetyl acid dichloride. Results The capability of phagocytosis of the model group was higher than that of the blank group. With the increasing concentration of 5-ALA, the capability of phagocytosis decreased in a dose-dependent manner. The result of fluorescence showed that the cells in the 0.12 mmol/L 5-ALA group had strong red fluorescence. With the increasing concentration of 5-ALA, the level of ROS was increased in a dose-dependent manner. Conclusion 5-ALA-PDT can affect the phagocytosis and the level of ROS of murine macrophage RAW264.7 cells, which may affect the efficacy of 5-ALA-PDT.

摘要： 本文对1-6龄池蝶蚌血细胞的吞噬活性的变化进行了研究。通过池蝶蚌对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌和噬水气单胞茵吞噬过程的研究发现：池蝶蚌血细胞吞噬过程可由两种途径完成，一是血细胞伸出丝状或片状伪足。二是血细胞形态发生变形，形成凹陷。不同年龄的蚌血细胞对大肠杆菌的识别、吞噬能力不同。蚌血细胞的吞噬活性在1-4龄之间。随年龄的增长逐年递增，而4-6龄之间逐年递减，4龄蚌的吞噬活性最高，1龄蚌的最低；结果还发现，池蝶蚌6种血细胞中有吞噬活性的主要是颗粒细胞和透明细胞，浆液细胞和类颗粒细胞基本不具有吞噬活性。

摘要： 玉屏风散由黄芪、白术和防风等组成,具有扶正止汗、益气固表之功效,临床上主要用于体虚易感风寒等的治疗.现代研究表明,方中的黄芪等对机体的部分免疫指标具有促进作用,本文观察了玉屏风散对小鼠红细胞粘附功能及巨噬细胞吞噬活性的影响,以探讨其对机体的免疫调节作用.

摘要： 取SPF小鼠120只,分成三批,每批分为四个组.对照组接种灭菌水;试验1组接种自制发酵培养基:试验2组接种鼠李糖乳杆菌LT22 37°C、48h培养物;试验3组接种灭活的鼠李糖乳杆菌LT22培养物.所有小鼠均采用口腔接种,0.5mL/只/d,连续接种7d或13d.通过测定巨噬细胞吞噬活性、T淋巴细胞数量、血清溶血素含量及器官指数来反映鼠李糖乳杆菌LT22对小鼠免疫功能的影响.结果表明,所有试验组均能显著增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬活性,均能促进IgM的生成及脾脏和胸腺的发育;试验2组能显著增加T淋巴细胞的数量及血清溶血素的含量.

摘要： 目的:探讨宣肺祛痰口服液解热、抗炎、调节免疫药理作用,为临床治疗感染性疾病提供理论依据.方法:采用伤寒菌苗耳缘静脉注射于大白兔产生发热动物模型,观察宣肺祛痰口服液的解热作用;采用0.6％HAC对小鼠腹腔注射所致毛细血管通透性增高的动物模型,观察宣肺祛痰口服液的抗炎作用;采用小鼠尾静脉注射墨汁的方法,观察宣肺祛痰口服液调节免疫功能作用.结果:宣肺祛痰口服液对伤寒菌苗所致发热兔有明显的解热作用(P＜0.05、P＜0.01、P＜0.001),尤以中剂量(17.0ml/kg)为优(P＜0.01),解热效果明显优于抗病毒颗粒(P＜0.05);对0.6％HAC所致小鼠腹腔毛细血管通透性具有明显的抑制作用(P＜0.01),尤以大剂量(0.68ml/20g体重)为优(P＜0.001);对益得阁墨汁注入小鼠尾静脉后单核巨噬细胞的吞噬活性α、吞噬指数κ具有明显的促进作用(P＜0.01,P＜0.001),且大剂量组(0.68ml/20g体重)优于抗病毒颗粒(P＜0.05).结论:宣肺祛痰口服液具有明显的解热、抗炎、促进单核巨噬细胞吞噬功能的作用,为临床治疗感染性疾病提供了药理学依据.

摘要： 目的 探索N-CWS抗癌作用与其免疫机制的相关性.方法 采用免疫药理学方法检测N-CWS对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能和抑瘤活性的影响.结果 N-CWS对小鼠肉瘤S180的生长有明显的抑制作用,N-CWS明显激活小鼠腹腔巨噬细胞,增强对肿瘤细胞的细胞毒效应,显著提高MΦ的吞噬杀菌能力.结论 N-CWS具有非特异性激活腹腔内免疫细胞的作用.

摘要： 目的 探索N-CWS抗癌作用与其免疫机制的相关性.方法 采用免疫药理学方法检测N-CWS对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能和抑瘤活性的影响.结果 N-CWS对小鼠肉瘤S180的生长有明显的抑制作用,N-CWS明显激活小鼠腹腔巨噬细胞,增强对肿瘤细胞的细胞毒效应,显著提高MΦ的吞噬杀菌能力.结论 N-CWS具有非特异性激活腹腔内免疫细胞的作用.

摘要： 目的 探索N-CWS抗癌作用与其免疫机制的相关性.方法 采用免疫药理学方法检测N-CWS对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能和抑瘤活性的影响.结果 N-CWS对小鼠肉瘤S180的生长有明显的抑制作用,N-CWS明显激活小鼠腹腔巨噬细胞,增强对肿瘤细胞的细胞毒效应,显著提高MΦ的吞噬杀菌能力.结论 N-CWS具有非特异性激活腹腔内免疫细胞的作用.

摘要： 目的 探索N-CWS抗癌作用与其免疫机制的相关性.方法 采用免疫药理学方法检测N-CWS对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能和抑瘤活性的影响.结果 N-CWS对小鼠肉瘤S180的生长有明显的抑制作用,N-CWS明显激活小鼠腹腔巨噬细胞,增强对肿瘤细胞的细胞毒效应,显著提高MΦ的吞噬杀菌能力.结论 N-CWS具有非特异性激活腹腔内免疫细胞的作用.

摘要： 目的 探索N-CWS抗癌作用与其免疫机制的相关性.方法 采用免疫药理学方法检测N-CWS对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能和抑瘤活性的影响.结果 N-CWS对小鼠肉瘤S180的生长有明显的抑制作用,N-CWS明显激活小鼠腹腔巨噬细胞,增强对肿瘤细胞的细胞毒效应,显著提高MΦ的吞噬杀菌能力.结论 N-CWS具有非特异性激活腹腔内免疫细胞的作用.

摘要： 本发明涉及一种用于提高视网膜色素上皮细胞吞噬功能的活性肽及其应用，属于视网膜神经退行性疾病药物制备技术领域。本发明所述用于提高视网膜色素上皮细胞吞噬功能的活性肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述活性肽具有与Gas6全长蛋白相似生物特性，具有提高视网膜色素上皮细胞吞噬功能的作用。

摘要： 本发明涉及可吞噬有机污染物的绿色环保自降解生物活性酶，生物活性酶由5‑15重量份的植物蛋白提取液、1‑5重量的聚乙烯醇、1‑3重量份的多酚以及100重量份的去离子水组成，所述植物蛋白提取液在提取过程中加入鞣酸酶。本发明的生物活性酶能够能够有效去除有机污染物。

摘要： 本发明公开了一种利用流式细胞仪检测腹腔吞噬细胞活性的方法，旨在提供一种能够消除未吞噬荧光酵母细胞对分析结果的影响，对吞噬细胞吞噬酵母的个数进行定量分析，快速、准确、简单易行的检测吞噬细胞活性的方法。包括下述步骤：制备啤酒酵母细胞冻干粉；利用FITC标记啤酒酵母细胞；将荧光标记啤酒酵母细胞的悬液与小鼠血清室温孵育；将腹腔吞噬细胞悬液加入培养板的一个孔中；将与小鼠血清孵育后的荧光标记啤酒酵母细胞的悬液与同样的腹腔吞噬细胞悬液加入到细胞培养板中其余的孔中，将细胞培养板贴壁孵育；利用流式细胞仪获取数据并对数据进行分析。本发明方法较为准确的测定了吞噬率和吞噬指数，重复性好。

摘要： 本发明涉及一种用于提高视网膜色素上皮细胞吞噬功能的活性肽及其应用，属于视网膜神经退行性疾病药物制备技术领域。本发明所述用于提高视网膜色素上皮细胞吞噬功能的活性肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述活性肽具有与Gas6全长蛋白相似生物特性，具有提高视网膜色素上皮细胞吞噬功能的作用。

摘要： 本发明涉及可吞噬有机污染物的绿色环保自降解生物活性酶，生物活性酶由5‑15重量份的植物蛋白提取液、1‑5重量的聚乙烯醇、1‑3重量份的多酚以及100重量份的去离子水组成，所述植物蛋白提取液在提取过程中加入鞣酸酶。本发明的生物活性酶能够有效去除有机污染物。

摘要： 本发明属于抗感染免疫的技术领域，具体说是一种测定吞噬细胞杀伤结核杆菌的方法。其步骤包括：(1)结核杆菌体外培养后用荧光染料标记；(2)人或动物血液标本，或分离或培养的吞噬细胞，与荧光染料标记结核杆菌于37°C共孵育1至90分钟或更长时间后，洗涤除去未被吞噬结核杆菌；(3)将吞噬结核杆菌的吞噬细胞置于37°C1至90分钟或更长时间后，裂解吞噬细胞，释放出结核杆菌；(4)用流式细胞仪检测荧光降低的结核杆菌比例，计算吞噬细胞对结核杆菌的杀伤活性。本发明方法是应用荧光染料标记的结核杆菌被杀伤后荧光强度明显降低的原理，能在短时间内检测吞噬细胞对结核杆菌杀伤活性。其优点是操作简便和快捷，客观性和重复性好。

摘要： 本发明提供了一种具有增强巨噬细胞吞噬活性功能的组合物及其应用和免疫药物，涉及医药技术领域。本发明提供的具有增强巨噬细胞吞噬活性功能的组合物包括褐藻多糖和接骨木莓，发明人实验研究发现，褐藻多糖和接骨木莓均具有免疫调节功能，能够增强巨噬细胞的吞噬活性和抑制脂多糖诱导巨噬细胞分泌一氧化氮，将褐藻多糖和接骨木莓共同使用对于巨噬细胞吞噬活性的增强效果要明显优于单一组分，褐藻多糖和接骨木莓之间存在协同配合的作用，且安全可靠，能够用于制备增强巨噬细胞吞噬活性的药物。

摘要： 本发明公开了一种刺参体腔细胞吞噬活性的流式细胞检测方法，属于海洋生物技术领域，首先分离、制备刺参体腔液中的吞噬细胞，然后用荧光素异硫氰酸酯FITC标记热灭活后的酵母细胞，再将标记后的酵母细胞与刺参吞噬细胞共孵育，最后利用流式细胞仪测定吞噬活性。本发明准确性高、重复性好，而且操作简便快速，为探讨刺参体腔细胞吞噬功能提供了方法依据。

摘要： 本发明提供了一种具有增强巨噬细胞吞噬活性功能的组合物及其应用和免疫药物，涉及医药技术领域。本发明提供的具有增强巨噬细胞吞噬活性功能的组合物包括褐藻多糖和接骨木莓，发明人实验研究发现，褐藻多糖和接骨木莓均具有免疫调节功能，能够增强巨噬细胞的吞噬活性和抑制脂多糖诱导巨噬细胞分泌一氧化氮，将褐藻多糖和接骨木莓共同使用对于巨噬细胞吞噬活性的增强效果要明显优于单一组分，褐藻多糖和接骨木莓之间存在协同配合的作用，且安全可靠，能够用于制备增强巨噬细胞吞噬活性的药物。

摘要： 本发明公开了一种刺参体腔细胞吞噬活性的流式细胞检测方法，属于海洋生物技术领域，首先分离、制备刺参体腔液中的吞噬细胞，然后用荧光素异硫氰酸酯FITC标记热灭活后的酵母细胞，再将标记后的酵母细胞与刺参吞噬细胞共孵育，最后利用流式细胞仪测定吞噬活性。本发明准确性高、重复性好，而且操作简便快速，为探讨刺参体腔细胞吞噬功能提供了方法依据。