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一种基于第三代测序的单细胞转录组测序方法

摘要

本发明提供了一种基于第三代测序的单细胞转录组测序方法,所述方法包括以下步骤:(1)采用逆转录引物对单细胞RNA进行逆转录,得到带有条形码的cDNA;(2)对带有条形码的cDNA进行PCR扩增,将获得的不同单细胞来源的PCR扩增产物混合;或将不同单细胞来源的带有条形码的cDNA混合后进行PCR扩增;所述逆转录引物从5’端到3’端依次为锚定序列、条形码序列和poly dT。本发明在逆转录引物中添加条形码序列对单细胞全长RNA进行逆转录,实现了对不同单细胞来源的序列进行标记,对不同来源的DNA扩增产物混合达到了第三代测序平台对模板量的要求,利用第三代测序平台实现了对全长转录本的精确测序。

著录项

  • 公开/公告号CN111549099B

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2021-07-30

    原文格式PDF

  • 申请/专利权人 生物岛实验室;

    申请/专利号CN202010327919.7

  • 发明设计人 范小英;苏丹;

    申请日2020-04-23

  • 分类号C12Q1/6806(20180101);C12Q1/6869(20180101);

  • 代理机构11332 北京品源专利代理有限公司;

  • 代理人巩克栋

  • 地址 510000 广东省广州市海珠区广州国际生物岛螺旋三路6号

  • 入库时间 2022-08-23 12:13:05

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