microRNA抑制剂、microRNA抑制剂表达载体及其构建方法和应用

摘要

本发明公开一种microRNA抑制剂、microRNA抑制剂表达载体及其构建方法和应用，所述一种microRNA抑制剂为双拷贝miRNA粘附分子，由通用直链互补序列、通用茎环序列及2个miRNA结合区序列3部分组成。在构建好的表达载体中含有2个dMAN的表达框架，可以同时转录相同或不相同的两个MAN，载体利用率更高，病毒颗粒的使用量以及毒性更小。在构建方法上，本发明所述构建dMAN的方法更加经济，只需要合成2对不超过60个碱基的引物，通过2次PCR及其酶切和连接技术便可完成一个包含两个MAN结构miRNA抑制载体的一步克隆构建。