在包含木薯渣或菠萝蜜种子作为碳源的发酵培养基中利用谷氨酸棒杆菌ATCC 21831或谷氨酸棒杆菌ATCC 21493生产精氨酸的方法

摘要

本发明公开了通过发酵生产精氨酸的方法，其中通过酶促淀粉水解从廉价的、含淀粉农业废弃物例如木薯渣和菠萝蜜种子粉中获得的糖在微生物存在条件下发酵产生含精氨酸的发酵液，并从所述发酵液中回收精氨酸。该方法可以经济地放大以利用非精制糖源生产精氨酸，因为其与较昂贵的合成碳源例如右旋糖或蔗糖相比，能以更高产率生产精氨酸。

说明书

发明背景 

本发明涉及通过发酵生产L-精氨酸的生物过程。实施方案包括通过酶促淀粉水解从廉价的、含淀粉农业废弃物(例如亚洲和非洲国家盛产的木薯渣和菠萝蜜种子粉)中得到的还原糖。所述方法通过使用非精制糖源取代昂贵的合成碳源例如右旋糖或蔗糖，可以经济地放大以生产精氨酸。 

对于氨基酸日益增长的市场需求使得学术界和工业家研制高效、经济的生产氨基酸的新方法。推动氨基酸生产的技术竞争主要涉及四种方法——从蛋白水解产物中提取、化学合成、酶水解和发酵。从经济角度考虑，除了几种情形没有达到高产率外，发酵在工业上是可行的，并得到了广泛应用。该方法的节省主要取决于碳源成本、发酵产率、纯化产率和整个过程的生产率。棒杆菌产生的氨基酸的市值不断增加使得生物过程和下游处理技术发展迅速。这推动了生产率和降低生产成本的成果(Thomas Hermann，″Industrial production of amino acids by coryneform bacteria，″Journal of Biotechnology 104 155-172(2003))。因此，需要在工业生产中应用影响L-精氨酸产量的任何自然过程。 

L-精氨酸是一种条件必需氨基酸，所谓的取决于个体发育阶段和健康状况。精氨酸通过增加T-细胞产量激活免疫系统；有助于血管舒张、维持肌肉健康、清除机体氨和释放激素。通常来讲，L-精氨酸通过三种方法生产：(i)从蛋白水解产物中提取；(ii)化学合成；和(iii)酶水解(Takishi Utagawa，″Production of Arginine by fermentation，″J.Nutr.134：2854S-2857S(2004))。后来发现L-精氨酸可以通过棒杆菌(Corynebacterium)和短杆菌(Brevibacterium)的烃同化野生型菌株进行小量生产(美国专利NO.3,222,258和3,440,141)，其突变株利用碳水化合物产生甚至更高的量(英国专利No.1,278,917)。 

在各种微生物的调控突变体(regulatory mutant)中，谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)显示出较高的L-精氨酸产量(Hajime Yoshida，Kazumi Araki and Kiyoshi Nakayama，″Arginine Production by Arginine  Analog-resistant Mutants of Microorganisms，″Agric，Biol.Chem.，45(4)，959-963(1981))。某些典型的产精氨酸突变体是对2-噻唑丙氨酸(美国专利No.3,723,249和美国专利No.3,878,044)和刀豆氨酸(美国专利No.3849250；英国专利No.1,351,518)具有抗性的棒杆菌属。杆菌属(Bacillus)(美国专利No.3,734,829和美国专利4086137、美国专利4430430)和埃希氏菌属(Escherichia)(美国专利4430430，美国专利6897048)突变体也已被发现能够大量生产精氨酸。 

Kisumi等首次报道了通过微生物发酵以可观的量生产L-精氨酸，″Production of L-Argroine by Arginine Hydroxamate-Resistant Mutants of Bacillus subtilis，″Appl.Microbiol.22，987(1971)。众所周知，氧气供应对于微生物的好氧氨基酸生产具有重要影响(Takishi Utagawa，″Production of Arginine by fermentation，″J.Nutr.134：2854S-2857S(2004))。厌氧条件下生长常常导致有毒副产物例如乙酸和乙醇的形成，其继而强烈抑制L-精氨酸的产生(J.Gong，J.Ding，H.Huang，Q.Chen，Kinetic study and modeling on L-arginine fermentation，Chin.J.Biotech.9(1)9-18(1993))。 

木薯(Manihot esculenta)渣已被用于由干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)和德氏乳杆菌(Lactobacillus delbrueckii)生产L-(+)-乳酸(Rojan P.John，K.Madhavan Nampoothiri and Ashok Pandey，Applied Biochemistry and Biotechnology，Vol 34，p263-272(2006)；Rojan P.John，K.Madhavan Nampoothiri and Ashok Pandey，″Solid state fermentation for L-lactic acid production from agro wastes using Lactobacillus delbrueckii，″Process Biochemistry，Voi.41p：759-763(2006))。其还被用于通过固态发酵(SSF)生产赤霉酸(A.Tomasinil，C Fajardo and J.Barrios-Gonza′lez，″Gibberellic acid production using different solid-state fermentation systems，″Vol 1.p203-206(1997)和柠檬酸(Flavera Camargo Prado，Luciana Porto de Souza Vandenberghe and Carlos Ricardo Soccol，″Relation between Citric Acid Production by Solid-State Fermentation from Cassava Bagasse and Respiration of Aspergillus niger LPBSemi-Pilot Scale，”Brazilian archives of Biology and Technology，Vol.48，Special n.：pp.29-36(2005))。最近，Ubaid等报道了其在γ-亚麻酸生产中的应用(Syed Ubaid et al.，″Enrichment of γ-linolenic acid in the lipd extracted from Mucor zychaeMTCC5420，″Food Research International，Volume 42，issue 4，May 2009，Pages449-453)。 

相似地，菠萝蜜种子粉已被用于生产色素(Sumathy Babitha，Carlos R.Soccol and Ashok Pandey，″Jackfruit Seed-A Novel Substrate for the Production of Monascus Pigments through Solid-State Fermentation，″Food T chnol.Biotechnol，44(4)465-471(2006))和生产聚羟基丁酸酯(Ramadas NV，Soccol CR，Pandey A Appl Biochem Biotechnol，″A Statistical Approach for Optimization of Polyhydroxybutyrate Production by Bacillus sphaericus NCIM 5149 under Submerged Fermentation Using Central Composite Design，″Appl.Biochem.Biotechnol.(2009))。 

现存的精氨酸发酵方法存在某些弊端，包括例如：缺少能生产精氨酸的野生型培养物(culture)，这与谷氨酸不同，野生型谷氨酸棒杆菌能大量生产谷氨酸。也难以制备能生产精氨酸的营养缺陷型突变体，因此需要通过遗传工程改进菌株使之适于生产精氨酸。此外，由于使用纯葡萄糖作为唯一碳源，制备精氨酸的生产成本相对较高。因此，需要一种利用现有菌株、能提高产量的廉价替代方法。 

发明概述 

下面的说明具体描述并确定了本发明的特点及其实施方式。“利用含有农业残余底物(菠萝蜜种子粉或木薯渣一类的天然淀粉)的水解产物作为主要碳源的生产培养基进行微生物生产L-精氨酸，所述水解产物之前未曾被尝试用于利用谷氨酸棒杆菌生产氨基酸例如精氨酸”。 

本发明实施方案的一个特征是：利用由当地可以获得的农业废弃物材料制作的水解产物替代纯糖类来培养能产氨基酸的谷氨酸棒杆菌菌株。本发明实施方案的另一特征是：开发适合用农业废弃物材料水解产物作为主要碳源生产L-精氨酸以及在谷氨酸棒杆菌存在下发酵碳源的生物方法。本发明实施方案的另一特征是从发酵后的发酵液中纯化精氨酸。 

根据实施方案的一个特征，提供了一种通过农业废弃物发酵制备精氨酸的方法，包括：将农业废弃物在谷氨酸棒杆菌ATCC 21831或谷氨酸棒杆菌ATCC21493中的至少一种存在的条件下进行发酵以产生含有精氨酸的发酵液，并从所述发酵液中回收精氨酸。 

根据实施方案的另一特征，提供了一种从选自木薯渣、菠萝蜜种子粉及它们混合物的含淀粉农业废弃物材料制备L-精氨酸的方法，包括：酶水解农业废弃 物材料，优选使55-85％，优选60-75％，甚至更优选65-68％的农业废弃物底物转化成还原糖，在谷氨酸棒杆菌ATCC 21831或谷氨酸棒杆菌ATCC 21493中的至少一种存在的条件下发酵还原糖(优选作为唯一碳源)产生含有精氨酸的发酵液，并且从发酵液中回收精氨酸。 

从下面的详细描述容易看出本发明的这些和其它特征和优点是显而易见的。 

发明详述 

在阅读本文所述的本发明说明书时必须考虑下列定义和非限制性指南。本文使用的标题(如“背景”和“概述”)和副标题(如“组合物”和“方法”)在本发明公开的范围内仅用作一般的标题结构，不构成对本发明公开内容或其任何方面的限制。尤其是，“背景技术”中披露的主题可以包括本发明范围内的技术特征，不是对现有技术的叙述。“概述”中所公开的主题不是本发明全部范围或其任何实施方案的穷举或完整披露。为了方便起见，在说明书的章节中将材料分类或论述为具有特定的效用(例如作为“活性”或“载体”成分)，但不能由此断定，当所述材料用于任何既定组合物时该材料必须或者唯独根据本文对其所作的分类来起作用。 

本文引用参考文献不应构成所述参考文献是现有技术或与本文所公开发明的专利性有任何关联的认可。导言部分对于引用的参考文献内容的讨论仅旨在提供参考文献作者断言的概述，不构成对所述参考文献内容准确性的认可。 

表示本发明实施方案的详细说明和具体实施例仅用作说明目的，不作为对本发明范围的限制。此外，具有所述特征的多个技术方案的表述并不排除具有另外特征的其它实施方案或整合了所述特征不同组合的其它实施方案。提供了具体的实施例用来说明如何制备和使用所述组合物并应用本发明方法，除非有明确指示，否则不应视为代表本发明的既定实施方案经过或未经过实施或测试。 

本文所用的术语“优选”指在一定条件下具有某些优点的本发明实施方案。然而，在相同或其它情况下，也可能优选其它实施方案。而且，对一个或多个优选实施方案的描述并不意味着其它实施方案没用，也不排除本发明范围内的其它实施方案。此外，所述组合物和所述方法可能包括其中所述的要素、主要由所述要素组成或由所述要素组成。 

通篇使用的“范围”这一简写描述所述范围内的每一个值。所述范围内的任何值均可被选择作为范围的终点。此外，本文引用的所有对比文件整体上以参考 的方式引入本文中。当本申请公开内容中的定义与引用文件中的定义冲突时，以本申请的公开内容为准。 

除非另外指出，此处以及说明书别处表述的所有百分数和数量应被理解为重量百分比。给出的数量基于材料的有效重量。本文对于特定值的表述，不论是指组分各自的量还是实施方案的其它特征，表示数值加上或者减去测量中的误差变异程度。例如，在测量误差的程度被本领域技术人员认可和理解的前提下，数量10％可以包括9.5％或10.5％。 

术语“农业废弃物”指来自农产品加工的任何废弃物。例如PRODUCTS FROM WASTE(INDUSTRIAL AND AGRO WASTE)，National institute of Industrial Research，(2003)；Garcia-Reyes Refugio，et al.，″Contribution of agro-waste material main components(hemicelluloses，cellulose，and hgnin)to the removal of chromium(III)from aqueous solution，″J.of Chem.Tech.&Biotech.，Vol.84，No.10，1522-1538(Oct.10，2009)中描述了农业废弃物的各种形式。在优选的实施方案中，农业废弃物包括甘蔗渣、纤维素、木质素、半纤维素、种子粉、木薯渣或菠萝蜜种子粉。 

本发明包括通过农业废弃物发酵制备精氨酸的方法，包括在谷氨酸棒杆菌ATCC 21831或谷氨酸棒杆菌ATCC 21493中的至少一种存在的条件下使农业废弃物发酵，优选在20℃-50℃的温度范围内以及5-8的pH范围内反应12小时-2周，产生含精氨酸的发酵液；并且从所述发酵液中回收精氨酸。 

已经报道了利用农业废弃物原料作为主要碳源进行微生物的各种代谢生产，例如酶、有机酸如乳酸、色素。不受任何理论限制，本申请发明人认为利用廉价原料生产氨基酸的生物技术过程可以进一步改进，以使它们能够与化学方法相竞争。例如，发明人考虑到它们淀粉含量高和之前在各种生物过程中的成功应用，选择了两种底物-菠萝蜜和木薯渣。 

菠萝蜜(木波罗(Artocarpus heterophyllus))是生长于亚洲的、最流行的热带水果之一。作为所有树上生长的水果中最大的一种，菠萝蜜的单个果实含有100-300颗种子。种子占果实总重量的大约10-15％，糖和蛋白质含量高(S.Kumar，A.B.Singh，A.B.Abidi，R.G.Upadhyay，A.Singh，，″Proximate composition of jackfruit seeds，″J.FoodScL Tecknol.25.141-152(1988))。 

种子通常被丢弃或者蒸熟后作为零食食用或用于地方菜式。种子经晒干并磨 成粉得到菠萝蜜种子粉或末。淀粉水解后从粉末(flour)中获得的糖可有效用于发酵生产有机化合物。菠萝蜜种子淀粉的糊化温度(gelatinization temperature)范围较窄，因此跟改良淀粉相比需要的糊化能量较少，从而降低淀粉水解成本。下面的表1描述了菠萝蜜种子的物理-化学性质。 

表1：菠萝蜜种子的物理-化学组成 

  参数   菠萝蜜   湿度   2.78   灰分   6.72   粗蛋白   20.19   粗脂肪   11.39   粗纤维   7.10   糖类   51.82

来源：Ibironke Adetolu Ajayi，“Comparative study of the chemical composition and mineral element content of Artocarpus heterophyllus and Treculia Africana seeds and seed iols，”Bioresource Technology，Vol 99(11)，5125-5129(2007). 

木薯(Manihot esculenta Cranz)，热带根类作物，是热带地区仅次于水稻和玉米的的第三大能量来源。在世界主要粮食作物中木薯排在第四位，超过8亿人食用(Elkholy H，Eltantawy A，′The world of cassava production：an overview，″Journal of Root Crops，26：1-5(2000))。对于木薯块茎的工业加工主要在于分离粉末和淀粉，其会产生较多的液体和固体残余(粉末加工产生固体残渣，而淀粉加工产生较多液体残余)。固体残渣包括棕色壳皮(brown peel)、内皮(inner peel)、不可用根、渣滓和粉末废物，其中渣滓是主要残留物。加工大约250-300吨的新鲜块茎产生大约280吨的湿木薯渣。木薯渣由须根材料构成并含有淀粉，其不能进行物理加工。不良加工条件可能导致木薯渣中的淀粉含量更高。下面的表2显示了木薯渣的物理-化学组成。 

表2：木薯渣的物理-化学组成 

来源：Pandey A.，Soccol C.R.Nigam P.，Soccol V T，Vandenberghe LPS，Mohan R，“Biotechnology potential of sgro-industrial residues，Ⅱ：cassava bagasse，Bioresource Technology 74：81-87(2000). 

精氨酸，优选L-精氨酸，可通过以下方式生产：在微生物存在条件下通过发酵单独或组合使用的农业废弃物(例如上述的农业废弃物)产生含精氨酸的混合物，然后任选地从所述混合物中分离精氨酸。适宜的微生物包括选自以下的微生物：乳酸发酵短杆菌(Brevibacterium lactofermentum)ATCC 21798、乳酸发酵短杆菌ATCC 21799、乳酸发酵短杆菌ATCC 21800、乳酸发酵短杆菌ATCC21801、乳酸发酵短杆菌ATCC 21086、黄色短杆菌ATCC 21475、黄色短杆菌ATCC 21127、黄色短杆菌ATCC 21128、黄色短杆菌ATCC 21129、黄色短杆菌ATCC 21474、黄色短杆菌ATCC 21493、黄色短杆菌ATCC 21406、黄色短杆菌ATCC 21605、产氨短杆菌(Brevibacterium ammoniagenes)ATCC 19355、嗜乙酰乙酸棒杆菌(Corynebacterium acetoacidophilum)ATCC 21476、嗜乙酰乙酸棒杆菌ATCC 21407、谷氨酸棒杆菌ATCC 21831、谷氨酸棒杆菌ATCC 13286、谷氨酸棒杆菌ATCC 21659、谷氨酸棒杆菌ATCC 21339、醋谷棒杆菌(Corynebacterium acetoglutamicum)ATCC21491及它们的混合物。 

本发明优选使用的微生物是谷氨酸棒杆菌突变株，尤其是对精氨酸类似物耐受的突变体，名为谷氨酸棒杆菌ATCC 21831(美国专利No.3849250，其公开的内容整体上通过引用合并到本文中)和谷氨酸棒杆菌ATCC 21493(黄色短杆菌ATCC 21493)(美国专利No.5196326，其公开的内容整体上通过引用合并到本文中)，它们来自美国典型菌种保藏中心。培养物优选维持在LBG培养基(补充葡萄糖的LB液体培养基)中，每两周进行传代培养。 

本发明优选使用的培养基是天然培养基，由优选量的碳源、氮源、无机盐和 所用菌株生长所需的少量的微量无机营养物组成。本发明优选的碳源包括葡萄糖或任何含淀粉材料(优选木薯渣或菠萝蜜种子粉)的淀粉水解产物，其通过使用适宜的淀粉糖化酶酶水解得到。淀粉糖化酶是本领域熟知的。适宜的淀粉糖化酶包括，例如在文献Sasaki，et al.，″Screening of Microorganisms for Raw Starch Saccharifying Enzyme Production，″Agric.Biol.Chem.，50(6)，1661-1664(1986)；Achi，et al.，″Production of a raw starch saccharifying amylsase by Bacillus alvei grown on different agricultural substrates，″World J.Microbiol.And Biotech.，8，206-207(1991)中所描述的。其中包括，例如淀粉酶、葡萄糖淀粉酶、支链淀粉酶、Corticium rolfsii AHU 9627等。可以使用本领域熟知的技术结合本文提供的指南，针对每一种底物对水解过程进行优化。在优选的实施方案中，使用相同的发酵微生物，以木薯渣和/或菠萝蜜种子粉的淀粉水解产物发酵与利用纯糖例如右旋糖发酵相比，能得到更高的产率。 

对于氮源，可使用无机氮盐例如氯化铵和其它常规有机氮源例如Nz胺、酪蛋白水解物、玉米浆(corn steep liquor)等。可优选使用磷酸一氢钾、磷酸二氢钾、硫酸镁、硫酸亚铁、硫酸锰、碳酸钙等无机盐。各种微量物质，例如生物素和硫胺素，也可以视本发明所用菌株的需要添加到培养基中。 

培养优选在通过搅拌或震荡创造的有氧条件下进行。例如，实验室规模的细胞培养可以在具有适当搅拌的旋转摇床上、于250ml Erlenmeyer培养瓶中、在浸没条件下有氧进行。本领域技术人员能够放大该过程以产生商业数量的精氨酸。培养温度为20℃-50℃，更优选25℃-40℃，甚至更优选27℃-36℃，最优选30℃-32℃。发酵的pH范围优选4-9，优选5-8，更优选5.5-7.5，甚至更优选6-7，最优选pH维持接近中性。还优选添加少量(1-5个单位)的β内酰胺抗生素例如青霉素，以提高氨基酸流出量(efflux)。通常来讲，为了积累足够量的精氨酸，发酵持续的时间为12小时-2周，优选1天-10天，最优选2-6天，视培养条件和初始糖量而定。 

发酵结束后，存在于发酵液中的精氨酸可被分离出来，例如通过常规方法如离子交换树脂处理或沉淀去除微生物细胞和其它任何沉淀物。经丹磺酰氯衍生化后，可通过TLC对培养液(发酵液)中积累的精氨酸进行定性测定，并通过HPLC进行定量。可使用强酸性阳离子交换树脂例如安伯莱特(Amberlite)进行精氨酸的标准化部分纯化和回收。 

本领域普通技术人员将能理解本文所述的方法也可用于生产其它氨基酸，例如谷氨酸和其它碱性L-氨基酸或酸性L-氨基酸如赖氨酸。 

对本发明进行大致描述后，参照下面为了说明目的而提供的具体实施例能够进一步理解。 

本发明的具体实施方式 

实施例1：

将谷氨酸棒杆菌ATCC 21831培养18小时的接种物接种到发酵培养基中，其组成含有：相当于6％右旋糖的菠萝蜜种子粉水解产物、0.05％K₂HPO₄、0.05％KH₂PO₄、3％(NH₄)₂SO₄、0.025％MgSO₄.7H₂O、0.001％FeSO₄.7H₂O、0.001％MnSO₄.4H₂O、0.5％Nz-胺、50μg/l生物素、2mg/l硫胺素、500μl玉米浆和2％CaCO₃。pH维持中性。于32℃震荡培养总共120小时，最终得到2.27mg/ml的精氨酸累积。在24、48、72、96和120小时的间隔对在120小时的整个过程中产生的精氨酸进行定量。结果显示于下面的表3中。 

表3.-在菠萝蜜种子水解产物中利用谷氨酸棒杆菌ATCC 21831生产精氨酸 

实施例2：

将产L-精氨酸的谷氨酸棒杆菌(ATCC 21831)突变株在由0.5％右旋糖、0.5％氯化钠、0.5％酵母提取物、0.5％蛋白胨、0.2％酪蛋白酶水解产物组成的培养基中震荡培养18小时，得到发酵用的种子培养物。发酵培养基(25ml)装入250mlErlenmeyer培养瓶中，接种5％的种子培养物，于32℃在旋转摇床上培养。发酵液由相当于8％右旋糖的木薯渣水解液、0.05％K₂HPO₄、0.05％KH₂PO₄、3％(NH₄) ₂SO₄、0.025％MgSO₄.7H₂O、0.001％FeSO₄.7H₂O、0.001％MnSO₄.4H₂O、0.5％Nz-胺、50μg/l生物素、2mg/l硫胺素、500μl玉米浆和2％CaCO₃组成。pH调至中性。培养过程中向发酵培养基中补充内酰胺抗生素。经过48小时的培养，发酵液中积累的L-精氨酸的量为1.63mg/ml，其代表L-精氨酸的最高浓度。在24、48、72、96和120小时的间隔对在120小时的整个过程中产生的精氨酸进行定量。结果显示于下面的表4中。 

表4.-在木薯渣水解产物中利用谷氨酸棒杆菌ATCC 21831生产精氨酸 

实施例3：

为了利用谷氨酸棒杆菌突变株具体是谷氨酸棒杆菌ATCC 21493通过深层发酵生产L-精氨酸，通过在由0.5％右旋糖、0.5％氯化钠、0.5％酵母提取物、0.5％蛋白胨、0.2％酪蛋白酶水解产物组成的培养基中于30℃震荡培养18小时制备接种物。将5％的所得接种液移入25ml批次发酵培养基中。上述发酵培养基是由相当于6％右旋糖的菠萝蜜种子粉水解产物、0.05％K₂HPO₄、0.05％KH₂PO₄、3％(NH₄)₂SO₄、0.025％MgSO₄.7H₂O、0.001％FeSO₄.7H₂O、0.001％MnSO₄.4H₂O、0.5％Nz-胺、50μg/l生物素、2mg/l硫胺素、500μl玉米浆和2％CaCO₃组成的液体天然培养基。 

发酵于32℃进行96小时。初始培养阶段补充内酰胺抗生素。经过96小时的培养，发酵液中累积的L-精氨酸最多为1.93mg/ml。在24、48、72、96和120小时的间隔对在120小时的整个过程中产生的精氨酸进行定量。结果显示于下面的表5中。 

表5.-在菠萝蜜种子水解产物中利用谷氨酸棒杆菌ATCC 21493生产精氨酸 

实施例4：

下面的表6显示了利用谷氨酸棒杆菌ATCC 21831在上述实施例1和2描述的适于该菌株的特定条件下、利用不同的生产培养基发酵产生L-精氨酸的最大产量的比较。发明人意想不到地发现：与使用纯右旋糖作为碳源的常规培养基相比，在以水解产物为基础的培养基中精氨酸的产量更高。 

表6.-在不同培养基中利用谷氨酸棒杆菌ATCC 21831生产L-精氨酸 

本文所描述的实施方案为精氨酸的生产提供了独特的优势，并且利用廉价农业废弃物生产精氨酸的产率出乎意料地优于利用纯碳源例如右旋糖的产率。一个优点是使用或循环利用农业废弃物例如木薯渣或菠萝蜜种子，否则将仍未被利用或丢弃。另一优点是使用替代方法减少发酵时对昂贵的精制糖例如右旋糖的使用。还有一个优点是使用基于水解产物的培养基与使用较昂贵的右旋糖培养基相比，精氨酸产量相对较高。 

以上结合说明性质的实施例对本发明进行了描述，但应该理解本发明不限于所公开的实施方案。本领域技术人员阅读本说明书后想到的改变或修改也落入所附的权利要求限定的本发明保护范围之内。