溃疡性结肠炎小鼠结肠组织中miR-21及JNK/AP-1信号通路相关标志物的表达

摘要

cqvip:目的探讨溃疡性结肠炎(UC)小鼠结肠组织中微小RNA-21(miR-21)及c-Jun氨基末端激酶(JNK)/转录激活蛋白1(AP-1)信号通路相关标志物的表达。方法将16只C57BL/6小鼠随机分为对照组和模型组各8只。模型组小鼠自由饮用2.5%葡聚糖硫酸钠水溶液6 d建立急性UC模型,对照组小鼠自由饮用双蒸水。观察小鼠一般情况,按Cooper法进行小鼠疾病活动度(DAI)评分。造模第11天处死小鼠,取结肠组织,量取结肠长度。RT-PCR法检测结肠组织中miR-21、JNK1、JNK2、c-Jun mRNA表达,Western blotting法检测结肠组织中p-JNK、p-Ser63、p-Ser73蛋白表达,采用染色质免疫共沉淀实验检测结肠组织中miR-21与c-Jun的相互作用。结果与对照组比较,模型组造模第2天开始DAI评分持续升高,直至实验结束;模型组小鼠结肠长度短于对照组(P<0.01)。与对照组比较,模型组结肠组织中miR-21相对表达量高(P<0.01),JNK1、JNK2 mRNA相对表达量低(P均<0.01),c-Jun mRNA相对表达量高(P<0.01),p-JNK、p-Ser63、p-Ser73蛋白相对表达量高(P均<0.01)。染色质免疫共沉淀实验结果显示在AP-1孔处并未出现条带,表明c-Jun蛋白并未与miR-21启动子区AP-1位点结合。结论UC小鼠结肠组织中miR-21呈高表达;JNK/AP-1信号通路相关标志物JNK1、JNK2呈低表达,c-Jun、p-JNK、p-Ser63、p-Ser73呈高表达。但JNK信号通路并未直接通过下游转录因子c-Jun调节miR-21的表达。