CRY2过表达对肝癌细胞增殖及生物钟基因、蛋白表达的影响

摘要

目的 观察CRY2过表达对肝癌细胞系HepG2增殖及生物钟基因、蛋白表达的影响.方法 将HepG2细胞分为实验组和对照组,分别转染CRY2过表达病毒上清液及阴性对照病毒上清液,以未转染的HepG2细胞为空白组,分别于转染24、48、72、96 h后采用CCK-8实验观察细胞增殖能力变化.采用real-time PCR法检测实验组和对照组细胞中的生物钟基因CLOCK、BMAL1、PER1、PER2、PER3、DEC1、DEC2、CRY1、CRY2、NPAS2,采用Western blotting法检测上述生物钟基因蛋白.结果 转染48、72、96 h后,实验组细胞增殖能力较对照组和空白组降低(P均<0.05).实验组细胞中PER1、PER2、PER3、CLOCK、CRY1、CRY2、BMAL1、NPAS2、DEC2 mRNA及蛋白相对表达量均高于对照组,DEC1 mRNA及蛋白相对表达量均低于对照组(P均<0.05).结论 CRY2过表达可抑制肝癌细胞增殖,同时在mRNA及蛋白水平上调相关生物钟基因表达.CRY2表达上调后可能通过调控生物钟网络从而抑制肝癌细胞的增殖能力.