TRIM59在人肝癌细胞中表达变化及其对细胞增殖、P53蛋白表达的影响

摘要

cqvip:目的观察三结构域蛋白59(TRIM59)在人肝细胞癌(HCC)细胞中的表达变化,及其对细胞增殖和p53蛋白表达的影响。方法选取6种HCC细胞系(Huh7、Hep3B、HepG2、SK-Hep1、BEL7402、SMMC7721)及人正常肝细胞系LO2为研究对象,采用qRT-PCR和Western blotting法分别检测细胞中的TRIM59 mRNA和蛋白,选择预实验中TRIM59 mRNA和蛋白表达水平相对较高的HCC细胞进行下一步实验。将HepG2细胞分为shTRIM59组和shControl组,shTRIM59组感染TRIM59慢病毒,shControl组转染TRIM59慢病毒阴性对照。将Huh7细胞分为pcDNA3.1-TRIM59组和pcDNA3.1-Vector组,分别转染pcDNA3.1-TRIM59质粒和pcDNA3.1-Vector对照质粒。采用集落形成实验检测HepG2、Huh7的细胞增殖能力,采用Western blotting法检测细胞中的p53蛋白。结果各HCC细胞中TRIM59 mRNA及蛋白相对表达量均高于LO2细胞,HepG2及Huh7细胞中TRIM59的表达高于其他HCC细胞系(P均<0.05)。shTRIM59组HepG2细胞集落形成数低于shControl组,p53蛋白相对表达量高于shControl组(P均<0.05)。pcDNA3.1-TRIM59组Huh7细胞集落形成数高于pcDNA3.1-Vector组,p53蛋白相对表达量低于pcDNA3.1-Vector组(P均<0.05)。结论HCC细胞中TRIM59 mRNA及蛋白高表达;上调TRIM59表达,HCC增殖能力增强、p53蛋白低表达,下调TRIM59表达则HCC增殖能力减弱、p53蛋白高表达;TRIM59对HCC细胞增殖的影响可能是通过调节p53蛋白表达实现的。