枸杞芽叶有效成分对急性酒精性肝损伤保护作用研究

摘要

本文旨在研究枸杞芽叶有效成分(active ingredients of Lycium barbarum leaves,AILBL)的抗氧化能力及对急性酒精性肝损伤的保护作用.首先采用ABTS和DPPH法对AILBL的抗氧化活性进行检测;其次取48只雄性ICR小鼠随机分成6组,即正常对照组、酒精模型组、阳性药对照组水飞蓟素(silymarin)(200 mg/kg,i.g.)、AILBL低、中、高剂量组(30、100、300 mg/kg),连续灌胃1周,每天一次.末次给药12 h后以6 g/kg酒精灌胃,间隔12 h一次,共3次,建立小鼠急性酒精性肝损伤模型.检测分析小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和肝组织中丙二醛(MDA)与还原性谷胱甘肽(GSH)水平.采用苏木精-伊红(H&E)和免疫组化染色观察肝脏组织的病理学变化和氧化应激相关蛋白.体外ABTS和DPPH清除实验表明AILBL抗氧化能力强于芦丁,对DPPH ?的清除优于Trolox.在酒精诱导的肝损伤模型小鼠中,AILBL预防给药能显著降低小鼠血清中ALT和AST水平,降低肝组织中MDA水平,升高肝组织中GSH水平,其作用效果呈剂量依赖关系,且中、高剂量组略优于阳性药水飞蓟素.HE组织染色分析表明AILBL能改善酒精引起的肝细胞坏死和炎症性病变.免疫组化分析显示AILBL能抑制酒精诱导的CYP2E1、HIF-1α和iNOS的表达,同时AILBL减少了乙醇刺激肝细胞诱导的ROS累积.由此可知,AILBL具有显著的体外抗氧化活性,且AILBL对急性酒精性肝损伤具有保护作用,其作用机制可能与AILBL中富含黄酮类抗氧化物进而提高小鼠机体内源性抗氧化活性、减少肝细胞脂质过氧化有关.