一种利用RT-HPLC分析乳酸菌产生物胺的方法

摘要

具有脱羧酶活性的乳酸菌可通过氨基酸的脱羧反应产生具有潜在安全风险的生物胺.本文利用脱羧酶培养基初步筛查61株乳酸茵产生物胺情况,再通过RT-HPLC法测定其在发酵液和发酵乳中的生物胺含量.用10%的三氯乙酸提取样品中的生物胺,采用苯甲酰氯衍生处理后,以甲醇/水为流动相,进行梯度洗脱,流速0.8 mL/min,紫外检测器波长为254 am.结果显示,组胺和酪胺得到良好的分离,在给定的浓度范围内呈现良好的线性关系(R2>0.995).在发酵液和发酵乳中添加生物胺混合标准溶液,平均回收率为97.92%-101.14%,相对偏差RSD<5%.结果表明,发酵液与发酵乳中生物胺的RT-HPLC法,是一种快捷、稳定、灵敏度高的检测方法,其与脱羧酶培养基法结合可以准确地实现对乳酸菌产生物胺的评价.