miR-29a对肾小管上皮细胞凋亡的影响及其机制研究

摘要

目的研究微小RNA（miR）-29a在急性肾损伤患者血清中的表达情况,探究miR-29a是否通过调控膦酸酯酶张力蛋白同源物（PTEN）表达影响肾小管细胞凋亡。方法收集113例急性肾损伤（AKI）患者以及110例健康对照者血清,通过实时荧光定量PCR检测血清中miR-29a的表达情况。体外培养人肾小管上皮细胞（HK-2）,通过转染miR-29a NC和miR-29a mimic到HK-2细胞中,用TGF-β1诱导HK-2细胞凋亡,采用流式细胞仪检测细胞凋亡,用生物信息学预测miR-29a的潜在靶基因,荧光素酶报告基因实验验证miR-29a与PTEN的互补配对关系,Western blot检测潜在靶基因PTEN的表达情况。再通过转染过表达PTEN的质粒,用流式细胞仪检测HK-2细胞的凋亡情况。结果与健康对照者血清相比,AKI患者血清中的miR-29a表达水平降低（P＆0.05）;流式细胞仪结果显示转染miR-29a mimic后,HK-2细胞的凋亡明显少于转染miR-29a NC组（P＆0.05）;荧光素酶报告基因实验结果显示,miR-29a与PTEN具有互补配对关系;转染过表达PTEN后,肾小管上皮细胞的凋亡率增加（P＆0.05）。结论在AKI患者血清中,miR-29a表达水平降低,过表达miR-29a通过抑制PTEN蛋白的表达从而抑制肾小管上皮细胞凋亡。