光动力疗法促进胆管癌细胞QBC939的凋亡

摘要

目的:研究光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)对人胆管癌细胞QBC939凋亡的影响.方法:体外培养人胆管癌QBC939细胞株,用不同浓度血卟啉衍生物(hematoporphyrin derivative,HPD)处理,并用半导体激光治疗仪不同强度光照后,采用CCK8法检测PDT对QBC939细胞的相对抑制率;应用流式细胞仪检测PDT作用前后QBC939细胞的凋亡率;RT-PCR检测PDT作用前后QBC939细胞中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)基因表达情况;SP免疫细胞化学法测定PDT作用前后QBC939细胞核中PCNA的表达情况.结果:CCK8检测结果显示PDT在体外能够抑制胆管癌QBC939细胞生长,8mg/LHPD经5J/cm2光照时实验组吸光度(A)值(0.403±0.027)与对照组A值(2.028±0.013)有统计学差异(P<0.05),细胞生长抑制率达80%,继续增加药物浓度或光照强度,细胞生长抑制率升高不明显,差异无统计学意义;流式细胞技术检测显示PDT能够明显促进胆管癌QBC939细胞的早期凋亡(74.6%±1.5%);RT-PCR检测显示PDT能够明显抑制胆管癌QBC939细胞中PCNA基因表达(0.68±0.06);SP免疫细胞化学结果显示PDT能够明显抑制胆管癌QBC939细胞核中PCNA蛋白表达(4.5%±1.4%).结论:PDT能够抑制胆管癌QBC939细胞生长,促进QBC939细胞的早期凋亡.PDT对QBC939细胞生长的抑制作用可能是通过抑制QBC939细胞的PCNA基因和蛋白水平的表达,从而促进其早期凋亡实现的.