过表达Twist1促进结直肠癌SW620细胞获得多药耐药性及机制研究

摘要

目的:探讨过表达Twist1对结直肠癌SW620细胞多药耐药性(MDR)的影响及其可能的机制.方法:利用过表达Twist1的慢病毒和阴性对照病毒转染结直肠癌SW620细胞,分别为实验组(SW620-Twist1)和对照组(SW620-NC),采用RT-qPCR和Western blot技术检测两组细胞Twist1基因及耐药基因ABCB1、ABCG2 mRNA和蛋白表达;CCK8法测定5-氟尿嘧啶(5-FU)和奥沙利铂(OXA)对两组细胞在24、48及72 h生长抑制率的影响;流式细胞仪检测两组细胞的肿瘤干细胞标记物CD133、CD44表达差异.结果:SW620-Twist1组与SW620-NC组相比,Twsit1基因mRNA和蛋白显著升高,差异具有统计学意义(P<0.01),提示过表达Twist1基因的SW620细胞系构建成功;5-FU和OXA两种药物在48、72 h时对细胞的抑制率均明显降低(48 h,P<0.05;72 h,P<0.01);ABCB1、ABCG2基因mRNA及蛋白的表达量均明显升高(P<0.01);CD133及CD44表达量均显著增高(P<0.01).结论:过表达Twist1可促进直肠癌SW620细胞耐药指标ABCB1、ABCG2表达,使肿瘤细胞获得MDR,该现象可能与促进干性获得有关.