miR-6827-3p靶向CXCL16调控结直肠癌细胞HT-29凋亡的机制研究

摘要

目的:研究miR-6827-3p靶向CXCL16调控结直肠癌细胞HT-29的凋亡的机制.方法:使用MiRBase在线分析MiRBase与CXCL16信使RNA的结合位点;将分析出的结合位点克隆进PmirGLO质粒,使用luciferase assay分析miR-6827-3p是否靶向这些结合位点;在结直肠癌细胞HT-29中过表达或者敲低miR-6827-3p后,使用Western blot分析CXCL16以及细胞凋亡关键蛋白的表达情况.结果:MiRBase分析后,发现miR-6827-3p与CXCL16具有3处匹配区域;克隆PmirGLO-CX-CL16-3'UTR后,luciferase assay发现miR-6827-3p靶向CXCL16;当过表达miR-6827-3p时,CX-CL16的表达量下降,细胞凋亡标志蛋白cleaved-caspase3、cleaved-caspase9、BAX表达量下降,Bcl-2表达量上升(P<0.05);当敲低miR-6827-3p时,CXCL16的表达量上升,细胞凋亡标志蛋白cleaved-caspase3、cleaved-caspase9、BAX表达量上升,Bcl-2表达量下降(P<0.05).结论:miR-6827-3p可以通过靶向CXCL16抑制结直肠癌细胞HT-29的凋亡.