nNOS

摘要： 目的:观察4周中等强度跑台运动对去卵巢大鼠抑郁样行为、海马炎症因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)水平及海马CA1、CA3区nNOS表达影响,探讨运动改善去卵巢大鼠抑郁样行为的潜在机制.研究方法:将30只雌性成年大鼠随机分为三组,分别为假手术组(SHAM,n=10)、去卵巢组(OVX,n=10)、去卵巢运动组(OVX +EX,n=10).运动结束后通过旷场实验及强迫游泳实验测试大鼠的抑郁样行为,采用ELISA法检测海马炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,利用免疫组化对海马CA1、CA3区nNOS阳性细胞个数及阳性产物面积进行测量.结果:与SHAM组相比,OVX组大鼠旷场实验中中央格次数、中央格时间百分比及总运动能力(跨格+直立次数)显著下降(P＜0.05);强迫游泳实验中大鼠不动时间延长,攀爬时间显著下降(P＜0.05);海马炎症因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)水平显著增加(P＜0.05);海马CA1区、CA3区nNOS免疫阳性细胞的数量与阳性细胞面积表达下降(P＜0.05).经过4周中等强度的跑台运动后,与OVX组比较,OVX+ EX组大鼠旷场实验中中央格次数、中央格时间百分比及总运动能力(跨格+直立次数)增加(P＜0.05);强迫游泳实验中大鼠不动时间减少,攀爬时间上升(P＜0.05);海马炎症因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)水平下降(P＜0.05);海马CA1区、CA3区nNOS免疫阳性细胞的数量与阳性细胞面积表达增加(P＜0.05).结论:4周跑台运动可以改善去卵巢大鼠抑郁样行为,可能与此运动降低海马炎症细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α的释放、增强海马CA1、CA3区的nNOS表达有关.

摘要： PDZ结构域是蛋白质中最常见的肽结合区域之一,它涉及许多关键信号通路.以突触后致密蛋白-95(PSD-95) PDZ结构域为靶点,设计合成的Tat-NR2B9C和ZL006,显示神经保护活性;以神经元型一氧化氮合酶(nNOS) PDZ结构域为靶点,设计合成的ZLc-002,显示抗焦虑活性.本文重点介绍PDZ结构域的结构、分类及有望以含PDZ结构域的蛋白为靶点开发出治疗急性缺血性脑卒中和焦虑症的新药.

摘要： 目的 探讨N-硝基-左旋精氨酸甲酯(L-NAME)对围生期子鼠十二指肠球部肌层厚度及神经元型一氧化氮合酶(nNOS)表达的影响.方法 选购成年Wistar大鼠按雌:雄2:1合笼,次日将其分开并取雌鼠阴道分泌物涂片镜检,发现精子的时间定义为妊娠第1天.将受孕的大鼠随机分成用药组和对照组,其中用药组给予L-NAME,并设定为3个剂量组(低剂量组、中剂量组和高剂量组),用药组孕鼠和围生期子鼠分别通过灌胃和注射给药,对照组选用等剂量的生理盐水,以同样的给药方式处理.围生期子鼠每天称重,记录数据,在出生第1、7和14天处死,留取标本,免疫组化法检测十二指肠球部nNOS的分布密度,HE染色后在显微镜下测量十二指肠球部肌层厚度.结果 出生体重在各组间差异无统计学意义(P>0.05);在出生后第1周,用药组子鼠体重增加量较对照组降低(P0.05).子鼠7日龄各组间nNOS表达量差异无统计学意义(P>0.05),子鼠14日龄nNOS的表达量用药组明显高于对照组,但各用药组组间差异无统计学意义(P>0.05).子鼠十二指肠球部肌层的厚度,7日龄或14日龄用药组与对照组相比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 L-NAME可诱导围生期子鼠十二指肠球部肌层nNOS活性增高及表达量增加,保持十二指肠球部的肌层厚度不受影响.

摘要： 目的:观察电针对CUMS大鼠行为学、海马nNOS表达以及突触可塑性的影响并探讨其机制.方法:SD大鼠80只按体质量随机分组,以慢性温和不可预见性应激方法制备模型组,电针组取“印堂”“百会”电针治疗,假电针组进行安慰治疗.14d后旷场实验评价抑郁样行为,透射电镜观察海马CA1区突触超微结构,Western bolt检测海马nNOS,RT-PCR检测海马nNOS mRNA表达.结果:与正常组比较,模型组大鼠旷场实验各项指标均明显下降,海马CA1区神经元细胞发生损伤,完整突触结构减少,海马nNOS和nNOS mRNA表达相较于正常组明显增高;与模型组比较,电针组大鼠旷场实验各项指标均明显上升,突触超微结构改善,海马nNOS和nNOS mRNA表达降低,假电针组各项检查结果与模型组相当.结论:电针对CUMS大鼠抑郁行为的改善可能是通过降低海马内nNOS的表达进而影响突触可塑性来实现的.

摘要： 为探讨Kozak调控序列对nNOS(neuronal nitric oxide synthase,神经型一氧化氮合酶)基因表达的影响,并验证其在神经细胞分化过程中的作用.构建了含有经典Kozak序列调控元件及野生型前导序列的人源nNOS表达载体;通过qPCR和western blot技术检测不同表达载体在SH-SY5Y细胞中的转录水平和翻译效率;利用SH-SY5Y神经细胞的诱导分化模型进一步验证不同的nNOS表达调控序列对于神经细胞分化的影响;通过测量和定量神经突起长度,结合qPCR法定量神经细胞分化关键标志物Tau和MAP2的表达来表征神经细胞分化程度.结果显示,经典Kozak调控元件(-3位A和G)和野生型前导序列(含-3位A)都能显著提高nNOS载体的表达效率,其中,野生型序列效率更高,但Kozak元件和野生型序列均不影响nNOS转录.在SH-SY5Y神经细胞分化模型中,Kozak元件也能促进分化进程,野生型序列的促分化作用最强.由此可知,通过对比不同调控序列,获得了以野生型序列引导的nNOS高效表达载体.Kozak元件对不同基因的调节效果差异较大,针对特定基因,有必要通过详细的对比实验确认最佳调控序列.%To investigate the regulatory role of canonical Kozak sequence in nNOS expression, and to validate this role in neuronal cell differentiation process. The nNOS expression vectors containing canonical Kozak sequence elements or wild type leader sequence were constructed and the transcriptional and translational efficiency of these vectors in SH-SY5Y cell line was identified by western blot and qPCR methods. The effect of different nNOS leader sequences on neuronal differentiation was further tested in drug induced SH-SY5Y differentiation model. The differentiation degree of neuronal cell was described by both the neurite length quantification and the content of key differentiation markers, Tau and MAP2,through qPCR. Though the canonical Kozak sequence elements(A or G at -3 residue) and the wild type leader sequence(containing A at -3 residue) didn't affect the nNOS transcriptional level, both the two kinds of sequences could significantly increase the expression efficiency of nNOS, with a higher efficiency by the wild type sequence. In the SH-SY5Y differentiation models, Kozak elements could also promote the differentiation process, and a stronger promotional effect was achieved by the wild type sequence. By comparing the effects of different regulatory sequences, we final obtained a high efficiency expression vector containing the wild type leader sequence. Kozak elements may have distinct regulatory roles for some specific genes, so it is necessary to optimize the regulatory sequence through detailed comparison study.

摘要： 目的:研究人参皂甙Rb1对ATP诱导大鼠海马脑片毒性损伤的影响及其作用机制.方法:采用SD大鼠离体海马脑片模型,随机分为正常对照组、人参皂甙Rb1对照组、ATP损伤组、人参皂甙Rb1(20μmol/L、401μmol/L、601μmol/L)组、亮蓝G(BBG)组、亮蓝G+人参皂甙Rb1组、2=3'-O-(4-苯甲酰-苯甲酰)腺苷三磷酸三乙烷胺盐(BzATP)组和BzATP+人参皂甙Rb1组.测定脑片孵育液中乳酸脱氢酶(LDH)释放率,免疫组化测定海马CA1区和齿状回神经型一氧化氮合酶(nNOS)表达,Western blot测定海马磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK1/2)蛋白表达.结果:人参皂甙Rb1(40μmol/L、60μmol/L)组可明显降低ATP诱导的LDH释放,人参皂甙Rb1(60μmol/L)亦降低海马p-JNK1/2以及CA1区和齿状回nNOS的表达,人参皂甙Rb1(60μmol/L)对由P2X7受体激动剂BzATP诱导的LDH释放和nNOS、p-JNK1/2表达亦有明显抑制作用.P2X7受体抑制剂亮蓝G可明显减低ATP诱导的LDH释放,但BBG联合应用人参皂甙Rb1(60μmol/L)并未增强人参皂甙Rb1的保护作用.结论:人参皂甙Rb1可明显抑制ATP诱导的大鼠海马脑片毒性损伤,其作用机制与抑制P2X7受体,进而减少nNOS和p-JNK1/2的表达有关.

摘要： 为研究运输应激对动物行为、内分泌以及脑内神经型一氧化氮合酶(Neuronal nitric oxide synthase,nNOS)表达的影响,采用摇床加制动束缚模拟公路运输途中的摇晃、拥挤和限制活动等因素,建立大鼠运输应激模型(35°C,120 r/min,应激2h).将18只大鼠随机分为对照组、应激组和应激恢复组,采用旷场试验评定大鼠行为反应,放免法测定大鼠血清皮质酮含量,免疫组化法检测大鼠下丘脑视上核(Supraoptic nucleus,SON)中nNOS的表达.结果显示,与对照组相比,应激组大鼠的自主活动明显减少(P＜0.01),血清皮质酮(Corticosterone,CORT)含量显著增加(P＜0.01),SON中nNOS的平均光密度值显著上升(P＜0.01),应激恢复组大鼠的自主活动次数和血清皮质酮含量恢复至正常水平,而SON中nNOS的平均光密度值进一步上升.上述结果表明,运输应激对大鼠情绪、行为和神经内分泌有显著影响,24 h后行为及内分泌状况改善,而神经递质的改变则需更长时间恢复.

摘要： 目的:探索神经结扎(spinal nerve ligation,SNL)模型大鼠脊髓内神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)的磷酸化是否对神经病理性疼痛具有调节作用,研究nNOS磷酸化在神经病理性疼痛中的作用机制.方法:选用雄性SPF级SD大鼠60只,随机分为4组.假手术组:只暴露脊神经,不结扎;实验组:制作SNL模型,鞘内注射钙依赖性蛋白激酶Ⅱ(phosphorylated calcium/calmodulin dependent kinase Ⅱ,p-CaMK Ⅱ)抑制剂KN93;阴性对照组:制作SNL模型,鞘内注射DMSO;模型组:制作SNL模型,不给药.于术前1d、术后1～5 d以及鞘内给药后1～4 h测定机械痛阈值.采用Western blot检测腰段脊髓组织p-CaMK Ⅱ、nNOS与p-nNOS的表达水平,利用免疫共沉淀以及免疫荧光实验检测nNOS与其接头蛋白CAPON是否具有相互作用.结果:SNL可导致大鼠机械疼痛阈值降低(P＜0.01),脊髓组织p-CaMKⅡ的表达增加(P＜0.05),p-nNOS的表达下降(P＜0.05),髓鞘内注射KN93可反转神经结扎所致的上述趋势;nNOS与其接头蛋白CAPON在大鼠体内存在相互作用,nNOS的磷酸化能降低其与CAPON的相互作用强度.结论:nNOS的磷酸化参与了SNL诱导的神经病理性疼痛的维持,p-CaMK Ⅱ通过对nNOS的磷酸化,降低nNOS与其接头蛋白CAPON在体内的相互作用强度,针对nNOS的磷酸化信号途径的治疗可为神经病理性疼痛的治疗提供新的视野.

摘要： 目的 探讨大鼠前扣带皮层(ACC)中PSD-95和nNOS在痛情绪中的作用.方法 40只SD大鼠随机分为正常组(N组)、F组(福尔马林)、NS-CPA组(生理盐水-CPA)、F-CPA组(福尔马林-CPA)、CCI-CPA组.完成CPA训练后,将各组大鼠麻醉后取ACC,用Western blot方法检测PSD-95和nNOS蛋白的表达.结果 与CPA训练前比,F-CPA组和CCI-CPA组大鼠经过出现了明显的回避行为(P＜0.05).与NS-CPA组比较,F-CPA组、CCI-CPA组大鼠ACC中PSD-95、nNOS的表达上调(P＜0.05),其中F-CPA组PSD95的表达上调较明显(P＜0.05),而CCI-CPA组nNOS的表达上调更明显(P＜0.05).结论 大鼠ACC中PSD-95和nNOS表达上调可能参与了痛情绪的形成.

摘要： 本发明公开了一种多肽、其制备方法、其应用以及用于抑制nNOS与SERT偶联的抑制剂，涉及抗抑郁药物技术领域，该多肽与SEQ ID No.1或SEQ ID No.2具有至少90％的一致性。而本申请提供的多肽能够解决现有技术抗抑郁但不稳定的缺点，通过特异性检索DRN区5‑HT浓度，降低负反馈抑制而增加皮层、海马等部位5‑HT释放发挥抗抑郁疗效，从而避免SSRIs依赖于5‑HTR1A自身受体脱敏带来的延迟起效、有效率低、易复发、严重患者无效甚至导致自杀的诸多缺陷。

摘要： 一种基于磁性介孔分子筛的nNOS‑PSD‑95解偶联剂表面印记聚合物的制备方法，属于分子印记聚合物技术领域，具体步骤分为：制备核壳结构的磁性介孔分子筛；对制得的磁性介孔二氧化硅微球进行表面接枝改性；制备基于磁性介孔分子筛的nNOS‑PSD‑95解偶联剂表面印记聚合物。本发明制备的基于磁性介孔分子筛的nNOS‑PSD‑95解偶联剂表面印记聚合物单分散性好，比表面积大，介孔规则有序，具有优良的吸附和解吸附动力学特性，且聚合物稳定性、重现性好，为实现中药中nNOS‑PSD‑95解偶联剂的选择性捕获和高效筛选提供可能。

摘要： 本发明涉及医药技术领域，具体是腺苷和nNOS抑制剂联用在制备预防中枢神经系统氧中毒药物或食品中的应用。本发明提供了一种联合腺苷和nNOS抑制剂的新用途，本发明通过动物实验证明了联合腺苷和nNOS抑制剂7‑硝基吲唑能有效地延缓中枢神经系统氧中毒现象的发生。与传统的只能通过严格限制吸氧的压力和时间来进行预防的方法相比，使用本发明中的方法，将可以在更高的压力下，更长时间地吸氧，从而进一步扩大了高压氧在潜水和高气压医学中的用途。

摘要： 本发明公开了一种耐高温混合分散剂NNO/MF及其生产工艺，耐高温复合分散剂中含有重量百分比为：20～25%的亚甲基双甲基萘磺酸钠和75～80%的亚甲基双萘磺酸钠。耐高温混合分散剂NNO/MF的生产工艺包括精制、磺化、缩合、中和四步骤。本发明耐高温混合分散剂NNO/MF不含喹啉等杂环化合物，色浅且耐热稳定性优异，尤其适用于需高温分散的浅色染料。

摘要： 本发明涉及一种NNO‑配位的铬金属催化剂的制备及其在烯烃聚合中的应用。本发明引入了NNO‑三齿配体骨架，设计合成了新型NNO‑配位的铬金属催化剂，通过改变配体的取代基，能够方便地调控该结构金属催化剂的空间效应和电子效应，从而实现不同的催化性能。本发明报道的新型NNO‑配位的铬金属催化剂活性高、耐高温性能好，且仅需极少量的MAO助催化剂，降低了成本，具有原始创新性，能够增强我国聚烯烃高分子材料技术市场的竞争能力。

摘要： 本发明报道了一种NNO‑配位钛锆铪金属催化剂的合成及其高温溶液聚合制备聚烯烃弹性体的应用。本发明报道了具有水杨醛亚胺‑胺骨架的NNO‑配位钛锆铪金属催化剂，通过改变取代基，能够方便地调控该模型金属催化剂的立体效应和电子效应，从而实现不同的催化性能，制备多种结构和多种性能的聚烯烃高分子材料。本发明报道的新型NNO‑配位钛锆铪金属催化剂合成简单，产品收率高的特点；在适量助催化剂(如MAO等)的存在下，表现出极高的活性，最高达1.35×10

摘要： 本发明通过免疫印迹等技术，发现了一种对太赫兹波辐射敏感的神经元突触后信息传递分子—神经型一氧化氮合成酶nNOS(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)。研究发现，太赫兹波辐射可致海马神经型一氧化氮合酶nNOS表达量下调,从而导致神经元状态出现异常，神经信息传递受阻。因此，通过检测神经细胞中敏感蛋白nNOS的表达变化，可有效地判断太赫兹波辐射致神经元信息传递是否异常。

摘要： 一种具有nNOS‑Capon解偶联活性的多肽及其应用，其特征在于氨基酸序列结构通式为Che‑Xaa1‑Xaa2‑Xaa3‑Val，其中Che=N‑Cyclohexylethyl，Xaa1=Ala或Gly，Xaa2=Glu、Glu(OMe)、Asp或Asp(OMe)，Xaa3=修饰的或天然氨基酸。这类多肽具有nNOS‑Capon解耦连活性，可作为神经保护剂用于缺血性脑卒中的治疗。提供了一种体外快速筛选nNOS‑Capon解偶联活性的荧光偏振法（FP）。通过FP法筛选的多肽在大鼠脑缺血再灌注模型（MACO）有明显神经保护作用。

摘要： 本发明公开了一种含多个配位点的NNO型喹啉Fe(II)配合物及其制备方法和应用，该配合物为喹啉‑2‑甲醛‑苯甲酰腙Fe(II)配合物，分子式为Fe(C17H12ON3)2。本发明以含三个配位点的NNO型喹啉‑2‑甲醛‑苯甲酰腙作为螯合配体，以Fe(II)作为中心金属离子，通过溶液中的自组装反应制备NNO型喹啉Fe(II)配合物，有效解决了新型喹啉类衍生物作为配体，与过渡金属Fe(II)结合的问题。本发明制备的喹啉‑2‑甲醛‑苯甲酰腙Fe(II)配合物，对DPPH自由基具有较强的清除作用，清除率远远高于维生素E和对照例的喹啉铁(II)配合物。该实验表明，本发明配合物具有优异的体外抗氧化作用，可有效用于制备抗衰老药物，有望进一步研究药理和生理活性。

摘要： 本发明公开了一种多肽、其制备方法、其应用以及用于抑制nNOS与SERT偶联的抑制剂，涉及抗抑郁药物技术领域，该多肽与SEQ ID No.1或SEQ ID No.2具有至少90％的一致性。而本申请提供的多肽能够解决现有技术抗抑郁但不稳定的缺点，通过特异性检索DRN区5‑HT浓度，降低负反馈抑制而增加皮层、海马等部位5‑HT释放发挥抗抑郁疗效，从而避免SSRIs依赖于5‑HTR1A自身受体脱敏带来的延迟起效、有效率低、易复发、严重患者无效甚至导致自杀的诸多缺陷。