蓝舌病

摘要： 为了解蓝舌病(bluetongue,BT)在云南边境地区的流行和分布情况,2020年采用竞争ELISA方法,在云南省边境地区12个县市随机采集135个养殖场、活畜交易市场和散养户的3800份牛血清样品进行蓝舌病病毒(bluetongue virus,BTV)抗体检测.结果显示:12个边境县市均检出阳性血清样品,平均样品阳性率为77.9％,场户阳性率为93.3％;样品阳性率有一定的地区差异,其中陇川县最高(92.0％),孟连县最低(48.0％),差异存在统计学意义(P<0.05);境外牛血清样品阳性率(84.8％)显著高于本地牛(67.9％),P<0.05;不同饲养方式下的样品阳性率存在差异,其中舍饲最高(81.4％),半放牧半舍饲(62.5％)最低,P<0.05;黄牛样品阳性率(80.0％)明显高于水牛(61.4％),P<0.05.结果推断,BT在云南边境地区可能广泛存在且流行严重,需要持续开展血清学调查、监测,重点加强对境外牛的控制.本研究为我国西南边境地区BT防控提供了数据参考.

摘要： 蓝舌病属于我国一类动物传染病,也是世界动物卫生组织要求必须通报的动物疫病.该病主要威胁反刍动物,绵羊发病率较高,对绵羊养殖业造成了严重的危害.在蓝舌病的防控中,精确的诊断患病动物和隐性感染动物尤为重要,是防控的重点.目前,已有多种检测方法可用于蓝舌病的诊断,本文对蓝舌病的诊断技术进行综述,以期为蓝舌病的诊断工作提供参考.

摘要： 随着市场经济的发展,为我国畜牧业发展带来了新的契机。牛蓝舌病是一种非接触性传染病,在反刍动物中发病率较高,发病期间会出现口鼻腔、眼部充血、水肿、食欲不振等症状,如果不及时处理会造成牛群大量感染,从而造成较大的经济损失。笔者主要探讨了牛蓝舌病的诊断与防治。

摘要： 羊蓝舌病是由库蜢为传染媒介的反刍动物的一种病毒性、非接触性传染病,不同年龄和品种的羊群均可被感染,其临床症状为消瘦、发热,口、鼻腔和胃黏膜的溃疡性炎症变化。羊场必须在饲养过程中做好综合性的预防措施,如严格引种、加强羊养殖的饲养管理,提高科学养殖水平,以保证羊群健康生长。目前,对于羊蓝舌病的治疗措施主要是注射高免血清,通过给患病羊只注射与蓝舌病病毒相同的血清型号的高免血清,可以获得良好的治疗效果。

摘要： 蓝舌病是一种以库蠓为传播媒介,由蓝舌病病毒引起的以消瘦、发热、口腔、鼻腔及消化道黏膜等出现严重卡他性炎症为特征的反刍动物传染病。主要危害绵羊,可导致胎儿畸形,羔羊生长不良或死亡,病羊蹄部受损而跛行、皮毛损坏等,严重危害羊群健康和经济发展。同时也给养殖场造成严重的经济损失。本文以羊的蓝舌病为例,对蓝舌病的流行病学、临床症状、病理变化及防控措施进行讨论,为控制该病提供理论支撑。

摘要： 牛蓝舌病是牛感染蓝舌病病毒引发的一种急性、热性、非接触性传染病,反刍动物感染率较高,发病后会出现高热,口腔和舌黏膜溃疡,流涎,鼻流脓性黏液,蹄冠蹄叶炎等症状,主要发生在高热夏季和早秋,可通过伊蚊、库蠓叮咬进行病毒感染,危害性较大。本文对牛蓝舌病的症状、诊断、防治进行分析,为有效防治牛蓝舌病提供参考。

摘要： 蓝舌病属于我国一类动物传染病,对绵羊危害最大,严重制约绵羊健康和养殖的持续发展。绵羊蓝舌病可导致绵羊黏膜溃烂、跛行、流产,具有较高的发病率和死亡率,可造成严重的经济损失。本文对绵羊蓝舌病的流行病学、临床症状、诊断等方面进行综述,重点讨论绵羊蓝舌病的综合防控措施,为绵羊蓝舌病的诊断和防治提供参考。

摘要： 绵羊蓝舌病是由蓝舌病毒感染所引起,呈全球分布,常表现地方散发式流行,各种品种、性别和日龄的羊都能感染,吸血性的昆虫是本病扩散的重要媒介;病羊主要表现全身症状,同时口腔、唇、蹄部、皮肤等出现糜烂和水肿;预防本病需谨慎引种,加强羊场的生物安全建设,地方政府还要加强对本地疫情的监控;目前还没有特效的治疗本病的药物出现,病羊可通过对症治疗来缓解病情,依靠自身抵抗力来杀灭体内病原;症状表现严重,疾病进入中后期的感染羊直接淘汰处理。

摘要： 牛蓝舌病是养牛业中比较常见的一种非接触性、急性、热性传染病,患病牛临床主要表现为高热、食欲不振、消瘦、口鼻黏膜红肿溃疡发生炎症,严重时会造成死亡,给养殖户带来严重的经济损失。针对牛蓝舌病市场上尚无有效的治疗药物,兽医临床上主要采取的是对症疗法进行治疗。牛蓝舌病的预防原则是"防大于治",养殖户要根据自身养殖场的状况,制定科学合理的饲养管理方案,切断中间宿主的传播和扩散途径。对于检测结果阳性的牛,要坚决进行扑杀,并进行无害化处理。

摘要： 对分离的新疆蓝舌病病毒(BTV)株编码VP5蛋白的S6基因序列进行比对分析,旨在了解分离毒株的基因遗传变异及进化关系,以期为新疆地区蓝舌病疫苗研究提供科学依据。本研究对绵羊全血中分离的疑似BTV分离毒株,提取RNA进行NS1-PCR扩增,克隆测序。应用全长cDNA扩增(full-length ampli-fication of cDNAs,FLAC)技术获得S6基因序列,NCBI Blast比对S6基因同源性,MEGA5.0软件绘制进化树,分析BTV新疆分离株与蓝舌病病毒28个血清型S6基因的序列遗传进化关系。结果表明,新疆地区疑似蓝舌病病毒分离株NS1片段与蓝舌病病毒NS1片段序列相似性为98.04%,获得1株蓝舌病病毒。BTV分离株S6基因序列仅与GenBank中BTV strain XJ1407株、BTV strainMNG2/2016株及BTV-18 strain USA2014/FL株的S6基因具有同源性,且同源性均低于90%,分别为88.11%,87.35%以及70.92%。BTV分离株S6基因序列进化关系分析结果表明,分离株与BTV-18血清型在同一进化分支,与BTV-27血清型亲缘关系最近。研究结果为新疆地区蓝舌病疫苗研制提供科学依据。

摘要： 蓝舌病(Bluetongue,BT)是由蓝舌病病毒引起,经媒介昆虫(如库蠓等)传播感染反刍动物的虫媒病毒病.蓝舌病于18世纪首次在南非发现,1902年,Hutcheon首次报道此病,当时他报道在绵羊中出现临床发热病例,称为"羊疟疾性卡他热",并假说此病由昆虫传播.1905年,Spreull将其正式命名为"蓝舌病".蓝舌病分布于全世界热带、亚热带及温带地区,流行严重,防治困难,被世界动物卫生组织(OIE)规定为必须及时上报的动物传染病,在中国是出入境口岸重点检疫的外来动物疾病.该病阻碍反刍动物的国际贸易和生产,经济损失严重,据估算每年因蓝舌病造成的损失在30亿美元以上.分析了蓝舌病病原菌、临床症状、危害性、传播途径、流行病学、疾病诊断、疫苗防治。

摘要： 蓝舌病(Bluetongue,BT)是由呼肠孤病毒科环状病毒属蓝舌病病毒引起的反刍动物虫媒(如库蠓、伊蚊等)传染病.蓝舌病病毒基因组由10个大小不同的双股RNA组成,分别编码7种结构蛋白(VP1～VP7)和4种非结构蛋白(NS1、NS2、NS3/NS3A、NS4).其中VP2蛋白由L2基因(2900bp左右)编码,以三聚体的形式存在;VP5蛋白是由M6基因(1639bp)编码,也以三聚体形式存在,VP5蛋白比较保守,是BTV的另一个型特异性抗原,它与VP2共同决定BTV的血清型;VP7蛋白是由S7基因(1156bp)编码的,它高度保守,是BTV的主要核心粒子,含有群特异性抗原决定簇.本实验分别构建了酵母双杂交系统中三个诱饵质粒pGBKT7-VP2、pGBKT7-VP5与pGBKT7-VP7,并验证其自激活和毒性作用,为今后利用绵羊肾细胞的cDNA文库筛选互作蛋白,以及开展BTV与宿主细胞的相互作用研究奠定了基础.本实验所构建的三个诱饵质粒经验证均无自激活活性和毒性作用，以期进一步筛选与其相互作用的宿主细胞靶蛋白并研究其在病毒感染和致病性方面所起的重要作用，为今后利用酵母双杂交系统筛选相关蛋白，深入研究BTV的侵染机制奠定了基础。

摘要： 基于蓝舌病(bluetongue,BT)的危害及RNA阳性质控品研制的重要性,试验将pTrcHis-MS2质粒借助点突变技术在噬菌体外壳蛋白15和16氨基酸之间插入组氨酸(His)蛋白标签,构建了pTrcMS载体.将pMD19-T-BTV质粒与pTrcMS质粒分别进行KpnⅠ和HindⅢ双酶切,然后连接构建pTrcMS-BTV重组质粒.将pTrcMS-BTV重组菌进行原核表达,产物借助偶联His蛋白标签的磁珠捕获技术获得纯化的蓝舌病假病毒颗粒,进行特性鉴定并定量.结果显示,研制的pTrcMSBTV物质经PCR方法评价纯度高,无基因DNA污染;透射电镜观察形态为不规则的直径约为26nm的多边形;RT-PCR方法检测稳定性表明该物质耐RNase A,易保存;应用荧光RT-PCR检测表明该物质溶液最低检测限可达到2.5×102拷贝/mL.蓝舌病假病毒物质将为蓝舌病分子生物学检测提供阳性质控物质.

摘要： 蓝舌病(Bluetongue, BT)是一种经吸血昆虫传播，引起反当动物疫病的急性病毒性传染病，被世界动物卫生组织(OIE)列为上报疾病(以前为A类传染病)，我国列为一类动物疫病。蓝舌病对动物和动物制品国际间贸易具有非常重要的影响，国际组织和各国政府均将其列为动物疫病监测和防控的重点。蓝舌病病毒(Bluetongue virus, BTV)为呼肠孤病毒科(Reoviridae)环状病毒属( Orbivirus )主要成员，至少存在24个血清型，呈全球性分布。随着全球气温变暖，2006年~2008年欧洲许多国家暴发蓝舌病，使其分布范围不断扩张，并出现了地域性新血清型。rn 目前，世界各国尚无十分有效的蓝舌病预防疫苗，还无有效的防治措施，研究建立蓝舌病系列检测技术对蓝舌病的有效防控具有极其重要的意义。因此，本研究开展了BTV核酸RT-PCR检测试剂、荧光定量PCR检测试剂、抗原ELISA检测试剂、抗体C-ELISA检测试剂以及BTV生物条形码检测技术等蓝舌病系列检测技术及产品研究工作。

摘要： @@蓝舌病(Bluetongue，BT)是一种经吸血昆虫传播，引起反刍动物疫病的急性病毒性传染病，是世界动物卫生组织(OIE)规定的上报疾病(以前为A类传染病)[1]，我国将其列为一类动物疫病。蓝舌病对动物和动物制品国际间贸易具有非常重要的影响[2~3]，国际组织和各国政府均将其列为动物疫病监测和防控的重点。其病原还是人用动物源生物制品(如人用牛源凝血酶、凝血因子Ⅷ、聚合牛血红蛋白、胸腺肽、羊胎盘素)和生物制品敷料(如牛血清、牛肉浸膏、牛源明胶、牛源胶原)病毒安全性检测的病毒之一[4]。

摘要： 动物蓝舌病是由库蠓传播,由蓝舌病毒(BTV)引起,主要侵害绵羊并可感染其它反刍动物的病毒性传染病。蓝舌病给畜牧业生产和国际贸易带来了严重影响。随着血清学实验技术和生物工程技术的发展,蓝舌病的诊断技术和免疫研究也不断取得新的进展。本文就是有关该病的诊断方法和免疫研究加以总结,旨在方便对该病做出及时而有效的诊断,并采取相应措施.

摘要： 近几年来本实验室在实际的防病、治病和检疫过程中,经常发现有类似蓝舌病症状的牛羊,为了了解一下蓝舌病在吉林省是否存在以及其它疾病进行鉴别诊断,为此采集了这些畜群的血样和一些健康畜群的血样,用琼脂免疫扩散试验进行了血清学调查.

摘要： 目的：对中国BTV4型VP5蛋白制备型特异性单克隆抗体(MAbs)，为BTV4的型特异性检测方法的建立以及VP5蛋白功能研究奠定基础。方法:提取BTV4的RNA，设计特异性引物对目的基因SS进行反转录-PCR;利用pMAL-c4、原核表达系统和Bac-to-Bac真核表达系统对VPS蛋白进行表达，纯化以及生物学特性鉴定;利用传统杂交瘤细胞融合技术制备BTV4 VP5蛋白的MAbs并且对其进行特性鉴定。结果:成功获得具有良好生物学活性的BTV4 VP5蛋白;制备出6株针对BTV4 VP5蛋白的MAbs, Western-blot结果显示每株MAb均可以与重组VPS蛋白和天然VP5蛋白发生特异性反应;间接免疫荧光(IFA)结果表明6株MAbs均可以与BTV4感染的BHK-21细胞呈现特异性反应;IFA系统鉴定表明:MAb 1B6只能与BTV4呈现特异性的反应;其余5株MAb、与其它23个血清型BTV反应谱系不同，而6株MAbs均不与茨城病病毒(IBAV)和中山病病毒(CV)发生反应。结论:在本研究中，最初试图表达全长BTV4 VP5蛋白，但无论是真核表达还是原核表达，VP5蛋白表达量都很低。经查文献查阅发现，VP5蛋白N端前41个氨基酸形成两个亲水亲脂的双螺旋结构，对细胞膜具有穿透作用，因此对细胞具有毒性进而影响VP5蛋白的有效表达。为解决这一问题，把VP5蛋白N端41个氨基酸缺失表达，结果其真核表达和原核表达表达量都很大，并且保持良好的生物学活性，能够被BTV4羊阳性血清所识别。

摘要： 目的:利用重组表达的BTV3-VP2蛋白制备的单克隆抗体,拟建立BTV3型特异性诊断方法。方法:从感染BTV3的BHK-21细胞上清提取病毒RNA,经RT-PCR扩增L2基因,并将该基因分别克隆至原核表达载体pMAL-C4X和真核表达供体质粒pFast-BacHTA载体上。获得的重组质粒分别用于原核和真核表达,从而获得VP2蛋白。以原核表达的重组VP2蛋白作为免疫原免疫5-6周龄BALB/c小鼠,通过体外细胞融合技术将SP2/0骨髓瘤细胞与免疫后BALB/c小鼠的脾细胞进行融合。以真核表达的重组VP2蛋白为检测抗原,通过间接ELISA方法筛选出2株能稳定分泌VP2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞。结果:已获得2株能稳定分泌VP2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞。结论:上述结果有利于进一步了解BTV8 VP2蛋白的抗原结构及其在免疫应答中的作用,为中国BTV3的鉴别诊断方法的建立奠定了基础,并可采用PepScan技术进行抗原表位分析,深入研究蛋白质的抗原表位对于疾病的诊断、治疗、疫苗的开发等具有重要的意义。

摘要： 水泡性口炎、口蹄疫、蓝舌病、鹿流行性出血热和赤羽病均属我国进境动物一类或二类传染病,其中口蹄疫、水泡性口炎和蓝舌病还被世界动物卫生组织(OIE)确定为对动物和动物产品国际贸易有重大影响的A类疾病,这些疾病特别是作为人畜共患烈性传染病的口蹄疫和水泡性口炎的爆发与流行过去曾经而且目前正在给世界各国的畜牧生产、社会经济和国际贸易构成严重威胁并造成巨大的经济损失,因而是世界各国动物检疫部门重点防范的动物传染病.本实验旨在制备可同时检测口蹄疫病毒(Foot and mouth disease virus,FMDV)、水泡性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus,VSV)、蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)、鹿流行性出血热病毒(Epizootic hemorrhagic disease virus of deer,EHDV)和赤羽病病毒(Akabane disease virus,AKV)等5种病毒的基因芯片,一次试验即可对这5种病毒进行快速准确的检测,以达到快速、准确、高通量的检疫要求.

摘要： 本发明公开用于检测蓝舌病的蛋白质及其编码基因和可溶制备方法。本发明首先公开了用于检测蓝舌病的蛋白质，其氨基酸序列如SEQ ID No.1第2‑219位所示。本发明进一步公开了上述蛋白质的编码基因及其可溶性制备方法。本发明从VP7蛋白质三维空间结构特点出发，对VP7蛋白质的氨基酸序列进行裁剪重排得到新的用于检测蓝舌病的VP7‑N蛋白质，通过将VP7‑N蛋白质的编码基因导入到原核表达系统实现了VP7‑N蛋白质在原核表达系统中的高效可溶性表达，具有表达产量高、可溶性好的特点，另外，并未因原核表达降低免疫原性，具有良好的免疫反应特性，为蓝舌病检测提供了优质的蛋白。

摘要： 本发明涉及一种杂交瘤细胞株BTV‑2A4及其分泌的单克隆抗体，及该单克隆抗体所识别的BTV‑NS2蛋白B细胞表位多肽，本发明提供的单克隆抗体与且仅与所述BTV‑NS2蛋白B细胞表位多肽特异性结合，经试验验证，与蓝舌病病毒的同属病毒，如中山病毒CHUV、鹿出血热病毒EHDV‑1及EHDV‑6、广西环状病毒GXOV等并不发生反应，因此在检测鉴定蓝舌病病毒感染时可靠程度较高，对疫病防治有较好的指导意义。本发明同时提供一种上述单克隆抗体制备的特异性检测蓝舌病病毒NS2蛋白的C‑ELISA试剂盒，由于使用了本发明的单克隆抗体，高度特异性地识别含有特定B细胞表位的抗原蛋白，因此检测结果可靠准确，操作简单，有利于疫病防治。

摘要： 本发明公开了一种蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)的反向遗传方法和应用。本发明将辅助质粒和蓝舌病病毒PCR产物分两次转染BHK‑21细胞从而拯救病毒。本发明的蓝舌病病毒反向遗传拯救方法可用于BTV的致病机制研究、免疫机制研究以及重组疫苗的制备。

摘要： 本发明提供了一种检测小反刍兽疫病毒和蓝舌病病毒的引物及方法。本发明设计筛选出的引物组合，最终首次成功实现了在同一个反应管里，通过多重荧光RT‑LAMP检测方法，简单、快速和准确的鉴别出小反刍兽疫病毒(PPRV)和蓝舌病病毒(BTV)。本发明提供的用于检测小反刍兽疫病毒(PPRV)和蓝舌病病毒(BTV)的多重荧光RT‑LAMP引物及方法，特异性好、敏感性高、干扰性小，最低能检测到100个混合模板拷贝/反应，并能有效抑制假阳性结果。本发明提供的引物及方法，通过荧光基团所显示颜色的不同直观准确的判断结果，并只需一台水浴锅即可完扩增,成本低廉，操作方便，是一种简便，快速，低成本的诊断方法，适用于BTV和PPRV的大规模流行病学调查。

摘要： 本发明涉及一种表达16型蓝舌病病毒VP2基因的重组病毒及其构建方法和应用，重组病毒包括病毒载体和包装于所述病毒载体中的带有16型蓝舌病病毒VP2基因的重组穿梭质粒，所述16型蓝舌病病毒VP2基因的序列如SEQ ID NO.1所示。本发明在国内外首次构建并筛选了表达16型蓝舌病病毒（BTV‑16）VP2基因的重组病毒rVTT‑VP2，并对其使用分子生物学方法进行了鉴定。通过10次反复噬斑纯化，连续传20代次，PCR鉴定结果显示VP2基因已整合到重组痘苗病毒基因组中，且未能扩增出TK基因，表明重组痘苗病毒rVTT‑VP2遗传稳定性良好，而且病毒已经纯化。

摘要： 本发明公开了一种BTV‑2型、3型、4型、7型、12型基因型分型鉴别的多重RT‑PCR试剂盒及其检测方法，用于单管同时鉴别检测蓝舌病病毒2型、3型、4型、7型、12型。本方法根据蓝舌病不同基因型病毒VP2基因序列保守区设计了5对PCR特异性引物，利用GeXP原理合成一对非生物来源的通用引物，在各对特异性引物的上下游分别添加通用引物构成5对特异性嵌合引物，用特异性引物进行反转录，结合通用引物及特异性嵌合引物构建多重PCR。利用优化的多重PCR体系及条件，可单管同时鉴别检测BTV 2型、3型、4型、7型、12型等5种基因型中的一种或多种，对BTV其它型及PPRV、FMDV核酸无特异性扩增，最低检测浓度可达到pg级。本发明建立的方法灵敏度高、特异性强、节时省力并且易于观察结果。

摘要： 本发明涉及一种检测蓝舌病病毒、动物流行性出血病病毒和帕利亚姆病毒的RT‑LAMP引物组及试剂盒，包括引物组Ι、引物组Ⅱ和引物组Ⅲ；引物组I由BTV‑F3、BTV‑B3、BTV‑FIP、BTV‑BIP、BTV‑LB和BTV‑LF组成；引物组II由EHDV‑F3、EHDV‑B3、EHDV‑FIP、EHDV‑BIP、EHDV‑LB和EHDV‑LF组成；引物组III由PALV‑F3、PALV‑B3、PALV‑FIP、PALV‑BIP和PALV‑LF组成。本发明RT‑LAMP检测方法具有高特异性和灵敏度，可快速、准确的检测出BTV、EHDV和PALV，具有重大的推广价值。

摘要： 本发明公开了一种可视化口蹄疫、水泡性口炎和蓝舌病多重RT‑LAMP检测方法及引物。本发明设计了多套引物，优化筛选特异性引物组合，首次在LAMP方法中加入了荧光‑淬灭复合探针，探针3’端标记不同的荧光基团，最终成功建立了在同一反应管里鉴别诊断FMDV，VSV和BTV的多重RT‑LAMP检测方法，该法特异性好，敏感性高，最低能检测到1copies/反应病毒RNA，反应时间快，全程只需要65分钟就能完成检测，反应后可通过反应产物观察颜色直接读取结果，可用于临床鉴别诊断和流行病学调查，可在条件较差的基层地区开展现场检疫。

摘要： 本发明属于生物制品制备工艺研发技术领域，公开了一种蓝舌病病毒二价灭活疫苗的制备方法，包括病毒培养、灭活剂制备、灭活操作、浓缩及纯化、抗原乳化、疫苗配比等步骤，本发明结合佐剂、赋形剂与灭活抗原悬液的组合，实现高效诱导反刍动物，同时产生对蓝舌病病毒的免疫应答，有效去除非结构蛋白的干扰，实现了疫苗免疫和野生毒株感染的可区别鉴定。

摘要： 本发明公开了一种用于蓝舌病病毒（Bluetongue virus，BTV）血清型鉴定的RT‑PCR试剂盒及方法，属于兽医传染病检测技术领域。所述RT‑PCR试剂盒主要用于12种血清型的BTV的血清型鉴定，所述的12种血清型分别为BTV‑1、BTV‑2、BTV‑3、BTV‑4、BTV‑5、BTV‑7、BTV‑9、BTV‑12、BTV‑15、BTV‑16、BTV‑21与BTV‑24。所述RT‑PCR试剂盒包括：12种血清型BTV的特异性RT‑PCR扩增引物，核苷酸序列如SEQ ID No.1至SEQ ID No.24所示。本发明具有特异性好、快速简便、成本低廉的优势，不仅可进行12种BTV血清型的准确定型，还可通过扩增产物的测序，获取BTV基因节段2的遗传特征，为病毒的进化特征分析提供数据。