肠杆菌

摘要： 通过室内模拟实验法研究冻融循环下常见肠杆菌Escherichia coli(Ec10538),Salmonella enterica subsp.Enterica(sd-51)和Enterobacter cloacae subsp.Cloacae(Ec7256)在河水中的存活特征及主要影响因素,并分析冻融循环影响细菌存活的机理.结果表明:冻融循环显著抑制3株肠杆菌在河水中的存活,随着冻融循环频次的增加,抑制效应增强;冻融循环下河水中肠杆菌的存活特征与其对冻融胁迫的耐受性和水质有关,Ec7256强于Ec10538和sd-51对冻融胁迫的耐受性,河水水质越好,其对冻融循环的耐受性越强;河水pH值、电导率(EC)和总有机碳(TOC)对3株肠杆菌存活(ttd值)具有显著影响(P<0.05);冻融循环导致细菌细胞表面疏水性(CSH)升高,并在最后一个冻融循环达到峰值,有利于细菌团聚抵抗冻融胁迫;超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性随冻融频次的增加而增加,从而降低冻融胁迫下活性氧对细菌的伤害,进而提高细菌对冻融胁迫的耐受性.

摘要： 为开发可用于铀污染环境修复的优势微生物,本文考察了一株从铀污染场所分离的新型肠杆菌Enterobacter sp. X57在不同的环境因素下对铀的富集行为,并结合相关的表征探索了可能的生物富集机理。结果表明,Enterobacter sp. X57对铀的富集依赖于细菌的代谢活性,且受接触时间、pH值、温度、初始铀(Ⅵ)浓度以及共存离子等多种因素的共同影响。在铀初始浓度100 mg/L、温度303 K、pH=7.00条件下,Enterobacter sp. X57对铀的最大富集量约为175.52 mg/g(干重)。动力学研究结果表明,Enterobacter sp. X57富集铀的过程存在化学吸附、粒内扩散等多个阶段。傅里叶红外光谱(FT-IR)、扫描电子显微镜(SEM)、透射电子显微镜(TEM)、能谱(EDS)以及X射线衍射(XRD)结果表明,溶液中的铀(Ⅵ)与细胞中的羧基、氨基、磷酰基等官能团发生络合,并同时扩散至胞内的细胞质膜上形成铀-磷酸盐矿物。上述结果表明,Enterobacter sp. X57对铀的富集是通过生物吸附和生物沉积矿化的协同作用实现的。

摘要： 植酸酶水解植酸产生可溶性磷酸,广泛应用于饲料、有机及生物肥料;植酸酶性质和植酸酶发酵制备是植酸酶制剂生产的基础。利用实验室前期筛选的降解有机磷Enterobacter asburiae ZSHY1菌株,克隆其植酸酶基因phyE,构建质粒pET28a(+)表达载体,在Escherichiacoli BL21(DE3)中进行异源表达;利用Ni-NTA和Q-Sepharose Fast Flow对重组酶PhyZSHY1-nsp进行纯化,表征其酶学性质及反应动力学参数。结果表明:植酸酶基因phyE全长1359bp,编码452个氨基酸,前20个氨基酸为信号肽。重组酶的酶促反应最适温度和pH值分别为60°C和4.5,在酸性条件下,可以保持60%以上酶活,是中温酸性植酸酶。Mg^(2+)、Cu^(2+)、Zn^(2+)、Al^(3+)等金属离子及SDS对酶促反应有抑制作用,并随着浓度的增加抑制作用增强;植酸钠为底物时,Km为0.859mmol·L^(-1),kcat为16.036s^(-1),kcat/Km为18.66L·s^(-1)·mmol^(-1),说明重组植酸酶PhyZSHY1-nsp具有较好的温度和酸碱稳定性,可被制成酶制剂应用于动物饲料和生物肥料中。

摘要： 耐多药肠杆菌的出现严重威胁着人类健康.AcrAB-TolC外排泵的过量表达是引起肠杆菌多重耐药的主要机制之一,其主要由周质融合蛋白AcrA、外膜通道蛋白TolC和药物质子转运子AcrB构成,受整体调控因子、局部调控因子以及环境中的化学物质等调节.对AcrAB-TolC外排泵的研究,不仅有助于阐明相关耐药本质,还有助于研制有临床意义的外排泵抑制剂(EPIs),为解决肠杆菌多重耐药问题提供新思路.本文对AcrAB-TolC外排泵的结构、调控等方面的研究进展作一综述.

摘要： 目的 研究功能性胃肠病(functional gastrointestinal disorders,FGIDs)患者肠道菌群与心理状况的相关性.方法 选择本院2017年1月—2019年1月诊治的95例FGIDs患者设为观察组,选取同时期健康体检者95例设为对照组,比较两组肠道菌群、心理状况,分析二者和功能性胃肠病关系.结果 观察组真杆菌、消化球菌、双歧杆菌、乳酸杆菌数量显著比对照组少,小梭菌、肠杆菌、肠球菌数量比对照组多(P<0.05);观察组SCL-90评分中焦虑、敌对、抑郁、恐怖、人际关系敏感、偏执、强迫症状、精神病性、躯体化、其他因子分与总分均比对照组高(P<0.05).结论 肠道菌群、心理状况均与FGIDs具有相关性,二者临床应用价值较高,有助于FGIDs的治疗.

摘要： 利用一株肠杆菌发酵烟草浸提液,经发酵、浓缩制备烟草浸膏.采用连续流动法分析发酵前后浸提液化学成分变化;通过GC-MS分析发酵浸膏的香味成分及其应用于卷烟后对感官和烟气香味成分的影响.结果表明:经发酵后浸提液中蛋白质、淀粉、半乳糖醛酸、总植物碱、氨基酸总含量分别降低28.95％,19.44％,18.91％,3.71％,37.45％;经浓缩制备的发酵浸膏具有典型的清甜香风味,且茄酮、β-大马酮、巨豆三烯酮等烟草特征香味成分明显增加;在卷烟中应用该发酵浸膏,烟气中的金合欢醇、β-紫罗兰醇、糠醇、糠醛等具有甜香风味的香味成分有所提高,感官质量得到明显提升.

摘要： 肠杆菌共同抗原(Enterobacterial common antigen,ECA)是由多糖重复单元组成的多聚糖,几乎表达于所有肠杆菌细菌外膜,具有生物学功能.ECA由多基因协同作用而合成,这些基因在肠杆菌细菌基因组上成簇存在,形成ECA抗原基因簇.ECA是重要的毒力因子,在肠杆菌细菌入侵宿主、体内存活等过程中有一定作用.同时,ECA在维持细菌外膜渗透屏障、鞭毛表达、群集运动及抗胆酸胆盐等方面也有重要作用.此外,锚定在细菌脂多糖核心区的ECALPs还是细菌重要的表面抗原,能激发宿主产生高水平抗体,可以作为疫苗研究的靶点.结合笔者的研究,文中对ECA纯化、基因结构和合成、免疫特性、生物学功能及应用等方面进行了综述.

摘要： 细菌耐药性是21世纪国际关注的重要问题,也是全球面临的重大挑战.肠杆菌科细菌是医院感染的重要病原菌之一.近年来,随着抗生素的大量使用,多种肠杆菌科耐药菌,尤其是多重耐药肠杆菌开始大量出现,对人类健康形成了日益严重的威胁.细菌可以通过耐药基因突变或水平转移的方式获得耐药性,通常情况下,可以通过已知的耐药机制预测相应的耐药表型.然而,最近有研究表明,遗传背景和环境因素能够影响耐药基因的表达,给定的基因型并不一定总是产生预期的耐药表型.这种基因型-表型分离的现象极大程度上限制了从遗传学角度预测耐药表型的能力.文中结合最新文献,从遗传背景和环境条件两个方面探讨了多种肠杆菌科细菌耐药基因的表达调控机制,以期为遗传学预测耐药表型以及临床指导用药提供一定的支持.

摘要： 20210401近红外高光谱联合偏最小二乘回归算法快速评估鸡肉腐败//D O I:10.25165/j.ijabe.20211401.5726假单胞菌(Pseudomonass pp.)和肠杆菌(Enterobacteriaceae)是鸡肉冷藏期间(0°C~4°C)的优势腐败菌。该研究通过采集鸡肉样品900~1700 nm的高光谱信息并使用卷积平滑(Savitzky-Golay Smoothing,SGCS).

摘要： cqvip:多重耐药(MDR)革兰阴性菌感染治疗是一个临床难题。由于近年产超广谱β内酰胺酶(ESBL)细菌对多种头孢菌素类抗菌药物耐药、碳青霉烯类抗生素大量或过度使用,导致目前耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)出现并流行,CRE引起的感染与住院时间延长、治疗失败和高死亡率相关。

摘要： 本研究的目的是对碳青霉烯类抗生素不敏感肠杆菌产生碳青霉烯酶情况进行研究，结果表明，儿科临床分离对碳青霉烯不敏感肠杆菌产生碳青霉烯酶均为IMP基因型，其中以IMP-4亚型为主，少部分为IMP-8亚型。在儿科加强对碳青霉烯不敏感肠杆菌的耐药监测，防止此类菌株耐药基因的流行，对指导临床合理使用抗菌药物和有效控制医院感染的传播都具有十分重要的意义。

摘要： 目的:了解上海部分医院肠杆菌科细菌中KPC酶的发生及耐药情况。研究KPC酶的分子生物学特性和blaKPC的转移和传播。方法:在上海4所医院收集亚胺培南或美罗培南(纸片扩散法)中介或耐药的肠杆菌科菌株，PCR检测blaKPC、DNA测序，接合转移试验、质粒电泳、Southern blot。结果:在上海4所医院共收集到7株对亚胺培南药敏结果(纸片扩散法)中介或耐药的肠杆菌科细菌；PCR检测显示有2株菌株携带blaKPC2；接合转移试验、质粒电泳、southern blot试验显示blaKPC-2：是由一个50 kb大小的质粒携带。结论:上海4所医院2006年的KPC酶的检出率还比较低；2株肠杆菌科菌株的blaKPC-2都是由1个50 kb的质粒所携带。

摘要： 目的:了解厄他培南不敏感肠杆菌科细菌的耐药性及金属β内酰胺酶类型。方法:收集武汉同济医院2006年1月-2008年12月临床分离的厄他培南不敏感肠杆菌科细菌13株。用琼脂稀释法及E试验测定13种抗菌药物的MIC；通过改良Hodge试验、PCR、序列分析等方法分析金属β内酰胺酶类型。结果:13株对厄他培南不敏感肠杆菌科细菌中，有8株来自于儿童。13株细菌均为多重耐药株，对阿米卡星敏感率较高，为76.9%。在1株大肠埃希菌、5株肺炎克雷伯菌和2株阴沟肠杆菌中检出IMP-4型金属β内酰胺酶。未检出VIM型金属β内酰胺酶。结论:本院厄他培南不敏感肠杆菌科细菌呈多重耐药，儿童中厄他培南不敏感肠杆菌科细菌的出现率高。共检出8株(61.5%)产IMP-4金属β内酰胺酶的肠杆菌科细菌。首次在中国大肠埃希菌中检出IMP-4型金属β内酰胺酶基因。

摘要： 目的:研究华东地区6个城市的8所医院获得的39株携带KPC-2型碳青霉烯酶肠杆菌科细菌分子流行病学及耐药基因周围环境。方法:采用E试验法测定10种常用抗菌药物的MIC值。利用PCR扩增筛选碳青霉烯酶基因,利用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术进行菌株的同源性分析，通过质粒接合实验、质粒提取、Southern杂交研究编码耐药基因的质粒，构建质粒DNA文库、鸟枪法测序测定耐药质粒的基因序列,生物信息学方法分析基冈结构。结果:所有菌株对碳青霉烯类抗生素均表现出耐药或者敏感性降低，PFGE将主要的36株肺炎克雷伯菌分为了6个主要的克隆型，所有菌株携带的KPC-2基因均位于耐药性质粒上.质粒的大小在40～180 kb之间不等。部分质粒可以通过接合作用转移。对其中1株肺炎克雷伯菌所携带的质粒pKP048进行了详细的基因序列测定，获得了KPC-2基因周围总长20.2 kb的序列。结论:携带KPC-2基因耐药菌株已经在国内多家医院流行，该基因位于1个由Tn3转座子和Tn4401转座子共同整合而成的复杂结构上,这种多个转座子整合而成的复杂转移单元很好地揭示了国内KPC-2基因的传播途径以及遗传背景。

摘要： 喹诺酮类抗生素(Quinolones)是以4-喹诺酮母核为基本结构的合成抗菌药物.自从1962年萘啶酸(Nalidixic acid)用于临床治疗尿路感染以来,越来越多的喹诺酮类药物被开发出来.而1986年第一个氟喹诺酮药物(Fluoroquinolones)诺氟沙星(Norfloxacin)以及1987年环丙沙星(Ciprofloxacin)的开发和应用,大大丰富了这一类药物的抗菌谱.目前氟喹诺酮类药物被广泛用于多种感染的治疗,包括泌尿生殖道感染、骨髓炎、肠道或者呼吸道感染等,并可作为感染预防手段用于中性粒细胞减少症患者及手术病人,还能阻止肝硬化患者自发性细菌性腹膜炎的发生[1].有报道指出,环丙沙星是全球最为常用的抗生素[2].当然随之而来的便是细菌特别是肠杆菌科细菌对喹诺酮类药物的耐药逐年增加[3].细菌对喹诺酮类抗生素的耐药机制主要是:①药物作用靶位(DNA回旋酶以及拓扑异构酶Ⅳ)的改变;②由于外膜通透性降低或药物外排泵的高水平表达而导致细菌体内聚集的药物减少[1].很长时间以来人们一直都认为质粒介导的喹诺酮耐药(PMQR,plasmid-mediated quinolone resistance)机制并不存在[4].但1998年Luis MartínezMartínez等最先报道临床分离菌株肺炎克雷伯菌UAB1携带的质粒pMG252(包含qnr基因)能介导细菌对喹诺酮药物耐药[5].此后世界各地均有报道从肠杆菌科多种细菌上检测到喹诺酮耐药基因qnr,从而使人们对喹诺酮药物的耐药机制有了新的认识. 一.喹诺酮药物的作用机制二.肠杆菌科细菌对喹诺酮类抗生素的耐药现状三.肠杆菌科细菌对喹诺酮药物的耐药机制[1,7,19-20]四.质粒介导的细菌对喹诺酮药物耐药机制五.结论.

摘要： 目的：分析携带blaCTX-M-65、rmtB和fosA3多重耐药质粒pHN7A8的适应性.方法：采用质粒抽提和电转化方法,将犬源大肠杆菌7A8的多重耐药质粒pHN7A8转化入大肠杆菌JM109中,获得转化子7A8JT.采用生长曲线测定和竞争试验方法研究pHN7A8对宿主菌适应性的影响.结果：携带pHN7A8的转化子7A8JT和受体菌JM109的生长曲线相似,但前者对于后者有竞争优势,未发现质粒pHN7A8对宿主菌产生适应性代价.结论：携带blaCTX-M-65、rmtB和fosA3的多重耐药质粒pHN7A8能在宿主菌中稳定遗传,临床上应警惕大量使用或滥用抗菌药物对其形成的选择压力,以防止多重耐药质粒进一步扩散。

摘要： 本文通过药敏试验、PCR试验对某院发现的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的耐药机理进行了分析。结果显示KP等肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素耐药最主要的机制是产生碳青霉烯酶。

摘要： 本文以木糖高效产氢菌Enterobacter.sp CN1为研究对象,通过其甲酸代谢产氢、甲酸对木糖产氢的影响；以及甲酸盐代谢途径中甲酸氢裂解酶激活子基因(fhlA)和NiFe-氢酶基因(hycE,hycG)的克隆、表达以及重组菌株的产氢分析,初步阐述了Enterobacter.sp CN1木糖产氢代谢中的甲酸盐途径,重组菌株的发酵产氢实验表明,与野生菌相比,FHLA蛋白和NiFe-氢酶过量表达的重组菌单位菌体产氢量分别提高了18.8％和23％.

摘要： 为了解动物园动物及其环境中常见病原菌的分布情况,采用菌落计数、细菌分离培养及动物致病性试验等方法,对南京市红山森林动物园的部分动物生存环境的空气、土壤、水进行检测。结果表明，动物舍内外环境空气中不同的培养基上细菌菌落总数：在NA培养基上平均是4.53×103cfu/m3，在MSA上平均3.46×103 cfu/m3，在MAC上平均1.45×103 cfu/m3，在SS上平均0.41×103 cfu/m3，在血培养基上平均5.01×103 cfu/m3。各种动物舍内菌落总数均大于舍外菌落总数。环境水中在各种培养基细菌菌落总数：在NA上平均0.063×103cfu/ml，在MSA上平均0.064×103cfu/ml，在MAC上平均0.08×103 cfu/ml，在SS上无菌生长，在血培养基上平均0.126×103 cfu/ml。环境土壤中在各种培养基细菌菌落总数：在MAC上平均15.48×103 cfu/g，在SS上平均11.57×103cfu/g，在血培养基上平均28.95×103cfu/g。从126份样品中分离到16个菌种127个菌株，其中葡萄球菌有69株，占54.33%（69/127）；肠杆菌有51株，占40.16%（51/127）；链球菌有7株，占5.51%（7/127）。通过动物实验得知，分离得到的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、臭鼻克雷伯氏菌、粘质沙雷氏菌、假结核耶氏菌、福氏志贺氏菌1-5型、聚团肠杆菌和血链球菌等8种致病性较强，松鼠葡萄球菌、表皮葡萄球菌、解糖葡萄球菌和变异链球菌等4种致病性较弱，耳葡萄球菌、头葡萄球菌、施莱福葡萄球菌和唾液链球菌等无致病性。动物舍内外环境中葡萄球菌是主要污染菌。

摘要： 碳青霉烯类抗菌药物在临床上可用于多重耐药的细菌感染，随着临床上碳青霉烯类抗菌药物的广泛使用，产生了对亚胺培南或美罗培南耐药的肠杆菌。由于肠杆菌是临床上重要的医院感染菌，它对碳青霉烯类抗菌药物的耐药给临床抗感染治疗带来了极大困难。本文分析了KPC酶的流行和KPC酶的研究，探讨了其实验室检测。

摘要： 本发明公开了一种合成致新生儿脑膜炎大肠杆菌糖蛋白结合疫苗的大肠杆菌工程菌及用途。涉及构建合成致新生婴儿脑膜炎大肠杆菌O1血清型糖蛋白结合疫苗细胞工厂的方法。它是利用酿酒酵母高效的同源重组效率，基于DNA Assembler的方法，构建O1抗原合成基因簇质粒。在大肠杆菌JM109中转化O1抗原合成基因簇穿梭质粒，通过脂多糖提取，凝胶电泳和银染鉴定质粒；在FLP‑FRT辅助下删除JM109中的waaL和wecA，排除原始不完整O抗原的干扰。改造pET28a(+)质粒，经诱导，合成糖蛋白结合疫苗，借助于AKTA Primeplus蛋白纯化工作站纯化糖蛋白并通过western‑blotting鉴定该糖蛋白。本发明构建的重组大肠杆菌为生物法合成糖蛋白结合疫苗提供了新的思路。

摘要： 本发明公开了一株大肠杆菌ZNYT2，所述大肠杆菌ZNYT2保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏单位简称：CGMCC，保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期：2016年8月23日，保藏编号为：CGMCC NO.12902，分类命名：大肠埃希氏菌。本发明通过优选诱变菌株发酵、双效浓缩、脱色、层析分离、超滤、冻干等工艺，使肠杆菌肽纯品的生产能力大幅度提升，生产成本降低，对肠杆菌肽在畜牧行业领域的应用、推广成为可能。

摘要： 本发明涉及从自然界分离的并可以特异性地杀死产志贺毒素F18型大肠杆菌菌株的肌尾噬菌体科噬菌体Esc‑COP‑1，其具有由SEQ ID NO：1的核苷酸序列表示的基因组（登记号：KCTC 12662BP），以及使用包含所述噬菌体作为活性成分的组合物来预防和治疗产志贺毒素F18型大肠杆菌感染的方法。

摘要： 本发明公开了一种用于对溶液中大肠杆菌浓度检测的传感器的制作方法，制备了一种基于石墨烯的1‑氨基芘和麦芽糖的复合膜，通过嫁接刀豆凝聚素A制成对糖类具有敏感性的改性石墨烯复合膜，并将其涂敷在光纤上制成基于改性石墨烯复合敏感膜涂敷粗锥型的生物传感器。其不仅制作简单容易，另外通过此方法制得的传感器在对溶液中大肠杆菌浓度的检测中，具有灵敏度高、检测效果好，响应时间快，精度和可靠性高的优点。

摘要： 本发明涉及从自然界分离的并可以特异性地杀死肠致病性大肠杆菌的肌尾噬菌体科噬菌体Esc‑CHP‑2，其具有由SEQ ID NO：1的核苷酸序列表示的基因组（登记号：KCTC 12661BP），以及使用包含所述噬菌体作为活性成分的组合物来预防和治疗肠致病性大肠杆菌感染的方法。

摘要： 本发明公开了一段桑源阴沟肠杆菌特异序列和引物组Yt4及其在阴沟肠杆菌分子检测方面的应用。所述特异序列如SEQ ID NO.1所示，引物组Yt4包括引物Yt4‑FIP、Yt4‑BIP、Yt4‑F3、Yt4‑B3，其核苷酸序列依次如SEQ ID NO.2～5所示。基于所述特异序列可以特异性的检测阴沟肠杆菌，尤其是快速区分其它桑树病害，在阴沟肠杆菌的实际检测应用中具有重要的技术支撑价值和应用前景。所述引物组Yt4及构建的方法和试剂盒，使用方便，适用扩增模板非常多样，且检测结果可靠、特异性强、灵敏度高、可视化，在阴沟肠杆菌枯萎病的早期检测、快速检测方面有很好的效果，对桑枯萎病害的监控、预防和控制方面，具有很好的实际推广应用前景。

摘要： 本发明提供了一种使大肠杆菌获得有效NHEJ系统的高通量筛选工具在大肠杆菌基因编辑中的应用，所述使大肠杆菌获得有效NHEJ系统的高通量筛选工具包括：pDual‑Cas9‑Parental质粒载体：含有DNA解旋酶基因、复制子、抗生素抗性基因、核酸酶基因、araC基因、阿拉伯糖启动子和Ⅱs型限制酶识别位点；和pDual‑sgRNA‑lacZ质粒载体：含有靶向lacZ基因的sgRNA序列、组成型表达的强启动子、复制子和抗生素抗性基因。本发明筛选得到的NHEJ系统在大肠杆菌中具有良好的连接效率，并可以进行高效的基因编辑，应用前景广阔。

摘要： 本发明提供了一种大肠杆菌重组核酸、重组大肠杆菌及培养方法和生物合成L‑苏氨酸的方法，涉及生物工程技术领域。本发明所述大肠杆菌重组核酸，利用磷酸烯醇式丙酮酸羧化激酶pck的编码基因、丙酮酸羧化酶pyc的编码基因和苏氨酸操纵子的编码基因对大肠杆菌进行改造，获得一株以葡萄糖为底物的重组大肠杆菌LMT4，利用所述LMT4进行发酵生产，L‑苏氨酸产量以及转化率明显提高，为L‑苏氨酸的工业化生产奠定基础。

摘要： 本发明提供了大肠杆菌重组菌及利用大肠杆菌重组菌生产3,4‑二羟基苯乙醇的方法，大肠杆菌重组菌共表达四种酶，分别为酪氨酸酶、L‑氨基酸氧化酶、酮酸脱羧酶和醇脱氢酶；利用大肠杆菌重组菌，以酪氨酸为底物生产3,4‑二羟基苯乙醇。本发明以酪氨酸为底物，酪氨酸廉价易得，且大多数为生物基来源，不依赖于石化产品，属于可再生资源，此外，由于它的天然属性，在食品、保健品、化妆品领域更易于被消费者认可接受。

摘要： 本发明公开了一种在大肠杆菌内稳定遗传的酵母‑大肠杆菌穿梭质粒及其构建方法。所述的穿梭质粒是基于细菌‑酵母人工染色体，从pGEN‑MCS质粒上通过PCR扩增得到hok‑sok和par元件，然后通过连接将稳定遗传元件hok‑sok和parA构建入细菌‑酵母人工染色体中，进而获得方便克隆长片段DNA、无抗性且在大肠杆菌内稳定遗传的酵母‑大肠杆菌穿梭质粒。优选的，所述的穿梭质粒的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供的穿梭质粒载体，不但可实现酵母、细菌内穿梭，可在酵母中通过同源重组进行多片段DNA组装，还可以稳定的在大肠杆菌中复制、遗传，便于进行DNA提取。