中间锦鸡儿

摘要： 选择中间锦鸡儿优良单株,采集种子进行育苗及区域造林试验,确定优良采种母树林。通过对中间锦鸡儿母树林进行改造,使其纯度高、树体大、单丛结实量提高10%以上。经选育后,中间锦鸡儿母树林种子已经通过内蒙古自治区林木良种审定委员会的审定。

摘要： 以不同地理种群的中间锦鸡儿和小叶锦鸡儿为研究对象,利用高通量测序技术,比较分析了2种锦鸡儿不同地理种群根际土壤细菌多样性、物种组成和丰度的差异及其与植物功能性状的关系,为深入理解锦鸡儿属植物适应干旱环境的微生物学机制提供数据支持。结果表明,2种锦鸡儿根际土壤细菌隶属于22门62纲131目185科304属。优势细菌门为变形菌门、酸杆菌门、拟杆菌门和放线菌门。在属水平上,根瘤菌属、鞘氨醇单胞菌属、RB41和芽孢杆菌属为优势属。中间锦鸡儿与小叶锦鸡儿根际土壤细菌多样性指数(Chao1、ACE、香农和辛普森指数)无明显差异,但主坐标分析表明2种锦鸡儿根际土壤细菌群落结构存在显著差异(P<0.05)。Mantel检验分析表明植物功能性状与根际土壤细菌群落结构存在显著相关性,且冗余分析显示株高、叶干物质含量、比叶面积、叶厚度和叶长是驱动根际土壤细菌群落结构构建的主要性状(P<0.05)。综上所述,中间锦鸡儿和小叶锦鸡儿根际土壤细菌群落结构存在显著性差异,且根际土壤细菌群落结构的变化受到植物性状的显著影响。

摘要： RT-PCR获得中间锦鸡儿叶片组织cDNA,克隆CiPP2C37-like,构建pET-30a::CiPP2C37-like表达载体,利用E.coli表达菌株外源表达中间锦鸡儿2C型丝/苏氨酸蛋白磷酸酶基因。研究了原核表达的中间锦鸡儿2C型丝苏氨酸蛋白磷酸酶(CiPP2C)活性对温度、pH值和金属离子的响应,测算了CiPP2C37-like蛋白对反应底物(一种合成的磷酸肽)的亲和性。结果表明,CiPP2C的最适温度为40°C,最适pH值为7.5,钡离子和锂离子明显提高酶活性,铜离子对酶活性有明显抑制作用。

摘要： 为了探究灌木对土壤线虫群落的影响,采用湿漏斗法(Baermann法),调查了内蒙古草原化荒漠区中间锦鸡儿(Caragana intermedia)灌丛内和灌丛外不同土层(0?10、10?20、30?40 cm)土壤线虫群落组成结构.结果表明:1)中间锦鸡儿灌丛显著提高了灌丛内表层土土壤线虫总数(P0.05);随着土壤深度的增加,灌丛内土壤线虫总数和Shannon-Wiener指数逐渐减少.2)中间锦鸡儿灌丛显著增加了表层土食细菌和食真菌线虫总数;土壤深度显著影响食细菌、植物寄生和杂食捕食线虫总数(P0.05).4)随着土壤深度的增加,中间锦鸡儿灌丛内土壤线虫向居住者类型(persister,cp3–cp5)转变;而灌丛外向殖民者类型(colonizer,cp1或cp2)转变.冗余分析(RDA)结果表明,速效磷(P)和速效钾(K)是影响土壤线虫群落的主要环境因子,且不同属和不同营养类群的土壤线虫对环境的响应不同.

摘要： 探讨中间锦鸡儿对猪毛蒿植株化感影响中的氮素调控内因,为荒漠草原区生态恢复与草原可持续利用提供理论依据和实践指导.通过室外模拟低氮(A,14 g·m?2)、中氮(B,28 g·m?2)、高氮(C,42 g·m?2)3个施氮水平,对比有无中间锦鸡儿浸提液处理条件下,猪毛蒿植株的生长变化及各器官氮素含量变化,探讨不同供氮水平下中间锦鸡儿(Caragana intermedia)茎叶浸提液对猪毛蒿的化感影响.结果表明,不同供氮水平与浸提液两因素交互作用对猪毛蒿株高和地径都无显著影响(P>0.05),但对冠幅增长率产生显著影响(P0.05),对猪毛蒿植株的根冠比无显著影响(P>0.05);不同供氮水平与浸提液对猪毛蒿不同器官含氮量的影响中,加浸提液处理高于不加浸提液处理,在茎叶和果实中更为显著.浸提液对猪毛蒿的根、茎叶和果实含氮量都产生促进作用.

摘要： 中间锦鸡儿分布于干旱和半干旱地区,适应干旱和高温逆境环境,被广泛应用于固沙和水土保持,具有很高的生态价值。microRNA是一类非编码RNA,广泛分布于植物体内,参与干旱、盐、低温等多种胁迫响应。为了鉴定中间锦鸡儿中抗旱相关的miRNA,构建了干旱条件的small RNA文库,通过高通量测序和生物信息学分析,共鉴定得到116个miRNA,88个保守的miRNA属于33个已知miRNA家族和28个新miRNA,差异表达的miRNA中,cin-miR164a、cin-miR164b、cin-miR168a、cin-miR168b在三个干旱处理时间下调表达,cin-novel-3、cin-novel-11、cin-novel-21在干旱处理1和3 h上调表达,cin-novel-26在干旱处理3 h特异表达;28个新miRNA通过psRNATarget在中间锦鸡儿中预测到582个靶基因,在拟南芥中预测到212个靶基因,大多数靶基因参与干旱胁迫响应。这些为后续研究中间锦鸡儿miRNA响应干旱胁迫奠定了基础。

摘要： 为了研究中间锦鸡儿Caragana interm edia纤维素合酶基因(cellulose synthase,CesA)的结构及表达特性,通过同源克隆及RACE(rapid amplification of cDNA end)技术,获得1条中间锦鸡儿CesA基因的全长cNDA序列.NCBI Blast结果显示该基因与野生大豆Glycine soja基因GsCesA3相似度最高(94％),因此命名为CiCesA3.CiCesA3基因cDNA全长为3 475 bp,其中5'UTR长为175 bp,3'UTR长为76 bp,开放阅读框长度为3 225 bp,编码1 075个氨基酸.CiCesA3蛋白预测分子质量为119.89 ku,第16位到第79位氨基酸为CesA蛋白保守的锌指结构(Cx2Cx12FxACx2CxEx5Gx3Cx2C),CiCesA3蛋白C端有6个跨膜结构域,为亲水性蛋白.qRT-PCR检测不同组织中基因表达量的结果表明CiCesA3在叶中表达量最高.以上结果证明中间锦鸡儿CiCesA3基因与其他植物CesA基因相似,并无变异,为阐明中间锦鸡儿纤维素的合成提供了依据.

摘要： NAC转录因子家族是植物中特有的、家族数目较多的一类转录因子家族,对植物生长发育起重要作用.了解CiNAC038的表达调控分子机制,为中间锦鸡儿CiNAC038功能研究奠定基础.以中间锦鸡儿为植物材料,通过染色体步移法克隆启动子序列,并对启动子序列上的响应元件进行分析.构建GUS表达载体,并转化拟南芥,对拟南芥的组织特异性进行表达分析,用ABA诱导转基因植株,研究ABA与CiNAC038的关系.结果显示,克隆了1800 bp的CiNAC038启动子序列,该启动子包含多种顺式元件.成功构建植物表达载体ProCiNAC038:GUS,通过浸花法转化至野生型拟南芥.GUS组织化学染色结果显示,转基因拟南芥幼苗根部染色较深,胚轴无染色;成熟期转基因拟南芥的叶脉、果荚两端、花瓣、花药等组织染色较深,茎无染色.CiNAC038启动子驱动的GUS报告基因主要在植物叶片、根和花的组织器官表达.进一步ABA诱导表达分析发现,GUS染色随着浓度增加颜色越浅.CiNAC038启动子是ABA抑制型启动子.

摘要： 从内蒙古、新疆、青海和山西等中间锦鸡儿的分布区收集不同种源(产地)的中间锦鸡儿家系,共收集21个种源地176个家系,其中内蒙古地区收集18个种源地172个家系.对内蒙古地区不同产地的中间锦鸡儿进行生长量指标与地理气候因子的适应性比较分析,结果表明:中间锦鸡儿在引种地的生长表现与种源地和引种地之间地理气候因子之间的差异性有关,随着经度、纬度、海拔、极端最高温和降水量等5个因子的差异表现出一定规律性变化;对21个不同产地的中间锦鸡儿叶表型特征指标进行方差分析、聚类分析和相关分析,结果表明:不同产地中间锦鸡儿的小叶长、小叶宽、复叶柄长和小叶对数均存在极显著的差异(P≤0.001),差异程度依次为小叶宽＞小叶长＞小叶对数＞复叶柄长,说明不同产地的中间锦鸡儿之间在叶部性状上存在变异;通过对叶表型性状的系统聚类,结果表明:同一产地的中间锦鸡儿材料可能存在着差异性,系统聚类中可能聚到不同的大类中,反之,不同产地的中间锦鸡儿通过叶表型性状的聚类,也可能聚在同一大类中;4个叶表型性状与8个地理气候因子的相关分析表明:除复叶柄长与极端最高温之间存在着显著负相关外,其余指标与各地理气候因子之间的相关性均不显著.

摘要： 本文以我国重要的生物能源灌木--中间锦鸡儿枝叶和种子为材料,根据Genbank中已经发表fad2基因的同源序列,利用PCR技术克隆得到两个基因片段.在GenBank中Blast(GenBank登录号AY957393和AY957394),所得基因片段和同属豆科的Glycine max Gm fad2-2a,同源性高达88 ％,属于fad2基因编码区中间片断.将所得片段经BamHI和SacI酶切后插入表达载体质粒pBI121,构建了反义表达载体pBI121 fad2,并利用农杆菌介导法转入烟草叶片,获得了抗卡那霉素和安苄青霉素的再生烟草植株.初步分析结果表明,与对照烟草相比较,转基因烟草种子脂肪酸含量没有明显差异,而亚油酸则减少了10.3 ％.这为进行下一步柠条分子改良,获得高单不饱和脂肪酸的优质中间锦鸡儿新品种以及改造其它木本生物柴油用木本原料植物奠定了基础.

摘要： 本文选用试验区内行距为20-22米带状种植且生长良好的柠条锦鸡儿、中间锦鸡儿、小叶锦鸡儿等3种西北地区的主要栽培种为试验材料，分析研究了柠条开花结实的特性，以及果荚、种子的发育进程。

摘要： 本发明涉及生物基因工程领域，具体而言，涉及组织特异性启动子CiNAC038及其应用，CiNAC038启动子是组织特异性启动子，能诱导下游基因在拟南芥花瓣、花药和花萼中表达，该启动子可以用于植物花发育的形态结构的研究。

摘要： 本发明涉及生物基因工程领域，具体而言，涉及诱导型启动子CiNAC071及其应用，CiNAC071启动子受ABA和GA诱导，在ABA处理下抑制启动子活性，在GA处理下促进启动子活性，可用于转基因表达载体的构建。利用诱导型启动子更有利于基因功能的研究。

摘要： 本发明涉及生物基因工程领域，具体而言，涉及中间锦鸡儿CiCPK32基因，同时涉及该基因的功能研究和在调控植物抗逆性的应用。本发明利用中间锦鸡儿的转录组数据库，从中间锦鸡儿中克隆得到与非生物胁迫相关的CiCPK32基因，在拟南芥中过表达后，进行干旱、高盐和ABA等胁迫处理，并揭示其功能，为其今后应用于改善农林草植物耐受逆境能力提供理论依据和支持。

摘要： 本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一种发根农杆菌介导的中间锦鸡儿毛状根遗传转化体系的建立及优化方法，选取生长良好的中间锦鸡儿幼苗，选取下胚轴较粗壮的植株进行注射农杆菌悬浮液进行侵染，侵染后选取中间锦鸡儿毛状根检测GUS基因表达情况。毛状根遗传转化体系使基因在中间锦鸡儿毛状根中过量表达，操作简单，表达水平高，可为开展基因功能验证和筛选功能基因提供技术支持；而且待毛状根长到一定大小后切除主根，这时毛状根取代主根成为该中间锦鸡儿植株的一部分及形成转基因毛状根与原植株茎叶的嵌合体，在研究基因功能时，由于植物是个有机的整体，在处理植物根部时，植物整个植株都可能会发生相关形态及生理生化变化，有利于在整体条件下研究基因功能。

摘要： 本发明提供了一种新的编码Senescence_reg‑1类蛋白基因及其蛋白、cDNA序列，该基因来源于豆科锦鸡属灌木中间锦鸡儿(Caragana intermedia Kuang et H.C.Fu)，该基因包括633bp的开放阅读框，编码210个氨基酸。利用所克隆到的cDNA序列，构建植物表达载体，转化野生型拟南芥，获得了转基因植物。转基因拟南芥表型观察发现，该基因可以增加植物抽薹数量、改变植物株型，并且延缓植物衰老，植物表现出明显的滞绿现象。

摘要： 本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一种农杆菌介导的中间锦鸡儿瞬时表达体系的建立方法，选取生长18～22天左右的中间锦鸡儿幼苗，使用1mL无针头注射器，在叶片的背面将农杆菌悬浮液注入叶片内，注射完后，黑暗覆膜24h，揭膜后继续黑暗处理2天，剪取侵染后1～11天样品进行GUS染色，在转化后4天即可观察到GUS报告基因在中间锦鸡儿叶片中的表达，在转化6天时表达量最高，此外，加入Silwet L‑77表面活性剂后GUS报告基因的表达要比不加以及加入其它表面活性剂的效果要好。本发明适用于叶片蜡质层较厚，叶片较小的植物，操作简单，表达水平高而且结果可靠，可为开展基因功能验证和筛选功能基因提供技术支持。

摘要： 本发明公开了一种发根农杆菌介导的中间锦鸡儿毛状根一步转化方法，包括如下步骤：S1.将含有e‑GFP表达载体的质粒电转化进发根农杆菌K599感受态细胞中；S2.制备OD600nm为0.8～0.95的发根农杆菌菌悬液，并加入乙酰丁香酮；S3.培养侵染所用的细菌膏；S4.选取中间锦鸡儿幼苗，斜切幼苗子叶节下1cm处，弃去下部分，将切口进行侵染，然后将幼苗移栽回土中，给幼苗浇1/4B5培养基后，置于光照培养箱中进行培养。本发明通过一步法转化中间锦鸡儿毛状根使基因在毛状根中过量表达，相比于组培方法转化中间锦鸡儿毛状根，这种方法操作更加简单，不需要制备无菌苗，检测时间更短，基因表达水平高且检测方便。

摘要： 本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一种农杆菌介导的中间锦鸡儿瞬时表达体系的建立方法，选取生长18～22天左右的中间锦鸡儿幼苗，使用1mL无针头注射器，在叶片的背面将农杆菌悬浮液注入叶片内，注射完后，黑暗覆膜24h，揭膜后继续黑暗处理2天，剪取侵染后1～11天样品进行GUS染色，在转化后4天即可观察到GUS报告基因在中间锦鸡儿叶片中的表达，在转化6天时表达量最高，此外，加入Silwet L‑77表面活性剂后GUS报告基因的表达要比不加以及加入其它表面活性剂的效果要好。本发明适用于叶片蜡质层较厚，叶片较小的植物，操作简单，表达水平高而且结果可靠，可为开展基因功能验证和筛选功能基因提供技术支持。

摘要： 本发明提供了一种新的编码Senescence_reg‑1类蛋白基因及其蛋白、cDNA序列，该基因来源于豆科锦鸡属灌木中间锦鸡儿(Caragana intermedia Kuang et H.C.Fu)，该基因包括633bp的开放阅读框，编码210个氨基酸。利用所克隆到的cDNA序列，构建植物表达载体，转化野生型拟南芥，获得了转基因植物。转基因拟南芥表型观察发现，该基因可以增加植物抽薹数量、改变植物株型，并且延缓植物衰老，植物表现出明显的滞绿现象。

摘要： 本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一种发根农杆菌介导的中间锦鸡儿毛状根遗传转化体系的建立及优化方法，选取生长良好的中间锦鸡儿幼苗，选取下胚轴较粗壮的植株进行注射农杆菌悬浮液进行侵染，侵染后选取中间锦鸡儿毛状根检测GUS基因表达情况。毛状根遗传转化体系使基因在中间锦鸡儿毛状根中过量表达，操作简单，表达水平高，可为开展基因功能验证和筛选功能基因提供技术支持；而且待毛状根长到一定大小后切除主根，这时毛状根取代主根成为该中间锦鸡儿植株的一部分及形成转基因毛状根与原植株茎叶的嵌合体，在研究基因功能时，由于植物是个有机的整体，在处理植物根部时，植物整个植株都可能会发生相关形态及生理生化变化，有利于在整体条件下研究基因功能。