红鳍东方鲀

摘要： 为探讨哈维氏弧菌Vibrio harveyi感染对红鳍东方鲀Takifugu rubripes白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)基因DNA甲基化的影响,试验选用体质量为(100.5±10.8)g的红鳍东方鲀,设对照组和感染组(哈维氏弧菌浓度为10^(7) cfu/mL),鱼体在菌液中浸泡12 h后转移到无致病性病原的干净海水中继续饲养7 d,然后进行样品采集,检测红鳍东方鲀脾脏的病理变化、IL-6基因的相对表达量及其启动子区域DNA甲基化变化。结果表明:发病组红鳍东方鲀脾脏有大量坏死灶,未发病组无明显坏死灶;发病组脾脏IL-6 mRNA相对表达量显著高于对照组和未发病组(P0.05);未发病组IL-6基因启动子区域DNA甲基化水平明显高于发病组(P<0.05)。研究表明,哈维氏弧菌感染后,红鳍东方鲀表现出不同的抗病能力,且抗病能力不同的红鳍东方鲀在IL-6基因启动子区域DNA甲基化水平存在明显差异。

摘要： 利用柞蚕蛹体外诱导产生抗菌活性物质的特性,制备柞蚕免疫蛹粉作为饲料添加剂,考察其对(58.52±2.07) g红鳍东方鲀幼鱼生长、免疫力和抗病力的影响。试验共分5组:基础饲料组作为空白组,基础饲料中分别添加0.5%、1.0%和2.0%免疫蛹粉作为试验组,另设定1.0%普通蛹粉作为对照组,试验周期共30 d。试验结果表明,随着饲料中免疫蛹粉添加量增加,3个添加组红鳍东方鲀质量增加率也随之提高,与空白组相比均差异显著(P<0.05),其中1.0%和2.0%组显著高于空白组和对照组(P<0.05);随着饲料中免疫蛹粉添加量增加,其对红鳍东方鲀血清免疫指标影响各异,其中0.5%免疫蛹粉组酸性磷酸酶、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性显著高于空白组和对照组(P<0.05),1.0%组碱性磷酸酶和过氧化氢酶活性显著高于空白组和对照组(P<0.05),2.0%组过氧化氢酶活性显著高于空白组和对照组(P<0.05)。体内注射致病菌考察免疫保护率,结果表明,空白组的7 d累计死亡率为100%,红鳍东方鲀摄食免疫蛹粉后明显提高免疫保护率,其中0.5%组最高,达50%。综上,饲料添加0.5%免疫蛹粉对提高红鳍东方鲀质量增加率、免疫力和抗病力的效果最好,可用于实际生产养殖。

摘要： 为查明性别分化相关基因在红鳍东方鲀性别分化关键时期的表达规律,以孵化后40、60、80 d的红鳍东方鲀幼鱼为试验对象,对性腺进行组织学观察,并对采样个体进行遗传性别鉴定,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)的方法研究amhr2、dmrt1、gsdf、cyp19a1a、foxl2、dnmt1基因在遗传型为XX(雌性)和XY(雄性)幼鱼性腺中的表达规律。结果显示,上述基因的表达呈现出明显的性别二态性,其中amhr2基因在孵化后40、60 d XX和XY个体性腺中的表达量差异不显著(P>0.05),但在孵化后80 d的XX个体性腺中的表达量显著高于在XY个体性腺中的表达量(P0.05),但在孵化后80 d时XY个体性腺中的表达量显著高于XX个体性腺中的表达量(P<0.05)。研究结果表明,dmrt1和gsdf基因可能在红鳍东方鲀精巢分化过程中具有重要的作用,cyp19a1a和foxl2可能在卵巢分化过程中具有重要的作用。以上试验结果可为深入研究性别分化相关基因在红鳍东方鲀性别分化过程中的功能奠定基础。

摘要： 为研究生长激素释放激素(growth hormone-releasing hormone,GHRH)基因对红鳍东方鲀Takifugu rubripes生长性状的影响,设计4对可覆盖GHRH基因全序列的PCR引物,采用直接测序法对序列进行分析比对以筛选多态位点。试验群体为随机挑选的219尾红鳍东方鲀,于该群体的6月龄及12月龄时测量其体质量、体长、体高等10个生长相关性状,随后将筛选出的多态位点与生长性状进行关联分析,并进行连锁不平衡及双倍型分析。结果表明:共筛选出7个SNPs位点,分别为C81T、G315C、C1083T、A1524G、G2107A、T2125C和G2256A,其中,C81T、G315C和A1524G 3个位点的多态性与大多数生长性状均存在显著关联性(P<0.05);G2256A与T2125C,G207A与C083T位点均处于连锁不平衡状态,但并非完全连锁;6月龄群体中,双倍型D4和D5的体质量平均值显著高于D3(P<0.05),12月龄群体中,双倍型D5的体质量平均值显著高于D3(P<0.05)。研究表明,C81T、G315C和A1524G 3个位点是对红鳍东方鲀生长有正向影响的优势位点,6月龄群体中,双倍型D4和D5为优势基因型,12月龄群体中,双倍型D5为优势基因型,在后续红鳍东方鲀选育过程中可以优先选择这些位点和基因型。

摘要： 河鲀与唐山早就有着不解之缘,其独特的地理优势和特定的海洋环境使该海域出产的河鲀与众不同。目前全世界发现的100多种河鲀中,我国允许食用的仅有红鳍东方鲀和暗纹东方鲀两种。其中,红鳍东方鲀更被人们称为“河鲀之王”,唐山,正是其主产区。

摘要： 采用微卫星结合混合群体分离分析法技术(SSR-BSA)对红鳍东方鲀群体进行耐低温相关微卫星标记的筛选。首先对300尾红鳍东方鲀幼鱼进行低温处理,分别获得34尾耐低温(S组)和不耐低温个体(D组)。分别在两组中随机挑选15尾提取基因组DNA,构建耐低温和不耐低温DNA混池,然后用148对微卫星引物对其进行扫描。结果发现4个标记(fms45、fms82、fms100和fms182)在耐低温和不耐低温DNA混池中扩增出差异条带。用S组和D组全部个体对4个标记进行单个体验证,结果显示由fms100扩增,携带有116 bp条带的个体在S组和D组的出现频率分别是53%和18%, 132 bp条带的出现频率分别是59%(S组)、24%(D组);由fms182扩增,携带有125bp的个体在S组和D组出现的频率分别是12%和35%,经卡方检验P值均小于0.05,差异显著。本文关于红鳍东方鲀耐低温分子标记的报道,为研究红鳍东方鲀耐低温的遗传基础以及相关分子机制提供了依据,也为开展红鳍东方鲀耐低温分子标记辅助选育提供了良好的基础。

摘要： 红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)是我国重要的海水养殖经济鱼类,探究红鳍东方鲀IgM的结构与功能对其病害防治与免疫系统的研究均有重要意义。本研究克隆获取了红鳍东方鲀IgM的重(H)链恒定(C)区序列(大小为1326 bp),并将获得的IgM序列连接至pET28a表达载体上,利用大肠杆菌BL21进行体外重组表达。SDS-PAGE结果表明:重组蛋白红鳍东方鲀IgM(TrIgM)大小约为62 kDa,重组表达的IgM主要以包涵体形式表达。通过体外复性获得可溶性TrIgM蛋白,将制备的TrIgM蛋白免疫BALB/c小鼠,获得了TrIgM鼠抗血清,Western Blot检测结果表明:制备的鼠抗血清可以与重组TrIgM蛋白和红鳍东方鲀天然血清中的IgM重链蛋白特异性结合。本研究中制备的抗血清可作为检测红鳍东方鲀IgM的特异性抗体,为红鳍东方鲀相关免疫检测提供基础。

摘要： 分析4种河豚鱼肌肉中氨基酸,脂肪酸和矿物质元素等营养成分,并评价其营养价值,为市场发展河豚鱼产业提供数据支持。分别采用干燥法、灰化法、凯氏定氮法、气相色谱法、氨基酸自动分析仪、电感耦合等离子体质谱仪测定4种河豚鱼肌肉中的常规营养成分、氨基酸、脂肪酸和矿物质的含量。结果表明,4种河豚鱼肌肉中的蛋白质含量丰富,脂肪含量较少,蛋白质含量和脂肪含量最高的分别是菊黄东方鲀和红鳍东方鲀。其中,双斑东方鲀的必需氨基酸与总氨基酸的比值(essential amino acid/total amino acid,EAA/TAA)、必需氨基酸与非必需氨基酸的比值(essential amino acid/non-essential amino acid,EAA/NEAA)和必需氨基酸评分(essential aamino acid index,EAAI)最高,且符合联合国粮农组织/世界卫生组织评分(Food and Agriculture Organization/World Health Organization,FAO/WHO)标准,红鳍东方鲀的总饱和脂肪酸(total saturated fatty acids,SFA)和总多不饱和脂肪酸(total poly-unsaturated fatty acids,PUFA)的含量最高。常量元素中K含量较高的是菊黄东方鲀(3 923.641 mg/kg),Ca含量较高的是双斑东方鲀(82.883 mg/kg),微量元素中Zn含量较高的是暗纹东方鲀(12.075 mg/kg)。研究表明,4种河豚鱼营养元素丰富,营养价值高,营养成分的检测对河豚鱼的进一步研究和开发具有重要意义。

摘要： 为查明红鳍东方鲀性腺的发育规律,采用组织学方法对2019年6月至2021年4月采集的不同发育时期红鳍东方鲀样本进行分析。试验结果表明,红鳍东方鲀雌鱼属一次性产卵类型,精巢和卵巢均为封闭型。根据精子和卵子发生过程可知,雄鱼精巢属于全囊成熟型,雌鱼卵巢属于部分同步型。根据卵母细胞的形态结构、卵黄物质的积累和滤泡细胞变化特征,将卵子发生划分为6个时相;根据生精细胞形态结构的变化,将精子发生分为5个阶段。根据性腺的外部形态特征、大小、颜色以及组织学特征等,将红鳍东方鲀卵巢及精巢发育过程划分为6个时期。此外,雄鱼、雌鱼性腺指数在进入发育期后快速升高,Ⅴ期时达到峰值,显著高于发育前水平(P0.05),随性腺发育在Ⅳ期开始显著下降(P0.05)。而雄鱼、雌鱼的肥满度在整个繁殖周期变化并不突出(P>0.05)。上述研究成果对红鳍东方鲀繁殖生物学的认知具有重要意义。

摘要： 为评价循环水养殖红鳍东方鲀Takifugu rubripes的质量安全,以大连市某循环水养殖企业的红鳍东方鲀为研究对象(稚鱼平均体质量2.3 g,幼鱼平均体质量1091.4 g,成鱼平均体质量1718.1 g),采用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS),对不同养殖阶段红鳍东方鲀体内铅(Pb)、镉(Cd)、汞(Hg)、铜(Cu)和铬(Cr)5种重金属的含量进行测定。结果表明:红鳍东方鲀体内不同重金属含量均未超过《食品安全国家标准食品中污染物限量》(GB 2762—2017)、《无公害食品水产品中有毒有害物质限量》(NY 5073—2006)的安全标准;不同养殖阶段红鳍东方鲀体内重金属含量变化表明,Cu和Cr是主要富集的金属元素,其中Cu主要富集在肝脏(P0.05),不同组织部位Cd、Hg、Cu的含量有显著性差异(P<0.05),肝脏、肌肉是重金属的主要富集器官;单因子污染指数、内梅罗综合污染指数计算显示,鱼体重金属污染状况均处于无污染范围;预计日摄入量、致癌风险、非致癌风险评价显示,预计日摄入量对健康风险的贡献较小,儿童、成人的致癌风险均处于可接受范围,非致癌风险可以忽略不计,但儿童的健康风险总体略高于成人。研究表明,循环水养殖模式下红鳍东方鲀的重金属含量水平可控制在安全范围内。

摘要： 本研究通过qRT-PCR对红鳍东方鲀成鱼肾、脑、心脏、脾、肝、精巢和卵巢等组织进行了amh基因的组织表达分析以及不同发育时期(23,30,40,60,80日龄)的红鳍东方鲀幼鱼个体水平的amh表达分析，为今后进一步研究红鳍东方鲀amh基因的功能提供参考。

摘要： 本研究通过荧光实时定量法，研究红鳍东方鲀成鱼各个组织:肾、脑、脾、肝、精巢和卵巢中GATA4基因的相对表达量，获得了GATA4基因在红鳍东方鲀各个组织中的相对表达量的多少，同时对不同发育时期(23,30,40,60,80日龄)的红鳍东方鲀进行GATA4基因的荧光定量分析，获得各个时期的基因表达情况。通过实验结果分析发现成鱼雌雄性腺GATA4基因的相对表达量存在差异，从而获得GATA4基因与性腺发育的关系，而在对不同时期的红鳍东方鲀的GATA4的表达量进行分析，发现在不同时期的表达量存在显著差异。

摘要： 干扰素调节因子(Interferon Regulatory Factor,IRF)是一种多功能的转录因子.本研究采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆了红鳍东方鲀干扰素调节因子2(Interferon Regulatory Factor2,IRF2)基因的全长cDNA.本研究提供了一种简单高效的获取重组红鳍东方鲀干扰素调节因子2蛋白的方法，研究结果为进一步深入研究重组重组红鳍东方鲀干扰素调节因子2蛋白活性及其在红鳍东方鲀健康养殖上的应用奠定了基础工作。

摘要： 脊椎动物性腺发育通常受不同基因的影响,众所周知,在哺乳动物中GATA4基因作为性别决定和性别分化的重要调节因子,然而GATA4在红鳍东方鲀性腺发育的作用鲜为人知.实验应用荧光实时定量分别研究成年的红鳍东方鲀的肾脏、肌肉、脑、脾、肝脏、精巢、卵巢和不同发育时期(23、30、40、60、80日龄)的幼鱼GATA4基因的组织和时间表达谱.实时定量结果显示,成鱼中GATA4基因在精巢中高表达,表达量大约是卵巢中表达量的2倍,在脑中的表达量最低,在肝中最高;红鳍东方鲀精巢、卵巢和肝脏GATA4基因表达量显著高于其他组织(P＜0.05),在肌肉、脾脏、肾脏和脑4个组织中的表达差异不显著.

摘要： 随机选取72尾红鳍东方鲀成鱼，测量其全长、体长、体高、头长、眼后头长、吻长、尾柄长、体周长、体重等18个性状，计算各性状间的相关系数，采用通径分析方法计算以表型形态性状为自变量对体重作依变量的通径系数、决定系数及复相关指数，对各性状的影响大小进行剖分。结果表明，所测各表型性状与体重之间的相关系数均达到显著水平(P<0.05)或极其显著水平(P<0.01);体周长1对体重的直接影响最大，对体重的决定程度最高，是影响体重的主要因素;全长对体重的直接作用较大，间接作用最小;体高、尾柄高对体重的直接作用相对较小。所选表型性状对体重的复相关指数R2=0.950，表明所选性状是影响体重的主要性状。

摘要： 红鳍东方鲀(Fugu rubriper)隶属于脊索动物门(Vertebrata)鱼纲(Pisces)鲀形目(Te-traodontiformes)、鲀科(Tetraodontidae)、东方鲀属(Takifugu),俗称河鲀。红鳍东方鲀是河鲀中毒性最小、肉品质最好的一种,日本人对其情有独钟,每年从我国进口上千吨,经济价值极高。针对日本、韩国广阔的市场前景,以红鳍东方鲀的纯种引进为先导,通过良种选育和种质改良以及养殖技术规范化,保证优良红鳍东方鲀在我国长期、稳定、大量的生产,满足国际市场需要。本文对纯种引进、养殖技术、病害防治、安全加工及活鱼出口的规范化情况进行论述。

摘要： 本研究获得了红鳍东方纯抗菌肽Defensin beta-1成熟肽序列的原核表达产物，并对该产物的生物学活性和功能进行了鉴定。这为深入研究和应用抗菌肽Defensin beta-1提供基础。

摘要： 本研究以红鳍东方鲀为实验材料，研究饲喂转基因产品对红鳍东方鲀生长、血液生理生化指标及生活环境中水质的影响。经过研究发现，饲喂转基因产品对红鳍东方鲀没有明显的影响。此研究为转基因动物产品对水产动物的安全性研究方面提供依据。

摘要： 本发明公开了一种用于鉴别暗纹东方鲀、红鳍东方鲀及杂交东方鲀的特异性引物及其方法，所述特异性引物包括正向引物和反向引物，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1‑2所示。其鉴别方法首先采集待鉴别的河鲀样品，提取基因组DNA；然后以三种河鲀鱼基因组DNA为模板，用引物对其进行PCR扩增；最后对扩增产物进行电泳并根据条带差异进行鉴定。利用本发明的特异性引物鉴别暗纹东方鲀、红鳍东方鲀及杂交东方鲀的方法无需微卫星上机测序等复杂步骤，仅根据条带数量和位置即可快速准确的对三种鱼进行区分，具有稳定性好、实用性强、操作简单、准确率高等优点。

摘要： 本发明生产暗纹东方鲀和红鳍东方鲀之间的杂交种，具体包括分别从暗纹东方鲀的雌性和红鳍东方鲀的雄性提取卵和精液，并实施它们之间的人工授精而得到受精卵之后，对受精卵进行孵化及培育的步骤。根据本发明的方法生产的新的杂交种品种具有快速成长的优点，还能够期待由现有的低的生产率和经济性而衰退的河豚的养殖产业的增加。

摘要： 本发明公开了一种用于鉴别暗纹东方鲀、红鳍东方鲀及杂交东方鲀的特异性引物及其方法，所述特异性引物包括正向引物和反向引物，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1‑2所示。其鉴别方法首先采集待鉴别的河鲀样品，提取基因组DNA；然后以三种河鲀鱼基因组DNA为模板，用引物对其进行PCR扩增；最后对扩增产物进行电泳并根据条带差异进行鉴定。利用本发明的特异性引物鉴别暗纹东方鲀、红鳍东方鲀及杂交东方鲀的方法无需微卫星上机测序等复杂步骤，仅根据条带数量和位置即可快速准确的对三种鱼进行区分，具有稳定性好、实用性强、操作简单、准确率高等优点。

摘要： 本发明公开了一种暗纹东方鲀雌鱼与红鳍东方鲀雄鱼性腺同步成熟方法，采用规格大、体质健壮、性腺发育良好的暗纹东方鲀雌鱼和红鳍东方鲀雄鱼作为亲本，在饲料中添加复合维生素进行营养强化并根据性成熟度进行蛋白饲料调控，并在亲鱼培育过程中采用不同光照培育，水温控制和水流刺激等手段，促进两种亲本的性腺发育，结合一次预催熟生理调控，解决了暗纹东方鲀雌鱼和红鳍东方鲀雄鱼性腺发育不同步的问题，提高了暗纹东方鲀雌鱼和红鳍东方鲀雄鱼杂交育种中卵子、精子的质量，从而提高了亲鱼的催产率和受精率。

摘要： 本发明公开了一种红鳍东方鲀雌鱼与暗纹东方鲀雄鱼杂交育种方法，采用规格大、体质健壮的红鳍东方鲀雌鱼和暗纹东方鲀雄鱼作为亲本，在饲料中添加复合维生素进行营养强化；进入繁育季节后按照一定的性比，采用人工催产鱼受精的方法，在专用的孵化设施内孵化；鱼苗孵出后采用轮虫、卤虫、枝角类、桡足类等动物性生物饵料，小球藻等植物性饵料和海洋红酵母等微生物性饵料进行开口，之后逐步加入人工配合饲料进行训食和投喂；在杂交河鲀的生长阶段，采用逐步分稀法进行养成，最后使得杂交河鲀的生长速度比暗纹东方鲀快30%，提前3‑6个月上市；肉质比红鳍东方鲀更鲜美，白汁杂交河鲀的口味与暗纹东方鲀相差无几。

摘要： 本发明公开了一种提高暗纹东方鲀母本和红鳍东方鲀父本杂交受精率的方法，主要采用规格大、体质健壮、性成熟的暗纹东方鲀母本和红鳍东方鲀父本作为繁殖亲本，经过一次预催熟生理调控，通过干法使精子与卵子充分混匀，调节渗透压使精子与卵子结合，提高了暗纹东方鲀母本和红鳍东方鲀父本杂交育受精率，为提高淡水鱼类与海水鱼类杂交受精率具有重要的参考意义。

摘要： 本发明生产暗纹东方鲀和红鳍东方鲀之间的杂交种，具体包括分别从暗纹东方鲀的雌性和红鳍东方鲀的雄性提取卵和精液，并实施它们之间的人工授精而得到受精卵之后，对受精卵进行孵化及培育的步骤。根据本发明的方法生产的新的杂交种品种具有快速成长的优点，还能够期待由现有的低的生产率和经济性而衰退的河豚的养殖产业的增加。

摘要： 本发明是一种菊黄东方鲀与红鳍东方魨杂交三倍体的诱导方法，其主要步骤为选取发育成熟的红鳍东方鲀雄鱼和雌鱼、菊黄东方鲀的雄鱼和雌鱼，分别采集成熟卵和精液，人工受精，进行正反杂交；受精后3-7min用30-40°C的海水热休克处理5-20min，然后在15-20°C的海水中孵化，完成热休克法的三倍体诱导。本发明工艺简单，成本低，可操作性强，并且大大提高菊黄东方鲀与红鳍东方魨杂交三倍体的诱导率，据实验统计，所获得的菊黄东方鲀与红鳍东方魨杂交三倍体的人工诱导率高达100％，获得的三倍体具有良好的经济效益和社会效益。

摘要： 本发明公开了一种红鳍东方鲀胃肠排空参数评估方法，涉及水产养殖技术领域，包括以下步骤：a1、选取实验鱼：随机挑选健康无伤大规格红鳍东方鲀苗种3000尾，本发明通过设置全面地评估方法对红鳍东方鲀苗种的胃肠排空模式作出详细评估，并且开展了小型循环水系统条件下不同投喂频率的胃肠排空模式研究，旨在建立符合红鳍东方鲀大规格苗种胃肠排空特征最佳数学模型，从而解决了现今关于红鳍东方鲀，尤其是大规格苗种阶段的胃肠排空模式研究资料尚未见报道，进而不能够给红鳍东方鲀养殖者提供有效的参数，进而给相应的红鳍东方鲀养殖者制定投喂策略带来了一定的麻烦，从而给红鳍东方鲀大规格苗种早期培育带来了极大困难的问题。

摘要： 本发明提供一种红鳍东方鲀不同生长阶段的投喂方法。仔鱼阶段将轮虫进行泼洒投喂，轮虫投喂的密度为10‑15个/ml，每日投喂一次；稚鱼阶段将卤虫进行泼洒投喂，卤虫的投喂密度为5‑10个/ml，每日投喂两次；卤虫投喂一周后添加颗粒饲料进行驯化，饲料以小颗粒浮料为主；幼鱼阶段投喂颗粒饲料，总投喂量为幼鱼总质量的1％‑3％，每日投喂四次；成鱼阶段使用颗粒饲料进行投喂，总投喂量为成鱼总质量的2％‑3％；亲鱼阶段以颗粒饲料为主要食物，使用玉筋鱼、鳀鱼、鱿鱼、沙蚕等进行辅助投喂，总投喂量为亲鱼总质量的2％‑4％。本发明合理利用饵料，降低养殖成本，饵料转化率较高。