宿主细胞

摘要： 狂犬病是由狂犬病病毒(RABV)引起的重要人兽共患病,全球每年有超过6万人因感染狂犬病而死亡,主要发生在亚洲和非洲地区。由于对狂犬病的致病机制尚未解析,目前缺少针对狂犬病的有效药物,因此一旦发病,死亡率接近100%。病原感染宿主细胞通常是一个能量需求的过程,深入研究RABV调控宿主能量代谢的机制不仅有助于拓展我们对RABV致病机制的理解,而且可以为狂犬病有效治疗制剂的研发奠定理论基础。

摘要： 衣原体是一类专性细胞内寄生的原核细胞性细菌,具有双相发育特点,由于其缺乏合成能量的ATP酶,需要完全依赖宿主细胞提供,但又不同于病毒,其内含有DNA、RNA两种核酸,以二分裂形式进行繁殖。目前共11属,21个种,其中肺炎衣原体、鹦鹉热衣原体可引起肺炎,以肺炎衣原体为主,鹦鹉热衣原体引起肺炎较少见,临床表现无特异性,加之临床医生对其认识不足,可能导致误诊及漏诊[1]。本文旨在通过描述1例鹦鹉热衣原体肺炎的诊治过程,以提高临床医生对该病的认识。

摘要： 细胞代谢包括糖酵解、三羧酸循环、氨基酸代谢、脂质代谢、核苷酸代谢等多种代谢途径。代谢组学是鉴定宿主细胞代谢变化的重要手段。近几十年来,代谢组学研究领域取得了巨大进展,已广泛应用于人类和动物的生物学研究,可用于鉴定疾病中的代谢产物,为进一步筛选生物标记分子、开发靶向药物、靶向代谢途径设计新型疫苗等奠定基础。病毒在长期进化过程中形成了多种策略操控机体代谢网络,为自身复制提供资源,但不同病毒调控细胞代谢的途径也不相同。非洲猪瘟病毒(ASFV)可调控宿主细胞代谢,进而促进病毒复制。

摘要： 新型冠状病毒肺炎疫情暴发以来,全世界人民都遭受到身体、经济和心理等不同层面的重创。新型冠状病毒可通过肾小管上皮细胞表达的血管紧张素转换酶Ⅱ进入宿主细胞感染机体,而肾素-血管紧张素-醛固酮系统抑制剂(RAASi)可上调血管紧张素转换酶Ⅱ表达,有可能增加病毒感染性并导致器官功能障碍。

摘要： 支原体在宿主细胞内大量生长繁殖,引发宿主细胞的免疫反应,进而损害细胞正常功能。1961年在美国Hale首次从患乳腺炎的牛乳中分离到牛支原体,在我国1983年黎济申首次从患乳腺炎的牛乳中分离到牛支原体。随着肉牛异地育肥模式的逐渐扩大,我国多个地区相继暴发支原体引起的传染病,导致牛群发病,且死亡率较高,严重损害养牛业的经济效益,阻碍养牛业健康发展。及时诊断牛支原体病有利于牛场采取有效措施来降低扩散风险,减少经济损失。

摘要： 结核分枝杆菌是引发结核病的一种人兽共患病原菌,严重危害人类健康以及公共安全,作为一种兼性胞内感染菌,其引发结核病的关键是破坏宿主免疫防御机制以提高其在胞内生存能力.结核分枝杆菌感染宿主细胞的过程中,分枝杆菌效应蛋白通过与宿主靶蛋白的相互作用来影响细胞凋亡、炎性因子表达、抗原提呈等多种免疫效应,从而逃逸宿主细胞的杀伤,并在机体免疫状态低下时复发从而引起结核病.深入了解结核分枝杆菌效应蛋白和宿主靶蛋白的相互作用及分子机制,将为结核病的防治提供新的线索.

摘要： 细胞凋亡是一种通过多基因调控的程序性细胞死亡过程,不仅维持机体的动态平衡,还是一种天然的防御机制。为了在细胞内生存,专性胞内寄生菌(贝纳柯克斯体、衣原体、立克次氏体)和一些兼性胞内寄生菌(结核分枝杆菌、耶尔森氏菌、伤寒沙门氏菌、单核细胞增生李斯特菌、志贺氏菌、布鲁氏菌等)通过干扰细胞外或细胞内的细胞凋亡信号的传导来调控宿主细胞凋亡,甚至能够利用胞葬作用逃逸宿主的免疫系统。希望通过本文和广大的同道研究者一起努力共同推动胞内寄生菌与宿主细胞凋亡相互作用的机制研究。

摘要： 【目的】明确石斑鱼虹彩病毒(Singapore grouper iridovirus,SGIV)主要衣壳蛋白(Major capsid protein,MCP)的生物学功能,为阐明SGIV感染致病机理及研发抗病毒产品提供理论依据。【方法】使用实时荧光定量PCR检测SGIV感染过程中MCP基因的转录时序及其在SGIV感染石斑鱼脾脏、肝脏、肾脏、肠道、胃和鳃组织中的表达水平;将SGIV MCP基因分别克隆至真核表达载体pEGFP-N3和pcDNA3.1上,构建重组质粒pEGFP-N3-MCP和pcDNA3.1-MCP,然后以重组质粒pEGFP-N3-MCP转染石斑鱼脾细胞(Grouper spleen cell,GS)进行亚细胞定位分析,同时以重组质粒pcDNA3.1-MCP转染胖头鲤细胞(Fathead minnow cells,FHM)构建能稳定表达MCP蛋白的FHM细胞系(FHM-MCP),用于分析MCP蛋白对宿主细胞生长增殖及SGIV感染压力下细胞存活率和病毒复制的影响。【结果】在SGIV感染8 h后即可检测到MCP基因的特异性转录,即MCP基因是一个晚期基因。在SGIV感染24 h后,MCP基因在石斑鱼脾脏中的相对表达量最高,其次是在肝脏、肾脏和肠道组织中,而在胃和鳃组织中的相对表达量较低,提示胃和鳃组织并非SGIV感染的主要靶器官。SGIV的MCP蛋白主要定位于细胞核附近的胞质中。细胞生长增殖曲线和细胞计数结果均证实,MCP蛋白能调节细胞生长及促进细胞分裂增殖。在SGIV感染后24和48 h,FHM-MCP细胞的存活率均显著高于FHM-Vector细胞(真核表达载体pcDNA3.1转染FHM细胞),其存活率分别是FHM-Vector细胞的1.12和1.15倍。此外,FHM-MCP细胞在SGIV感染24和48 h后,其病毒滴度均高于FHM-Vector细胞,即MCP蛋白能促进SGIV病毒复制。【结论】SGIV的MCP基因是一个晚期基因,其编码蛋白主要定位于细胞核附近的胞质中,通过促进宿主细胞分裂增殖及病毒复制,最终提高SGIV的病毒滴度和感染力。

摘要： 细胞凋亡是一种通过多基因调控的程序性细胞死亡过程,不仅维持机体的动态平衡,还是一种天然的防御机制.为了在细胞内生存,专性胞内寄生菌(贝纳柯克斯体、衣原体、立克次氏体)和一些兼性胞内寄生菌(结核分枝杆菌、耶尔森氏菌、伤寒沙门氏菌、单核细胞增生李斯特菌、志贺氏菌、布鲁氏菌等)通过干扰细胞外或细胞内的细胞凋亡信号的传导来调控宿主细胞凋亡,甚至能够利用胞葬作用逃逸宿主的免疫系统.希望通过本文和广大的同道研究者一起努力共同推动胞内寄生菌与宿主细胞凋亡相互作用的机制研究.

摘要： 基因的初始转录本经选择性剪接可以生成不同的RNA亚型,RNA剪接的多样性丰富了细胞蛋白分子的表达,并与物种的生物进化、个体细胞的分化和环境调控等功能相关。严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)是引起2019年以来全球流行的新型冠状病毒肺炎的病原菌。自该病毒2020年初被鉴定后,研究发现SARS-CoV-2入侵宿主细胞和完成复制传播过程均涉及RNA的选择性剪接,病毒miRNA、非结构蛋白与宿主RNA结合蛋白、干扰素刺激基因相关蛋白等不同程度地介导或参与了这些选择性剪接过程。本文综述选择性剪切在SARS-CoV-2感染过程中发挥调控作用的相关研究,以促进对SARS-CoV-2病毒和宿主细胞之间相互作用的进一步了解。

摘要： 为了研究蜂胶黄酮对宿主细胞感染不同结构病毒后产生抗感染因子的影响,将蜂胶黄酮从最大安全浓度250μg·mL-1倍比稀释5个浓度,与TGEV、PPV分别一起加至长成单层PK-15细胞培养体系中,ELISA法测定蜂胶黄酮对TGEV或PPV感染PK-15细胞后产生IFN-β、IFN-γ和iNOS抗感染因子的含量.结果显示,与病毒对照组比较,在感染TGEV后2h、12h的前期,蜂胶黄酮可以显著提高PK-15细胞产生IFN-β、IFN-γ和iNOS含量的能力;在感染PPV后2h、12h的前期,只有较高浓度的蜂胶黄酮可以显著提高PK-15细胞产生IFN-β、IFN-γ和iNOS含量的能力.PK-15细胞在感染病毒后24h、48h和72h,蜂胶黄酮对提高TGEV感染PK-15细胞后产生抗感染因子能力多明显高于PPV.结论,蜂胶黄酮提高有囊膜的TGEV感染宿主细胞PK-15细胞产生抗感染因子能力高于无囊膜的PPV.

摘要： 中华绒螯蟹螺原体(Spiroplasma eriocheiris)是一种新型的水生甲壳动物病原,但是随着研究的发现,该病原不仅可以侵染水生甲壳动物,同时也可以侵染新生小鼠,并使其患类似于白内障的症状,所以为了进一步研究螺原体侵染小鼠细胞的机制以及宿主的相关免疫反应,本实验通过以小鼠的胚胎成纤维细胞(3T6细胞)为模型,分析螺原体侵染小鼠细胞的机制,以及宿主细胞的相关免疫反应.

摘要： 本实验室研究发现,运用Transwell小室将球虫与宿主细胞隔离开来,进行短时间的间接共培养,测定共培养期间宿主细胞培养上清中细胞凋亡相关因子Caspase家族主要蛋白的活性后的结果表明,间接共培养下球虫会在一定程度上抑制宿主细胞的凋亡.制备裂殖子多抗,收集共培养期间宿主细胞所处的下室的培养上清中的所有柔嫩艾美耳球虫裂殖子的蛋白,并对这些蛋白进行高效液相色谱串联质谱分析.结果分析出部分柔嫩艾美耳球虫裂殖子的外分泌蛋白,这些蛋白或许与细胞凋亡抑制相关.将这些蛋白进行单个研究,为今后的研究提供明星因子的参考以及理论依据.

摘要： 通过胞内体内陷形成多泡体再与质膜融合释放的细胞外囊泡,通常被称exosomes,中文名外泌体,是一种能被大多数细胞分泌的微小膜泡,具有脂质双层膜结构,直径大约30-150nm.人们发现这种微小膜泡中含有细胞特异的蛋白、脂质和核酸,能作为信号分子传递给其他细胞从而改变其他细胞的功能.利用高通量RNA-seq技术对miRNA进行测序，找到19个差异表达的miRNA，通过GO富集分析发现与免疫系统进程和细胞杀伤以及细胞增殖相关，pathway分析发现这些miRNA和细胞生长及死亡以及免疫系统和寄生虫入侵相关。

摘要： 杆状病毒是一类具有囊膜包裹的双链环状DNA病毒,在自然界中以节肢动物(主要是昆虫)作为专一性宿主进行感染和传播.杆状病毒的表型之一:包涵体衍生型病毒(ODV)主要通过宿主经口食入引起原发感染.多种ODV囊膜蛋白在原发感染过程中发挥作用,它们被称为经口感染因子(PIFs).本文从五个方面综述了最早被鉴定且研究最为深入经口感染因子P74的研究成果.P74含有三个跨膜结构域(TM)和两个功能结构域:Baclo_P74_N supeffamily和Baclo_P74superfamily.在ODV释放过程中,P74会分别受到OB自身的碱性蛋白酶和宿主中肠胰蛋白酶酶切,P74及其酶切产物和PIF1、PIF2、PIF3形成的稳定复合物有微弱相互作用.作为ODV结合蛋白,P74可以和BBMV中一个大小约为35kDa的蛋白结合,介导病毒结合到宿主细胞上.对P74结构和功能的深入研究将促进对昆虫杆状病毒原发感染详细分子机制的认识,并为农业生产病害控制提供参考.

摘要： 衣原体属(Chlamydia)病原生物是一类严格的真核胞内寄生微生物,属于革兰氏阴性细菌,包括引起沙眼和泌尿生殖道感染的沙眼衣原体(C.trachomatis)、引起呼吸道感染的肺炎衣原体(C.pneumoniae)、以及人畜共患病鹦鹉热衣原体(C.psittaci)等,是一类引起人、畜、家禽等感染的重要病原体.由于其胞内寄生特性,衣原体可能具有逃避宿主免疫识别的能力,所引起的感染呈隐蔽性,一般不引起明显的症状.

摘要： 研究不同亚群猪瘟病毒在不同细胞上的生长特性及病毒含量的差异性,本研究用3株病毒在PK-15及ST细胞上进行传代培养,收集上清液,用三种不同的方法测定了病毒含量.研究表明,不同亚群猪瘟病毒对宿主细胞有偏嗜性,1.1群毒株在PK-15细胞上的增殖效率显著高于ST细胞,感染后12日,病毒滴度可达5×106TCID50/ml;2.1群毒株在ST细胞上传代较稳定,病毒滴度可达106TCID50/ml;三种病毒含量测定方法存在较好的相关性.

摘要： 内质网是细胞蛋白合成和折叠的重要场所,当细胞处于萄葡糖不足、钙离子平衡被破坏、病毒感染等情况下,大量未折叠或错误折叠蛋白在内质网堆积,即可引起内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS),为了缓解ERS,细胞启动未折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR),UPR活化后能够产生多个效应因子发挥多个功能以维持内质网的稳态.近年来,越来越多的研究表明细胞ERS在病毒感染过程中发挥重要的作用,许多病毒已进化出控调UPR以利于自身的感染.目前,尽管多个研究表明CSFV的感染过程与内质网密切相关,但有关ERS在CSFV感染过程中的具体作用还未见报道.通过对CSFV感染与细胞ERS两者关系的研究,发现CSFV感染可诱导ERS产生,并通过瞬间激活UPR中IRE1通路来促进自身的复制,为进一步揭示CSFV与宿主之间相互作用及CSFV的感染机制提供了科学依据.

摘要： 内质网是细胞蛋白合成和折叠的重要场所,当细胞处于萄葡糖不足、钙离子平衡被破坏、病毒感染等情况下,大量未折叠或错误折叠蛋白在内质网堆积,即可引起内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS),为了缓解ERS,细胞启动未折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR),UPR活化后能够产生多个效应因子发挥多个功能以维持内质网的稳态.近年来,越来越多的研究表明细胞ERS在病毒感染过程中发挥重要的作用,许多病毒已进化出控调UPR以利于自身的感染.目前,尽管多个研究表明CSFV的感染过程与内质网密切相关,但有关ERS在CSFV感染过程中的具体作用还未见报道.通过对CSFV感染与细胞ERS两者关系的研究,发现CSFV感染可诱导ERS产生,并通过瞬间激活UPR中IRE1通路来促进自身的复制,为进一步揭示CSFV与宿主之间相互作用及CSFV的感染机制提供了科学依据.

摘要： 内质网是细胞蛋白合成和折叠的重要场所,当细胞处于萄葡糖不足、钙离子平衡被破坏、病毒感染等情况下,大量未折叠或错误折叠蛋白在内质网堆积,即可引起内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS),为了缓解ERS,细胞启动未折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR),UPR活化后能够产生多个效应因子发挥多个功能以维持内质网的稳态.近年来,越来越多的研究表明细胞ERS在病毒感染过程中发挥重要的作用,许多病毒已进化出控调UPR以利于自身的感染.目前,尽管多个研究表明CSFV的感染过程与内质网密切相关,但有关ERS在CSFV感染过程中的具体作用还未见报道.通过对CSFV感染与细胞ERS两者关系的研究,发现CSFV感染可诱导ERS产生,并通过瞬间激活UPR中IRE1通路来促进自身的复制,为进一步揭示CSFV与宿主之间相互作用及CSFV的感染机制提供了科学依据.

摘要： 本发明公开了一种组合利用内切型和外切型琼胶酶降解琼脂或或粗琼胶(红藻多糖提取物)获得高纯度新琼二糖的方法。本发明涉及一种琼胶酶AgaA和一种双功能酶AgaB，其中AgaA为内切型琼胶酶，能够迅速降解琼脂或琼脂糖产生新琼二糖、四糖和六糖，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；AgaB为双功能外切型琼胶酶，同时具有降解琼脂糖和紫菜多糖(即硫酸酯化的琼脂糖)的活性，能够降解琼脂或粗琼胶(红藻多糖提取物)或其寡糖产生单一产物新琼二糖，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。同时本发明还公开了利用基因工程技术重组表达和制备琼胶酶的方法。本发明所涉及的制备高纯度新琼二糖的方法及特异性琼胶酶(或紫菜多糖酶)，在制备琼胶寡糖领域有着广阔的应用前景。

摘要： 本发明提供具有源自谷氨酸棒杆菌的SEQ ID NO：1或2的核苷酸序列的新型启动子核酸分子，包括所述启动子的重组载体，用所述载体转化的宿主细胞和利用所述宿主细胞表达目的基因的方法。

摘要： 本发明提供从粗糙脉孢菌获得的S-腺苷甲硫氨酸-6-N-赖氨酸-甲基转移酶，编码其的多核苷酸，包含所述多核苷酸的载体和宿主细胞，以及通过培养所述宿主细胞而生产三甲基赖氨酸的方法。

摘要： 本发明涉及新的宿主细胞和产生蛋白质的方法。更具体地说，本发明涉及对表达异源蛋白质有用的宿主细胞，为了表达明显降低水平的金属蛋白酶，该宿主细胞已经遗传修饰过。此外本发明涉及产生异源蛋白质的方法，该方法包括在适当的生长培养基中培养所述宿主细胞，接着回收所需蛋白质。

摘要： 本发明公开了一种感受态宿主细胞的制备方法以及一种快速高效将外源物质转入宿主细胞的方法及其应用，核心在于采用常规真空冷冻干燥技术对宿主细胞进行处理得到感受态宿主细胞，然后用含有外源物质的水溶液复水感受态宿主细胞，将复水后的宿主细胞置于恒温培养箱中培养后转移到条件培养基中进行筛选得到外源物质转化菌。利用本发明可实现外源物质快速转化宿主细胞，具有操作简单、损伤性小、成本低等优点。通过本发明的实施，可以用非常简便的方式获得成批量的感受态细胞，适用于外源物质的活性和功能研究等应用领域。

摘要： 本发明提供具有源自谷氨酸棒杆菌的SEQ ID NO：1或2的核苷酸序列的新型启动子核酸分子，包括所述启动子的重组载体，用所述载体转化的宿主细胞和利用所述宿主细胞表达目的基因的方法。

摘要： 本发明提供从粗糙脉孢菌获得的S－腺苷甲硫氨酸－6－N－赖氨酸－甲基转移酶，编码其的多核苷酸，包含所述多核苷酸的载体和宿主细胞，以及通过培养所述宿主细胞而生产三甲基赖氨酸的方法。

摘要： 本发明涉及新的宿主细胞和产生蛋白质的方法。更具体地说，本发明涉及对表达异源蛋白质有用的宿主细胞，为了表达明显降低水平的金属蛋白酶，该宿主细胞已经遗传修饰过。此外本发明涉及产生异源蛋白质的方法，该方法包括在适当的生长培养基中培养所述宿主细胞，接着回收所需蛋白质。

摘要： 本发明提供一种具有甘油－3－磷酸脱氢酶活性并与如SEQ ID NO：1表示的氨基酸序列具有80％或更多同源性的多肽和一种具有甘油－3－磷酸磷酸酶活性并与如SEQ ID NO：2表示的氨基酸序列具有80％或更多同源性的多肽。本发明还提供一种生产甘油的方法，所述方法包括：培养用包含多核苷酸的载体转化的宿主细胞，所述多核苷酸包括编码如SEQ ID NO：1表示的氨基酸序列的第一个多核苷酸和编码如SEQ ID NO：2表示的氨基酸序列的第二个多核苷酸，所述第一个多核苷酸和第二个多核苷酸与合适的调节序列可操作地连接；从培养物中回收甘油。

摘要： 本发明涉及新的宿主细胞和产生蛋白质的方法。更具体地说,本发明涉及对表达异源蛋白质有用的宿主细胞,为了表达明显降低水平的金属蛋白酶,该宿主细胞已经遗传修饰过。此外本发明涉及产生异源蛋白质的方法,该方法包括在适当的生长培养基中培养所述宿主细胞,接着回收所需蛋白质。