通过荧光定量PCR检测转基因小麦生长期内根际土壤中荧光假单胞菌数量的方法

摘要

转基因作物对土壤根际微生物的影响是环境生物安全研究的重要方面。本文对转基因抗病小麦根际土壤中荧光假单胞菌数量进行绝对定量，建立了实时荧光定量PCR（Real-TimeQPCR）检测体系。应用该反应体系，对转基因小麦各个生长时期根际土壤的荧光假单胞菌拷贝数进行绝对定量。结果表明，该设计引物具有较好特异性；Real-TimeQPCR反应的扩增曲线中各梯度标准质粒的循环阈值（Ct值）间隔均匀，熔解曲线峰值较突出，该标准曲线的相关系数R