一种利用抗冻蛋白-内含肽作为纯化标签实现重组蛋白纯化的方法和应用

摘要

本发明公开了一种利用抗冻蛋白‑内含肽序列作为纯化标签实现外源重组蛋白分离纯化的方法和应用，属于生物技术领域。该方法包括：(1)构建带有抗冻蛋白‑内含肽纯化标签和重组蛋白基因的重组质粒，将其转入表达宿主细胞，获得重组工程菌；(2)培养重组工程菌，诱导外源蛋白表达；(3)细胞破碎后用冰作为吸附介质从细胞破碎上清液中一步分离纯化带有抗冻蛋白‑内含肽纯化标签的融合蛋白，之后诱导内含肽的N端发生断裂反应，释放目的蛋白，经过透析后再次用冰吸附去除纯化标签从而得到去除纯化标签的目的蛋白。本发明提供了一种低成本、无需色谱柱和色谱填料、操作简单、去除纯化标签的实现外源重组蛋白分离纯化的方法及应用。