人类免疫缺陷病毒复制的抑制剂

摘要

阐述了式I的化合物，包括其可药用盐，和用于治疗人类免疫缺陷病毒（HIV）感染的组合物和方法：

说明书

发明领域

本发明涉及用于治疗人类免疫缺陷病毒（HIV）感染的化合物、组合物和方法。更特别地，本发明提供HIV的新型抑制剂、含有此类化合物的药物组合物和使用这些化合物治疗HIV感染的方法。本发明还涉及制备下述化合物的方法。

发明背景

获得性免疫缺陷综合征（AIDS）是被HIV感染的结果。HIV仍然是重大的全球公共健康问题。目前对HIV感染个体的疗法通常由批准的抗逆转录病毒剂的组合构成。超过二十多种药物目前批准用于HIV感染——作为单一药剂或作为固定剂量组合或单片方案（singletablet regimens），后两种含有2-4种批准药剂。这些药剂属于许多不同的种类，靶向病毒酶或靶向病毒蛋白在病毒复制周期中的功能。因此，药剂被分类为核苷酸逆转录酶抑制剂（NRTI）、非核苷酸逆转录酶抑制剂（NNRTI）、蛋白酶抑制剂（PI）、整合酶链转移抑制剂（INI）或进入抑制剂（其中一种，马拉维若（maraviroc），靶向宿主CCR5蛋白，而另一种，恩夫韦肽，是靶向病毒gp160蛋白的gp41区域的肽）。此外，没有抗病毒活性的药代动力学增强剂（可比司他（cobicistat））最近已被批准与需要增强的抗逆转录病毒剂（ARV）组合使用。

尽管有整套的药剂和药物组合，但部分由于慢性给药以对抗感染的需要，医学上仍然需要新型抗逆转录病毒剂。与长期毒性有关的严重问题有据可查，以致需要解决和预防这些共病（例如CNS、CV/代谢、肾病）。由于耐药病毒株的存在或出现或由于归结于休药期或不良副作用的不依从性，当前疗法的不断增长的失败率也仍然是一个问题。

在本领域中现在已描述了某些潜在治疗性的化合物并阐述在Blair, Wade S.等人Antimicrobial Agents and Chemotherapy (2009), 53(12), 5080-5087, Blair,Wade S.等人PLoS Pathogens (2010), 6(12), e1001220, Thenin-Houssier, Suzie；Valente, Susana T. Current HIV Research, 2016, 14, 270-282和下列PCT专利申请号：WO 2012065062、WO 2013006738、WO 2013006792、WO 2014110296、WO 2014110297、WO2014110298、WO 2014134566、WO 2015130964、WO 2016033243、WO 2016/040084、WO 2016/172424和WO 2016/172425中。

发明概述

简言之，在一个方面，本发明公开了式I的化合物，

或其可药用盐，其中：

R

G

R是

R

R

R

W选自：

其中R

在另一方面，本发明公开了包含式I的化合物或其可药用盐的组合物。

在另一方面，本发明公开了一种治疗HIV感染的方法，其包括向患者给药包含式I的化合物或其可药用盐的组合物。

在另一方面，本发明公开了用于疗法的式(I)的化合物或其可药用盐。

在另一方面，本发明公开了用于治疗HIV感染的式(I)的化合物或其可药用盐。

在另一方面，本发明公开了式(I)的化合物或其可药用盐在制备用于治疗HIV感染的药剂中的用途。

发明详述

优选地，R

W优选是

R优选是

其中R

优选地，本发明的化合物和盐是其中与W-C(O)NH-键合的碳的立体化学如下所绘的那些。

式(I)的化合物的盐是可药用的。这样的盐可以是酸加成盐或碱加成盐。关于合适的可药用盐的综述，参见Berge等人, J. Pharm, Sci., 66, 1-19, 1977。在一个实施方案中，酸加成盐选自盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、硝酸盐、磷酸盐、磷酸氢盐、乙酸盐、苯甲酸盐、琥珀酸盐、蔗糖酸盐（saccharate）、富马酸盐、马来酸盐、乳酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、葡糖酸盐、樟脑磺酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐和双羟萘酸盐。在一个实施方案中，碱加成盐包括金属盐（如钠、钾、铝、钙、镁和锌）和铵盐（如异丙胺、二乙胺、二乙醇胺盐）。其它盐（如三氟乙酸盐和草酸盐）可用于制备式(I)的化合物和它们的可药用盐并包括在本发明的范围内。式(I)的化合物的盐的所有可能的化学计量和非化学计量形式包括在本发明的范围内。可由熟练的化学技术人员通过在合适的溶剂中用适当的酸或碱处理式(I)的化合物、接着结晶和过滤来制备酸和碱加成盐。

本发明的一些化合物以立体异构形式存在。本发明包括所述化合物的所有立体异构形式，包括对映异构体和非对映异构体，包括阻转异构体。术语同手性根据公认惯例用作描述词，以描述作为单一立体异构体的结构。并非在所有情况下都指定绝对立体化学。因此所述化合物在手性中心被绘制为未指定，但标记为同手性，并在该程序中通过其性质识别，例如根据化学技术人员的惯例最先从正相柱或手性柱洗脱。应该指出，所提供的实验程序教导了如何制备确切的化合物，即使没有绘制绝对构型。制备和分离立体异构体的方法是本领域中已知的。本发明包括所述化合物的所有互变异构形式。本发明包括阻转异构体和旋转异构体。

对于式I的化合物，可变取代基的任何实例的范围可独立地与可变取代基的任何其它实例的范围一起使用。因此，本发明包括不同方面的组合。在一些实例中，没有明确指定所有中心的立体化学，因此它们可被称为非对映异构体1和非对映异构体2或对映异构体1或对映异构体2等，并且这些是本领域的化学技术人员理解的。在另一些情况下，可观察到阻转异构体并且这些被理解为慢速或快速转化或甚至完全不转化，取决于处理该化合物的条件。当它们在环境温度下互相转化时，这些被称为阻转异构体的混合物，或当它们分离时，被称为阻转异构体1和阻转异构体2。由于所述化合物通过它们的性质而非来自晶体结构的确切结构指认识别，在本领域中理解的是，如果没有指明，化学结构涵盖和被推断为涵盖阻转异构体。

在本发明的方法中，优选给药途径是口服、通过注射以皮下递送和通过注射以肌内递送。

优选组合物包括适合注射或适合口服给药的组合物。片剂优选用于口服给药。

本发明的化合物被认为充当衣壳抑制剂。

本发明的化合物和它们的盐、溶剂化物或其它可药用衍生物可独自或与其它治疗剂组合使用。本发明的化合物和任何其它药物活性剂可一起或分开给药，并且在分开给药时，给药可同时或以任何顺序序贯进行。选择本发明的化合物和其它药物活性剂的量和给药的相对时机以实现所需组合治疗效果。本发明的化合物及其盐、溶剂化物或其它可药用衍生物与其它治疗剂的组合给药可相伴地在: (1) 包括多种化合物的单一药物组合物；或(2) 各自包括一种化合物的分开的药物组合物中组合给药。或者，该组合可以以序贯方式分开给药，其中一种治疗剂先给药，另一种其次，或反之亦然，且如果适当，不同药剂可以以不同时间表给药。这样的序贯给药可在时间上接近或在时间上遥远。

因此，本发明的化合物可与一种或多种可用于预防或治疗HIV的另外的药剂组合使用。

实施例

根据各种实施方案的本发明的化合物可通过本领域可得的各种方法制备，包括下列方案和以下具体实施例中的方案和信息中的那些方法。本领域的化学技术人员会认识到，具体实施例中的化学提供了可类似地用于合成本发明的许多其它化合物的方法。

如果没有规定，原材料可购得或它们的制备在公开技术中或它们可使用本领域中已用于密切相关的化合物的方法制备。

方案中所用的缩写通常遵循本领域中使用的惯例。实施例中所用的一些具体的化学缩写如下定义：“DMF”为N,N-二甲基甲酰胺；“MeOH”为甲醇；“Ar”为芳基；“TFA”为三氟乙酸；“BOC”为叔丁氧基碳酸酯（t-butoxycarbonate），“DMSO”为二甲亚砜；“h”为小时；“rt”为室温或保留时间（取决于上下文）；“min”为分钟；“EtOAc”为乙酸乙酯；“THF”为四氢呋喃；“Et

本文所用的另一些缩写如下定义：“1 x”为一次，“2 x”为两次，“3 x”为三次，“℃”为摄氏度，“eq”为当量，“g”为克，“mg”为毫克，“L”为升，“mL”为毫升，“μL”为微升，“N”为当量浓度（normal），“M”为摩尔的，“mmol”为毫摩尔，“min”为分钟，“h”为小时，“rt”为室温，“RT”为保留时间，“atm”为大气压，“psi”为磅/平方英寸，“conc.”为浓缩，“sat”或“sat’d”为饱和，“MW”为分子量，“mp”为熔点，“ee”为对映体过量，“MS”或“Mass Spec”为质谱法，“ESI”为电喷雾电离质谱法，“HR”为高分辨率，“HRMS”为高分辨率质谱法，“LCMS”为液相色谱-质谱法，“HPLC”为高压液相色谱法，“RP HPLC”为反相HPLC，“TLC”或“tlc”为薄层色谱法，“NMR”为核磁共振波谱法，“

以下实施例仅作为举例说明提供并且不应被解释为限制本发明的范围。表1给出使用类似方法制备的另外的本发明的化合物。并非在所有情况下都指定绝对立体化学。在没有指定绝对立体化学的实施例中，通过手性或其它色谱法分离的异构体或缓慢相互转化的阻转异构体根据它们从柱中洗脱的顺序标记为“第一”、“第二”等。

N-(7-氨基-1-甲基-1H-吲唑-3-基)-N-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺

向N-(7-氨基-4-氯-1-甲基-1H-吲唑-3-基)-N-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺（100mg, 0.253 mmol）在MeOH（20 mL）中的悬浮液中加入碳载氢氧化钯（22 mg, 0.157 mmol）。反应用氮气吹扫，加盖，然后用氮气吹扫10 min。反应在H2气球下在室温下搅拌18h。经小硅藻土垫滤除催化剂，用MeOH充分洗涤并蒸发至干以产生标题化合物，91 mg，其不经进一步提纯“原样”用于后续步骤。LC/MS m/z = 743.4 (2M+Na): 柱: Waters Aquity UPLC BEHC18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 μm粒子；流动相A: 含0.05% TFA的100%水；流动相B: 含0.05%TFA的100%乙腈；温度: 40℃；梯度: 经1.5 min从2%B至98%B，然后在100%B保持1.5 min；流速: 0.8 mL/min；检测: UV (220 nm)；保留时间: 1.31 min。

N-(7-溴-4-氯-1-甲基-1H-吲唑-3-基)甲磺酰胺

向7-溴-4-氯-1-甲基-1H-吲唑-3-胺（1.40 g, 5.37 mmol）在DCM（30 mL）中的溶液中加入Hunig's碱（3.75 mL, 21.5 mmol），然后在冰浴中冷却反应并加入甲磺酰氯（1.26mL, 16.1 mmol）。反应混合物在此温度下搅拌1h（形成沉淀物）。混合物然后用二氯甲烷（100 mL）稀释并用水、1 M HCl和盐水洗涤，干燥（Na

N-(7-溴-4-氯-1-甲基-1H-吲唑-3-基)-N-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺

向N-(7-溴-4-氯-1-甲基-1H-吲唑-3-基)甲磺酰胺（1.3 g, 3.84 mmol）和1-(氯甲基)-4-甲氧基苯（0.625 mL, 4.61 mmol）在DMF（30 mL）中的混合物中加入碳酸铯（1.626g, 4.99 mmol）并将混合物在80℃下加热2 h。将混合物倒入水（100 mL）中并用EtOAc（50ml, 2x）萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO

N-(7-氨基-4-氯-1-甲基-1H-吲唑-3-基)-N-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺

根据参考资料: Andersen, Jacob等人,

7-溴-4-氯-1H-吲唑-3-胺

在微波小瓶中用肼（1.3 mL, 40.6 mmol）处理3-溴-6-氯-2-氟苯腈（1.50 g,6.40 mmol）在乙醇（12.80 ml）中的溶液，混合物在微波反应器中在120℃下加热35 min。将反应混合物（浅黄色固体）溶于乙酸乙酯中，用水、盐水洗涤，经Na

2-(7-溴-4-氯-1H-吲唑-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮

将邻苯二甲酸酐（1.352 g, 9.13 mmol）添加到在微波小瓶中的7-溴-4-氯-1H-吲唑-3-胺（1.5 g, 6.09 mmol）在二氧杂环己烷（20 mL）中的溶液中并在微波反应器中在150℃下加热2 h。将反应混合物浓缩。米色固体在硅胶（220 g, Isco柱）上使用0-40%乙酸乙酯/己烷提纯。将所需级分浓缩以产生浅粉色固体（1.2 g）。

2-(7-溴-4-氯-1-环丙基-1H-吲唑-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮

向圆底烧瓶中装载2-(7-溴-4-氯-1H-吲唑-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮（0.988 g,2.62 mmol）、环丙基硼酸（0.676 g, 7.87 mmol）、碳酸钠（0.834 g, 7.87 mmol）、乙酸铜(II)（0.477 g, 2.62 mmol）和2,2'-联吡啶（0.410 g, 2.62 mmol），它们悬浮在DCE（26.2ml）中，用氮气吹扫并在80℃下加热6h。将反应混合物过滤并浓缩。残留物在二氧化硅（220g Isco柱）上使用0-40%乙酸乙酯/己烷提纯。将所需级分浓缩以产生浅黄色固体（0.52 g）。LC/MS: m/z = 415.8 [M+H]

7-溴-4-氯-1-环丙基-1H-吲唑-3-胺

2-(7-溴-4-氯-1-环丙基-1H-吲唑-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮（0.92 g, 2.208mmol）和水合肼（0.54 mL, 11.04 mmol）在乙醇（18.40 mL）/THF（18.40 mL）中的混合物在室温下搅拌3 h并浓缩。将残留物溶解在DMSO中并在硅胶（120 g Isco柱）上使用10-100%乙酸乙酯提纯。将所需级分浓缩以产生浅黄色固体（0.5 g）。

N-(7-溴-4-氯-1-环丙基-1H-吲唑-3-基)甲磺酰胺

向7-溴-4-氯-1-环丙基-1H-吲唑-3-胺（0.250 g, 0.872 mmol）在DCM（4.4 mL）中的溶液中加入DIPEA（0.610 ml, 3.49 mmol），然后反应在冰浴中冷却并加入甲磺酰氯（0.14 ml, 1.745 mmol）。反应混合物在此温度下搅拌1h（形成沉淀物）。混合物然后用二氯甲烷（10 mL）稀释并用水、1 M HCl和盐水洗涤，干燥（Na

N-(7-溴-4-氯-1-环丙基-1H-吲唑-3-基)-N-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺

将4-甲氧基苄基氯（0.120 ml, 0.889 mmol）添加到N-(7-溴-4-氯-1-环丙基-1H-吲唑-3-基)甲磺酰胺（0.27 g, 0.740 mmol）和Cs

N-(4-氯-1-环丙基-7-((二苯基亚甲基)氨基)-1H-吲唑-3-基)-N-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺

N-(7-溴-4-氯-1-环丙基-1H-吲唑-3-基)-N-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺（0.36 g,0.743 mmol）、二苯酮缩亚胺（diphenylmethanimine）（0.137 ml, 0.819 mmol）、PdOAc

N-(7-氨基-4-氯-1-环丙基-1H-吲唑-3-基)-N-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺

向N-(4-氯-1-环丙基-7-((二苯基亚甲基)氨基)-1H-吲唑-3-基)-N-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺（0.284 g, 0.485 mmol）在THF（4.9 ml）中的亮黄色溶液中加入HCl（1.2 ml,4.85 mmol）和水（0.044 ml, 2.427 mmol））。所得深橙色溶液在室温下搅拌2 h并浓缩。将残留物溶于乙酸乙酯中，用2 M K

7-溴-4-氯-1-异丙基-1H-吲唑-3-胺

将甲醇钠（0.54 g, 9.47 mmol）添加到3-溴-6-氯-2-氟苯腈（0.5 g, 2.133mmol）和盐酸异丙肼（0.524 g, 4.73 mmol）在乙醇（5 mL）中的溶液中，混合物在微波反应器中在120℃下加热35 min。将反应混合物（浅黄色固体）溶于乙酸乙酯中，用水、盐水洗涤，经Na

N-(7-溴-4-氯-1-异丙基-1H-吲唑-3-基)甲磺酰胺

向7-溴-4-氯-1-异丙基-1H-吲唑-3-胺（0.159 g, 0.551 mmol）在CH

N-(7-溴-4-氯-1-异丙基-1H-吲唑-3-基)-N-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺

将4-甲氧基苄基氯（0.07 ml, 0.524 mmol）添加到N-(7-溴-4-氯-1-异丙基-1H-吲唑-3-基)甲磺酰胺（0.16 g, 0.436 mmol）和Cs

N-(4-氯-7-((二苯基亚甲基)氨基)-1-异丙基-1H-吲唑-3-基)-N-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺

N-(7-溴-4-氯-1-异丙基-1H-吲唑-3-基)-N-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺（0.181 g,0.372 mmol）、二苯酮缩亚胺（diphenylmethanimine）（0.074 g, 0.410 mmol）、PdOAc

N-(7-氨基-4-氯-1-异丙基-1H-吲唑-3-基)-N-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺

向N-(4-氯-7-((二苯基亚甲基)氨基)-1-异丙基-1H-吲唑-3-基)-N-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺（0.14 g, 0.232 mmol）在THF（2.316 ml）中的亮黄色溶液中加入HCl（0.6 ml,2.316 mmol）和水（0.02 ml, 1.158 mmol）（其在室温下轻微放热）。所得深橙色溶液在室温下搅拌2 h（其变成浅黄色溶液）。将反应混合物浓缩并将残留物溶于乙酸乙酯中，用2 MK

N-(7-溴-4-氯-1-(2,2-二氟乙基)-1H-吲唑-3-基)甲磺酰胺

在N

N-(7-溴-4-氯-1-(2,2-二氟乙基)-1H-吲唑-3-基)环丙烷磺酰胺

在N

N-(7-溴-4-氯-1-(2,2-二氟乙基)-1H-吲唑-3-基)-N-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺

将4-甲氧基苄基氯（0.250 ml, 1.853 mmol）添加到N-(7-溴-4-氯-1-(2,2-二氟乙基)-1H-吲唑-3-基)甲磺酰胺（0.6 g, 1.544 mmol）和Cs

N-(7-溴-4-氯-1-(2,2-二氟乙基)-1H-吲唑-3-基)-N-(4-甲氧基苄基)环丙烷磺酰胺

将4-甲氧基苄基氯（0.668 ml, 4.95 mmol）添加到N-(7-溴-4-氯-1-(2,2-二氟乙基)-1H-吲唑-3-基)环丙烷磺酰胺（1.71 g, 4.12 mmol）和Cs

N-(4-氯-1-(2,2-二氟乙基)-7-((二苯基亚甲基)氨基)-1H-吲唑-3-基)-N-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺

N-(7-溴-4-氯-1-(2,2-二氟乙基)-1H-吲唑-3-基)-N-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺（0.73 g, 1.435 mmol）、二苯酮缩亚胺（diphenylmethanimine）（0.27 ml, 1.583 mmol）、PdOAc

N-(4-氯-1-(2,2-二氟乙基)-7-((二苯基亚甲基)氨基)-1H-吲唑-3-基)-N-(4-甲氧基苄基)环丙烷磺酰胺

N-(7-溴-4-氯-1-(2,2-二氟乙基)-1H-吲唑-3-基)-N-(4-甲氧基苄基)环丙烷磺酰胺（0.83 g, 1.552 mmol）、二苯酮缩亚胺（diphenylmethanimine）（0.287 ml, 1.712mmol）、PdOAc

N-(7-氨基-4-氯-1-(2,2-二氟乙基)-1H-吲唑-3-基)-N-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺

向N-(4-氯-1-(2,2-二氟乙基)-7-((二苯基亚甲基)氨基)-1H-吲唑-3-基)-N-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺（0.74 g, 1.215 mmol）在THF（12.15 ml）中的亮黄色溶液中加入HCl（3 mL, 12.15 mmol）和水（0.11 mL, 6.07 mmol）（其在室温下轻微放热）。所得深橙色溶液在室温下搅拌2 h（其变成浅黄色溶液）。将反应混合物浓缩并将残留物溶于乙酸乙酯中，用2 M K

N-(7-氨基-4-氯-1-(2,2-二氟乙基)-1H-吲唑-3-基)-N-(4-甲氧基苄基)环丙烷磺酰胺

根据对N-(7-氨基-4-氯-1-(2,2-二氟乙基)-1H-吲唑-3-基)-N-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺描述的一般程序使用N-(4-氯-1-(2,2-二氟乙基)-7-((二苯基亚甲基)氨基)-1H-吲唑-3-基)-N-(4-甲氧基苄基)环丙烷磺酰胺制备。LC/MS: m/z = 471.1 [M+H]

(S)-(1-((4-氯-3-(N-(4-甲氧基苄基)甲基磺酰胺基)-1-甲基-1H-吲唑-7-基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)-1-亚氨基丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯

N-(7-氨基-4-氯-1-甲基-1H-吲唑-3-基)-N-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺（500 mg,1.27 mmol）和(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙亚胺酸乙酯（416 mg,1.27 mmol）在甲苯（3 mL）中的悬浮液在微波中在110℃下加热24 h。然后将混合物浓缩并通过Biotage（5-100% EtOAc/己烷）提纯以提供为棕色固体的标题化合物（130 mg）。

(S)-(1-(1-(4-氯-3-(N-(4-甲氧基苄基)甲基磺酰胺基)-1-甲基-1H-吲唑-7-基)-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)氨基甲酸叔丁酯

(S)-(1-((4-氯-3-(N-(4-甲氧基苄基)甲基磺酰胺基)-1-甲基-1H-吲唑-7-基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)-1-亚氨基丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯（75 mg, 0.11 mmol）、丙炔酸乙酯（22 mg, 0.22 mmol）和乙醇（2 mL）的混合物在密封管中在80℃下加热16 h。然后将混合物冷却，浓缩并通过Biotage（5-100% EtOAc/己烷）提纯以提供标题化合物（40 mg），其是立体异构体的混合物。LC/MS: m/z = 729.2 [M+H]

(S)-N-(7-(2-(1-氨基-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-6-氧代嘧啶-1(6H)-基)-4-氯-1-甲基-1H-吲唑-3-基)-N-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺, HCl

HCl（1.30 mL, 5.21 mmol, 4M在二氧杂环己烷中）和(S)-(1-(1-(4-氯-3-(N-(4-甲氧基苄基)甲基磺酰胺基)-1-甲基-1H-吲唑-7-基)-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)氨基甲酸叔丁酯（38 mg, 0.05 mmol）在室温下搅拌1 h，然后浓缩以产生标题化合物（34 mg），其是立体异构体的混合物。LC/MS: m/z = 629.1 [M+H]

N-((S)-1-(1-(4-氯-1-甲基-3-(甲基磺酰胺基)-1H-吲唑-7-基)-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-2-((3bS,4aR)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1H-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酰胺实施例1和实施例2

向(S)-N-(7-(2-(1-氨基-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-6-氧代嘧啶-1(6H)-基)-4-氯-1-甲基-1H-吲唑-3-基)-N-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺, HCl（34 mg, 0.05 mmol）和2-((3bS,4aR)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1H-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酸（15 mg, 0.06 mmol）在THF（1.5 mL）中的混合物中加入DIEA（0.03mL, 0.15 mmol），接着加入HATU（21 mg, 0.06 mmol），所得混合物在室温下搅拌2 h，然后浓缩。将残留物溶于DCM（0.5 mL）中并加入三氟甲磺酸（0.05 mL）和TFA（1 mL）。混合物在室温下搅拌1 h，浓缩并通过prep-HPLC在下列条件下提纯以取得两种分离析，各自作为立体异构体的混合物。Prep-HPLC: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-μm粒子；流动相A: 含10-mM乙酸铵的5:95乙腈:水；流动相B: 含10-mM乙酸铵的95:5乙腈:水；梯度: 在20% B保持0分钟, 经20分钟20-60% B，然后在100% B保持5分钟；流速: 20 mL/min。合并含有所需产物的级分并干燥。检测: MS和UV (220 nm)。

实施例1: 第一洗脱物（13 mg, 两种立体异构体的混合物）。LC-MS保留时间 =1.68 min；m/z = 755.1 [M+H]

实施例2: 第二洗脱物（14 mg, 两种立体异构体的混合物）。LC-MS保留时间 =1.73 min；m/z = 755.1 [M+H]

(S)-N-((6P)-7-(2-(1-氨基-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-6-氧代嘧啶-1(6H)-基)-4-氯-1-甲基-1H-吲唑-3-基)甲磺酰胺

和(S)-N-((6M)-7-(2-(1-氨基-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-6-氧代嘧啶-1(6H)-基)-4-氯-1-甲基-1H-吲唑-3-基)甲磺酰胺

向(S)-(1-(1-(4-氯-3-(N-(4-甲氧基苄基)甲基磺酰胺基)-1-甲基-1H-吲唑-7-基)-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)氨基甲酸叔丁酯（160 mg,0.219 mmol）在二氯甲烷（DCM）（2 mL）中的搅拌溶液中加入TFA（1 mL, 12.98 mmol），接着加入三氟甲磺酸（0.039 mL, 0.439 mmol），所得溶液在室温下搅拌2h。在t=2h的LCMS分析表明完全转化（阻转异构体的大约1:3混合物）。在旋转蒸发仪上将溶液浓缩到最少。残留物在EtOAc（50 mL）和NaOH水溶液（2M, 5 mL）之间分配。测试水相并测定为pH >=8.0。分离有机相并经Na

也回收第一洗脱的次要阻转异构体(S)-N-((6M)-7-(2-(1-氨基-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-6-氧代嘧啶-1(6H)-基)-4-氯-1-甲基-1H-吲唑-3-基)甲磺酰胺（15 mg, 0.029mmol, 13.43%收率）；在该物质中也存在对映异构体，该物质是外消旋的。

实施例3: N-((R)-1-((1M)-1-(4-氯-1-甲基-3-(甲基磺酰胺基)-1H-吲唑-7-基)-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-2-((3bS,4aR)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1H-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酰胺

和

实施例4: N-((S)-1-((1P)-1-(4-氯-1-甲基-3-(甲基磺酰胺基)-1H-吲唑-7-基)-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-2-((3bS,4aR)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1H-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酰胺

向2-((3bS,4aR)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1H-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酸（83 mg, 0.314 mmol）和(S)-N-((6P)-7-(2-(1-氨基-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-6-氧代嘧啶-1(6H)-基)-4-氯-1-甲基-1H-吲唑-3-基)甲磺酰胺（160 mg, 0.314 mmol）在四氢呋喃（THF）（4 mL）/ N,N-二甲基甲酰胺（DMF）（1 mL）中的溶液中加入DIEA（0.165 mL, 0.943 mmol），接着加入HATU（131 mg, 0.346 mmol），并将所得混合物在室温下搅拌3 h。向混合物中加入氨/甲醇（2M, 0.5 mL），然后将混合物搅拌30min。然后加入水，混合物用乙酸乙酯萃取，用盐水洗涤，干燥（Na2SO4），过滤并在真空中浓缩。对残留物施以硅胶色谱法（己烷:EtOAc 95:5→50:50）以提供为非对映异构体的混合物的纯化产物。分离的物质通过SFC（Chiralpak IA制备柱, 10 x 250 mm, 5 μm；流动相:60% MeOH/CO

第一洗脱异构体，实施例3:

第二洗脱异构体，实施例4:

实施例5: N-((R)-1-((1M)-1-(4-氯-1-甲基-3-(甲基磺酰胺基)-1H-吲唑-7-基)-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-2-((3bS,4aR)-5,5-二氟-3-(三氟甲基)-3b,4,4a,5-四氢-1H-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酰胺

和

实施例6: N-((S)-1-((1P)-1-(4-氯-1-甲基-3-(甲基磺酰胺基)-1H-吲唑-7-基)-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-2-((3bS,4aR)-5,5-二氟-3-(三氟甲基)-3b,4,4a,5-四氢-1H-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酰胺

向2-((3bS,4aR)-5,5-二氟-3-(三氟甲基)-3b,4,4a,5-四氢-1H-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酸（22.18 mg, 0.079 mmol）和(S)-N-((6P)-7-(2-(1-氨基-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-6-氧代嘧啶-1(6H)-基)-4-氯-1-甲基-1H-吲唑-3-基)甲磺酰胺（40 mg, 0.079 mmol）在N,N-二甲基甲酰胺（DMF）（2 mL）中的溶液中加入DIEA（0.041mL, 0.236 mmol），接着加入HATU（32.9 mg, 0.086 mmol），所得混合物在室温下搅拌3 h。向混合物中加入氨/甲醇（2M, 0.5 mL），然后将混合物搅拌30 min。然后加入水，混合物用乙酸乙酯萃取，用盐水洗涤，干燥（Na

第一洗脱异构体，实施例5:

第二洗脱异构体，实施例6:

生物方法

HIV细胞培养测定 - MT-2细胞、293T细胞和NL

通过使用半数有效方程的指数形式计算50%有效浓度（EC

使用与抗病毒测定中所述相同的程序测定化合物细胞毒性和相应的CC

本公开不限于上述示例性实施例，并且这些实施例应在所有方面被视为示例性而非限制性的，参考所附权利要求书而非上述实施例，因此意在涵盖落在权利要求书的等同含义和范围内的所有变化。